Liiallinen androgeeni adipogeenisen toimintahäiriön syynä PCOS-naisilla

Tavoite 1. Tutkia ihonalaisen vatsan rasvan (rasvan) kehittymisen mekanismeja normaalipainoisilla PCOS-naisilla vs. BMI- ja ikäsovitettuja normaaleja (verrokki) naisia.

Koehenkilöt ja kliininen arviointi: Rekrytoimme 16 laihaa (18,5-25 kg/M2) PCOS-potilasta ja 16 iän ja BMI:n mukaista kontrollia. Koehenkilöt täyttävät standardoidun kyselylomakkeen, jossa korostetaan kuukautisia, epänormaalia karvankasvua ja aknea. Kyselylomakkeeseen merkitään myös ikä, tupakointitila, lääkkeet, leikkaushistoria ja sukuhistoria naissukulaisten liiallisesta karvankasvusta ja vanhempien tai sisarusten diabeteksesta poissulkemiskriteereiksi ja joidenkin perusominaisuuksien sisällyttämiseksi yhteismuuttujiksi. Koehenkilöille suoritetaan myös fyysinen tarkastus; hirsutismi pisteytetään modifioidulla Ferriman-Gallwey (mFG) -menetelmällä. Transvaginaalinen sonografia (TVUS) suoritetaan monirakkuisten munasarjojen olemassaolon tai puuttumisen määrittämiseksi. Seulontaverinäyte otetaan steroidihormonien, SHBG:n, TSH:n ja prolaktiinin määrittämiseksi.

Palvelukseen otetaan 18–35-vuotiaita naisia ​​mistä tahansa etnisestä alkuperästä. PCOS-potilaat diagnosoidaan 1990 NIH-kriteerien mukaan. Kontrolleilla on säännölliset kuukautiskierrot 21–35 päivän välein, luteaalivaiheen progesteronitaso (P4) > 3 ng/ml, eikä niissä ole merkkejä hirsutismista, aknesta, hiustenlähtöstä, munasarjojen monirakkulaisuudesta tai endokriinisistä toimintahäiriöistä. Poissulkemiskriteerit ovat: nykyinen/menneisyys (

Tutkimukset suoritetaan follikulaarisessa vaiheessa kontrolleissa ja amenorrean aikana PCOS-naisilla. Kaikille koehenkilöille tehdään muunnettu usein näytteenotto suonensisäinen glukoositoleranssitesti (FSIGTT). Glukoosi 50-prosenttisena liuoksena (0,3 g/kg) ja tavallinen ihmisinsuliini (0,03 yksikköä/kg) ruiskutetaan laskimonsisäistä letkua pitkin 0 ja 20 minuutin kohdalla. Veri otetaan -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 ja 180 minuuttia glukoosi- ja insuliinimäärityksiä varten. Glukoosin ja insuliinin sarjamäärityksien matemaattinen mallinnus laskee: insuliiniherkkyysindeksin (SI eli insuliinin vaikutus glukoosin ottoa kiihdyttämiseen ja glukoosin tuotantoa estävään toimintaan), glukoosin tehokkuusindeksin (SG eli glukoosin yhteisvaikutus glukoosin ottoa ja glukoosin ottoa hidastaen). endogeeninen glukoosin tuotanto perusinsuliinitasoilla) ja akuutti vaste glukoosille (AIRG).

Rasvasolujen eristäminen ja viljely: Noin 1-2 grammaa rasvaa saadaan alavatsan vatsasta tavanomaisilla menetelmillä paikallispuudutuksessa. Adiposyytit (rasvasolut) ja ympäröivä rasvakudos eristetään rasvasolujen lukumäärän ja halkaisijan, lipidien kertymisen ja toiminnan, adiponektiinin ja kantasolujen kehityksen mittaamiseksi.

