Androgenoverskudd som årsak til adipogen dysfunksjon hos PCOS-kvinner

Mål 1. Undersøke mekanismer for subkutan abdominal fettutvikling (fett) hos normalvektige PCOS-kvinner vs. BMI- og alderstilpasset normale (kontroll) kvinner.

Emner og klinisk vurdering: Vi vil rekruttere 16 magre (18,5-25 kg/M2) PCOS-personer og 16 alders- og BMI-matchede kontroller. Forsøkspersonene vil fylle ut et standardisert spørreskjema som legger vekt på menstruasjonsdating, unormal hårvekst og akne. Spørreskjemaet vil også kommentere alder, røykestatus, medisiner, kirurgisk historie og familiehistorier om overflødig hårvekst hos kvinnelige slektninger og diabetes hos foreldre eller søsken for eksklusjonskriterier og for inkludering av noen grunnleggende egenskaper som kovariater. Emner vil også gjennomgå en fysisk undersøkelse; hirsutisme vil bli skåret etter den modifiserte Ferriman-Gallwey (mFG) metoden. Transvaginal sonografi (TVUS) vil bli utført for å fastslå tilstedeværelse eller fravær av polycystiske eggstokker. En screening blodprøve vil bli tatt for bestemmelse av steroidhormoner, SHBG, TSH og prolaktin.

Kvinner av enhver etnisitet mellom 18 og 35 år vil bli rekruttert. PCOS-pasienter vil bli diagnostisert etter 1990 NIH-kriterier. Kontroller vil ha regelmessige menstruasjonssykluser med 21 til 35 dagers intervaller, et progesteronnivå i lutealfasen (P4) > 3 ng/ml, og ingen tegn på hirsutisme, akne, alopecia, polycystiske eggstokker eller endokrin dysfunksjon. Ekskluderingskriterier er: nåtid/tidligere historie (

Studier vil bli utført i follikkelfasen hos kontroller og under amenoré hos PCOS-kvinner. Alle forsøkspersoner vil gjennomgå en modifisert intravenøs glukosetoleransetest med hyppige prøver (FSIGTT). Glukose i form av en 50 % oppløsning (0,3 g/kg) og vanlig humant insulin (0,03 enheter/kg) injiseres gjennom en intravenøs slange ved henholdsvis 0 og 20 minutter. Blod vil bli samlet ved -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 og 180 minutter for glukose- og insulinbestemmelser. Matematisk modellering av serielle glukose- og insulinbestemmelser vil beregne: insulinsensitivitetsindeks (SI, dvs. virkningen av insulin for å akselerere glukoseopptak og undertrykke glukoseproduksjon), glukoseeffektivitetsindeks (SG, dvs. den kombinerte effekten av glukose for å øke glukoseopptaket og undertrykke glukose) endogen glukoseproduksjon ved basale insulinnivåer) og den akutte responsen på glukose (AIRG).

Adipocytter isolering og kultur: Omtrent 1-2 g fett vil bli oppnådd fra nedre SC abdomen ved bruk av standard prosedyrer under lokalbedøvelse. Adipocytter (fettceller) og omkringliggende fettvev vil bli isolert for å måle antall fettceller og diameter, lipidakkumulering og funksjon, adiponektin og stamcelleutvikling.

Prosedyrer: Alle prosedyrer vil bli utført hos normale kvinner og PCOS-kvinner ved studiestart.

Jeg). Venepunktur: Fastende blod vil bli samlet inn for blodtelling, kjemipanel, LH, FSH, total/fri T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-mullerian hormon (AMH), SHBG, adiponectin, leptin, IL-6 , lipidprofil og frie fettsyrer (FFA).

ii). Kroppssammensetning: Kroppssammensetning vil bli vurdert ved BMI, midje-til-hofte-omkrets og DEXA-skanning. Girths vil bli målt ved midjen (den smaleste delen av torsoen mellom ribbeina og navlen) og hoftene (største fremspring av hofteregionen, over setefolden). For totalt kroppsfett og regional fettfordeling, vil hele kroppsskanninger bli utført ved bruk av DEXA-bildebehandling.

iii). Kroppsfettfordeling: DEXA i hele kroppen vil måle magefett (dvs. området mellom diafragmakuppelen og toppen av hoften. DEXA-bilder av hele kroppen vil også bestemme % kroppsfett; fettfri kroppsmasse; fett på hele kroppen, magen og beina; og mage/legg fettmasseforhold. Benregionen er området under toppen av hoftebenet (større trochanter).

iv). Ovarietesting: Transvaginal ultralyd vil bli utført i follikulær fase hos kontroller og under amenoré hos PCOS-kvinner. Ovarievolum vil bli beregnet. Antral follikkelnummer, definert som totalt follikkelantall (2-9 mm i diameter) av begge eggstokkene, vil bli bestemt av 1 etterforsker (D.A.D.). Polycystiske eggstokker vil bli identifisert, med en slik eggstokk tilstrekkelig til å definere PCO

Mål 2. Bestem rollen til androgen i SC abdominal ASC-dysfunksjon og dets forhold til metabolisme hos normalvektige PCOS-kvinner gjennom androgen. antagonisme ved klinisk bruk av flutamid vs. placebo.

Modifiserte FSIGTT og adipogene studier: Den modifiserte FSIGTT og alle adipogene studier utført ved studiestart vil bli gjentatt ved slutten av 6-måneders flutamid vs. placebo intervensjon hos PCOS kvinner.

Prosedyrer: Alle prosedyrer utført ved studiestart vil også bli gjentatt på slutten av de seks 28-dagers syklusene med flutamid vs. placebo-intervensjon hos PCOS-kvinner. I tillegg vil det utføres månedlige leverfunksjonsstudier for å oppdage mulige forhøyelser av serumtransaminasenivåer over normalområdet under flutamid kontra placebobehandling.

Menstruasjonsjournal: Ovulasjonsfrekvens vil bli bestemt ved å la forsøkspersonene føre en daglig menstruasjonsjournal og samle ukentlige første morgenurinprøver for mulige progesteron- og kreatininbestemmelser. Urinprøver vil bli frosset for senere analyse for å fastslå bevis på eggløsning, etter behov.

Mål 3. Identifisere epigenetiske endringer som ligger til grunn for SC abdominal ASC-dysfunksjon hos normalvektige PCOS-kvinner vs. BMI- og alderstilpassede kontroller.

Subkutane abdominale fettstamceller fra PCOS og kontrollkvinner vil bli dyrket til nydannede fettceller (adipocytter) i laboratoriet. Celler vil bli studert før og etter 6 måneders behandling med placebo vs flutamid for endringer i celleepigenomet (metylering, RNA-sekvenser og histonmodifikasjon).