Androgeenovermaat als oorzaak voor adipogene disfunctie bij PCOS-vrouwen

Doel 1. Onderzoek de mechanismen van de onderhuidse ontwikkeling van adipeus (vet) in de buik bij vrouwen met PCOS met een normaal gewicht versus BMI- en normale (controle)vrouwen van dezelfde leeftijd.

Proefpersonen en klinische beoordeling: We zullen 16 magere (18,5-25 kg/M2) PCOS-proefpersonen en 16 leeftijds- en BMI-gematchte controles rekruteren. Onderwerpen zullen een gestandaardiseerde vragenlijst invullen die de nadruk legt op menstruele dating, abnormale haargroei en acne. De vragenlijst zal ook annoteren leeftijd, rookstatus, medicijnen, chirurgische geschiedenis en familiegeschiedenis van overmatige haargroei bij vrouwelijke familieleden en diabetes bij ouders of broers en zussen voor uitsluitingscriteria en voor opname van enkele basiskenmerken als covariaten. Onderwerpen zullen ook een lichamelijk onderzoek ondergaan; hirsutisme wordt gescoord door de gemodificeerde Ferriman-Gallwey (mFG) methode. Transvaginale echografie (TVUS) zal worden uitgevoerd om de aan- of afwezigheid van polycysteuze eierstokken te bepalen. Een screeningsbloedmonster zal worden verkregen voor bepalingen van steroïde hormonen, SHBG, TSH en prolactine.

Vrouwen van elke etniciteit tussen de 18 en 35 jaar zullen worden aangeworven. PCOS-patiënten zullen worden gediagnosticeerd volgens de NIH-criteria van 1990. Controles hebben regelmatige menstruatiecycli met tussenpozen van 21 tot 35 dagen, een luteale fase progesteron (P4)-niveau> 3 ng / ml en geen bewijs van hirsutisme, acne, alopecia, polycysteuze eierstokken of endocriene disfunctie. Uitsluitingscriteria zijn: huidige/verleden geschiedenis (

Studies zullen worden uitgevoerd in de folliculaire fase bij controles en tijdens amenorroe bij vrouwen met PCOS. Alle proefpersonen ondergaan een gemodificeerde frequent bemonsterde intraveneuze glucosetolerantietest (FSIGTT). Glucose in de vorm van een 50%-oplossing (0,3 g/kg) en gewone humane insuline (0,03 eenheden/kg) worden via een intraveneuze lijn geïnjecteerd op respectievelijk 0 en 20 minuten. Bloed wordt verzameld op -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 en 180 min voor glucose- en insulinebepalingen. Wiskundige modellering van seriële glucose- en insulinebepalingen berekent: insulinegevoeligheidsindex (SI, d.w.z. de werking van insuline om glucoseopname te versnellen en glucoseproductie te onderdrukken), glucose-effectiviteitsindex (SG, d.w.z. het gecombineerde effect van glucose om glucoseopname te verbeteren en te onderdrukken endogene glucoseproductie bij basale insulinespiegels) en de acute respons op glucose (AIRG).

Isolatie en kweek van adipocyten: ongeveer 1-2 gram vet zal worden verkregen uit de onderbuik van de SC met behulp van standaardprocedures onder plaatselijke verdoving. Adipocyten (vetcellen) en omringend vetweefsel zullen worden geïsoleerd om het aantal en de diameter van de adipocytcellen, de accumulatie en functie van lipiden, adiponectine en de ontwikkeling van stamcellen te meten.

Procedures: Alle procedures zullen worden uitgevoerd bij normale en PCOS-vrouwen aan het begin van de studie.

i). Venapunctie: nuchter bloed wordt verzameld voor bloedtelling, chemiepanel, LH, FSH, totaal / vrij T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-mulleriaans hormoon (AMH), SHBG, adiponectine, leptine, IL-6 , lipidenprofiel en vrije vetzuren (FFA's).

ii). Lichaamssamenstelling: De lichaamssamenstelling wordt beoordeeld aan de hand van BMI, taille-tot-heupomtrek en DEXA-scanning. De singel wordt gemeten ter hoogte van de taille (smalste deel van de romp tussen ribben en navel) en heupen (grootste uitsteeksel van het heupgebied, boven de bilplooi). Voor het totale lichaamsvet en de regionale vetverdeling zullen scans van het hele lichaam worden uitgevoerd met behulp van DEXA-beeldvorming.

iii). Verdeling van lichaamsvet: DEXA voor het hele lichaam meet buikvet (d.w.z. het gebied tussen de koepel van het middenrif en de bovenkant van de heup. DEXA-beelden van het totale lichaam zullen ook het % lichaamsvet bepalen; vetvrije lichaamsmassa; totaal lichaams-, buik- en beenvet; en de verhouding buik/beenvetmassa. Het beengebied is dat gebied onder de bovenkant van het heupbot (trochanter major).

iv). Eierstoktesten: Transvaginale echografie wordt uitgevoerd in de folliculaire fase bij controles en tijdens amenorroe bij vrouwen met PCOS. Het ovariumvolume wordt berekend. Het aantal antrale follikels, gedefinieerd als het totale aantal follikels (2-9 mm in diameter) van beide eierstokken, wordt bepaald door 1 onderzoeker (D.A.D.). Er zullen polycysteuze eierstokken worden geïdentificeerd, waarbij één zo'n eierstok voldoende is om PCO te definiëren

Doel 2. Bepaal de rol van androgeen bij SC abdominale ASC-disfunctie en de relatie ervan met het metabolisme bij PCOS-vrouwen met een normaal gewicht via androgeen. antagonisme door klinisch gebruik van flutamide vs. placebo.

Gewijzigde FSIGTT- en adipogene onderzoeken: De gewijzigde FSIGTT en alle adipogene onderzoeken die bij aanvang van de studie zijn uitgevoerd, zullen worden herhaald aan het einde van de 6 maanden durende flutamide vs. placebo-interventie bij vrouwen met PCOS.

Procedures: Alle procedures die bij de start van de studie worden uitgevoerd, zullen ook worden herhaald aan het einde van de zes 28-daagse cycli van flutamide vs. placebo-interventie bij PCOS-vrouwen. Bovendien zullen er maandelijks leverfunctieonderzoeken worden uitgevoerd om mogelijke verhogingen van de serumtransaminasespiegels boven het normale bereik te detecteren tijdens behandeling met flutamide vs. placebo.

Menstruatiegegevens: Ovulatoire frequentie zal worden bepaald door proefpersonen een dagelijkse menstruatieregistratie bij te laten houden en wekelijkse ochtendurinemonsters te verzamelen voor mogelijke progesteron- en creatininebepalingen. Urinemonsters worden ingevroren voor latere analyse om indien nodig bewijs van ovulatie te bepalen.

Doel 3. Identificeer epigenetische veranderingen die ten grondslag liggen aan SC abdominale ASC-disfunctie bij PCOS-vrouwen met een normaal gewicht versus BMI- en leeftijd-gematchte controles.

Onderhuidse abdominale vetstamcellen van PCOS en controlevrouwen worden in het laboratorium opgekweekt tot nieuw gevormde vetcellen (adipocyten). Cellen zullen voor en na een behandeling van 6 maanden met placebo versus flutamide worden bestudeerd op veranderingen in het epigenoom van de cel (methylering, RNA-sequenties en histon-modificatie).