Toimenpiteet: Kaikki toimenpiteet suoritetaan normaaleille ja PCOS-naisille tutkimuksen alussa.

i). Suonenpunktio: Paastoverta kerätään verikuvaa, kemian paneelia, LH, FSH, kokonais/vapaa T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-Muller-hormoni (AMH), SHBG, adiponektiini, leptiini, IL-6 varten. , lipidiprofiili ja vapaat rasvahapot (FFA).

ii). Kehon koostumus: Kehon koostumus arvioidaan BMI:llä, vyötäröstä lantioon ulottuvalla ympärysmitalla ja DEXA-skannauksella. Vyöt mitataan vyötäröstä (vartalon kapein kohta kylkiluiden ja navan välissä) ja lantiosta (lantion alueen suurin ulkonema pakarapoimun yläpuolella). Koko kehon rasvan ja alueellisen rasvan jakautumisen selvittämiseksi suoritetaan koko kehon skannaus käyttämällä DEXA-kuvausta.

iii). Kehon rasvan jakautuminen: Koko kehon DEXA mittaa vatsan rasvaa (eli pallean kuvun ja lonkan yläosan välisen alueen. Koko kehon DEXA-kuvat määrittävät myös kehon rasvaprosentin; rasvaton kehon massa; koko kehon, vatsan ja jalkojen rasva; ja vatsan/jalkojen rasvamassasuhde. Jalkaalue on lonkkaluun yläosan alapuolella oleva alue (suurempi trochanteri).

iv). Munasarjatestaus: Transvaginaalinen ultraääni suoritetaan follikulaarisessa vaiheessa kontrolleilla ja amenorrean aikana PCOS-naisilla. Munasarjojen tilavuus lasketaan. Antaalisen follikkelin lukumäärä, joka määritellään molempien munasarjojen kokonaismääräksi (halkaisijaltaan 2-9 mm), määrittää yksi tutkija (D.A.D.). Polysystiset munasarjat tunnistetaan, ja yksi tällainen munasarja riittää määrittämään PCO:n

Tavoite 2. Selvitä androgeenin rooli SC-vatsan ASC-häiriöissä ja sen suhde aineenvaihduntaan normaalipainoisilla PCOS-naisilla androgeenien kautta. flutamidin kliinisen käytön antagonismi vs. lumelääke.

Modifioidut FSIGTT- ja adipogeeniset tutkimukset: Muokatut FSIGTT-tutkimukset ja kaikki tutkimuksen alussa tehdyt adipogeeniset tutkimukset toistetaan PCOS-naisilla kuuden kuukauden flutamidi- ja plasebo-intervention lopussa.

Toimenpiteet: Kaikki tutkimuksen alussa suoritetut toimenpiteet toistetaan myös PCOS-naisilla kuuden 28 päivän flutamidin vs. lumelääkehoitojakson lopussa. Lisäksi suoritetaan kuukausittaisia ​​maksan toimintatutkimuksia, jotta havaitaan seerumin transaminaasiarvojen mahdollinen nousu normaalin alueen yläpuolelle flutamidi- ja plasebohoidon aikana.

Kuukautiset: Ovulaatiotiheys määritetään pyytämällä koehenkilöitä pitämään päivittäinen kuukautiset ja keräämään viikoittain ensimmäiset aamuvirtsanäytteet mahdollisia progesteroni- ja kreatiniinimäärityksiä varten. Virtsanäytteet jäädytetään myöhempää analysointia varten ovulaation todisteiden määrittämiseksi tarvittaessa.

Tavoite 3. Tunnista epigeneettiset muutokset, jotka ovat taustalla SC-vatsan ASC-häiriön normaalipainoisilla PCOS-naisilla vs. BMI- ja ikäsovitetut kontrollit.

PCOS:n ja kontrollinaisten ihonalaiset vatsan rasvakantasolut kasvatetaan laboratoriossa vasta muodostuneiksi rasvasoluiksi (adiposyyteiksi). Soluja tutkitaan ennen ja jälkeen 6 kuukauden lumelääkehoidon vs. flutamidilla solujen epigenomissa tapahtuvien muutosten varalta (metylaatio, RNA-sekvenssit ja histonimuunnos).