Androgenöverskott som orsak till adipogen dysfunktion hos PCOS-kvinnor

Syfte 1. Undersöka mekanismer för utveckling av subkutan abdominal fett (fett) hos normalviktiga PCOS-kvinnor kontra BMI- och åldersmatchade normala (kontroll) kvinnor.

Ämnen och klinisk bedömning: Vi kommer att rekrytera 16 magra (18,5-25 kg/M2) PCOS-personer och 16 ålders- och BMI-matchade kontroller. Försökspersoner kommer att fylla i ett standardiserat frågeformulär som betonar menstruationsdejting, onormal hårväxt och akne. Frågeformuläret kommer också att kommentera ålder, rökstatus, mediciner, kirurgisk historia och familjehistoria av överdriven hårväxt hos kvinnliga släktingar och diabetes hos föräldrar eller syskon för uteslutningskriterier och för inkludering av vissa grundläggande egenskaper som kovariater. Ämnen kommer också att genomgå en fysisk undersökning; hirsutism kommer att bedömas med den modifierade Ferriman-Gallwey (mFG) metoden. Transvaginal sonografi (TVUS) kommer att utföras för att fastställa närvaron eller frånvaron av polycystiska äggstockar. Ett screeningblodprov kommer att tas för bestämning av steroidhormoner, SHBG, TSH och prolaktin.

Kvinnor oavsett etnicitet mellan 18 och 35 år kommer att rekryteras. PCOS-patienter kommer att diagnostiseras enligt 1990 NIH-kriterier. Kontrollerna kommer att ha regelbundna menstruationscykler med 21 till 35 dagars intervall, en progesteronnivå i lutealfas (P4) > 3 ng/ml och inga tecken på hirsutism, akne, alopeci, polycystiska äggstockar eller endokrin dysfunktion. Uteslutningskriterier är: nuvarande/tidigare historia (

Studier kommer att genomföras i follikulär fas hos kontroller och under amenorré hos PCOS-kvinnor. Alla försökspersoner kommer att genomgå ett modifierat intravenöst glukostoleranstest (FSIGTT) med ofta provtagning. Glukos i form av en 50% lösning (0,3 g/kg) och vanligt humaninsulin (0,03 enheter/kg) kommer att injiceras genom en intravenös linje vid 0 respektive 20 minuter. Blod kommer att samlas in vid -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 och 180 minuter för glukos- och insulinbestämningar. Matematisk modellering av seriella glukos- och insulinbestämningar kommer att beräkna: insulinkänslighetsindex (SI, dvs insulinets verkan för att påskynda glukosupptag och undertrycka glukosproduktion), glukoseffektivitetsindex (SG, d.v.s. den kombinerade effekten av glukos för att öka glukosupptaget och undertrycka glukos). endogen glukosproduktion vid basala insulinnivåer) och det akuta svaret på glukos (AIRG).

Adipocyter isolering och odling: Cirka 1-2 g fett kommer att erhållas från nedre SC buken med standardprocedurer under lokalbedövning. Adipocyter (fettceller) och omgivande fettvävnad kommer att isoleras för att mäta fettcellers antal och diameter, lipidackumulering och funktion, adiponektin och stamcellsutveckling.

Procedurer: Alla procedurer kommer att utföras på normala kvinnor och PCOS-kvinnor i början av studien.

i). Venpunktion: Fastande blod kommer att samlas in för blodräkning, kemipanel, LH, FSH, totalt/fritt T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-mullerian hormon (AMH), SHBG, adiponectin, leptin, IL-6 , lipidprofil och fria fettsyror (FFA).

ii). Kroppssammansättning: Kroppssammansättning kommer att bedömas med BMI, midje-till-höft-omkrets och DEXA-skanning. Omkretsar kommer att mätas vid midjan (den smalaste delen av bålen mellan revbenen och naveln) och höfterna (höftregionens största utsprång, ovanför sätesvecket). För totalt kroppsfett och regional fettfördelning kommer helkroppsskanningar att utföras med hjälp av DEXA-avbildning.

iii). Kroppsfettfördelning: Totalkroppens DEXA mäter bukfett (dvs området mellan diafragmans kupol och höftens övre del. Hela kroppens DEXA-bilder kommer också att bestämma % kroppsfett; fettfri kroppsmassa; fett i hela kroppen, magen och benen; och buk/ben fettmassa förhållande. Benregionen är det området under toppen av höftbenet (större trochanter).

iv). Ovariantester: Transvaginalt ultraljud kommer att utföras i follikulär fas hos kontroller och under amenorré hos PCOS-kvinnor. Ovarialvolym kommer att beräknas. Antalet antralfollikel, definierat som det totala follikeltalet (2-9 mm i diameter) för båda äggstockarna, kommer att bestämmas av en utredare (D.A.D.). Polycystiska äggstockar kommer att identifieras, med en sådan äggstock tillräcklig för att definiera PCO

Syfte 2. Bestäm rollen av androgen i SC abdominal ASC-dysfunktion och dess relation till metabolism hos normalviktiga PCOS-kvinnor genom androgen. antagonism genom klinisk användning av flutamid kontra placebo.

Modifierade FSIGTT och adipogena studier: Den modifierade FSIGTT och alla adipogena studier som utfördes vid studiestart kommer att upprepas i slutet av 6-månaders flutamid kontra placebo-intervention på PCOS-kvinnor.

Procedurer: Alla procedurer som utförs vid studiestart kommer också att upprepas i slutet av de sex 28-dagarscyklerna av flutamid kontra placebointervention hos PCOS-kvinnor. Dessutom kommer månatliga leverfunktionsstudier att utföras för att upptäcka möjliga förhöjningar av serumtransaminasnivåer över det normala intervallet under flutamid kontra placebobehandling.

Menstruationsjournaler: Ägglossningsfrekvensen kommer att bestämmas genom att låta försökspersonerna föra en daglig menstruationsjournal och samla in urinprover från första morgonen varje vecka för möjliga progesteron- och kreatininbestämningar. Urinprover kommer att frysas för senare analys för att fastställa tecken på ägglossning, vid behov.

Syfte 3. Identifiera epigenetiska förändringar som ligger bakom SC abdominal ASC-dysfunktion hos normalviktiga PCOS-kvinnor jämfört med BMI- och åldersmatchade kontroller.

Subkutana abdominala fettstamceller från PCOS och kontrollkvinnor kommer att odlas till nybildade fettceller (adipocyter) i laboratoriet. Celler kommer att studeras före och efter 6 månaders behandling med placebo vs flutamid för förändringar i cellepigenomet (metylering, RNA-sekvenser och histonmodifiering).