Androgenoverskud som årsag til adipogen dysfunktion hos PCOS-kvinder

Formål 1. Undersøg mekanismer for subkutan abdominal fedtudvikling (fedt) hos normalvægtige PCOS-kvinder vs. BMI- og aldersmatchede normale (kontrol) kvinder.

Emner og klinisk vurdering: Vi vil rekruttere 16 magre (18,5-25 kg/M2) PCOS-personer og 16 alders- og BMI-matchede kontroller. Forsøgspersoner vil udfylde et standardiseret spørgeskema, der lægger vægt på menstruationsdating, unormal hårvækst og acne. Spørgeskemaet vil også anføre alder, rygestatus, medicin, kirurgisk historie og familiehistorier om overskydende hårvækst hos kvindelige slægtninge og diabetes hos forældre eller søskende for eksklusionskriterier og for inklusion af nogle grundlæggende træk som kovariater. Emner vil også gennemgå en fysisk undersøgelse; hirsutisme vil blive bedømt ved den modificerede Ferriman-Gallwey (mFG) metode. Transvaginal sonografi (TVUS) vil blive udført for at bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af polycystiske ovarier. Der vil blive taget en screeningsblodprøve for bestemmelse af steroidhormoner, SHBG, TSH og prolaktin.

Kvinder af enhver etnicitet mellem 18 og 35 år vil blive rekrutteret. PCOS-patienter vil blive diagnosticeret efter 1990 NIH-kriterier. Kontrollerne vil have regelmæssige menstruationscyklusser med 21 til 35 dages intervaller, et progesteronniveau i lutealfasen (P4) > 3 ng/ml og ingen tegn på hirsutisme, acne, alopeci, polycystiske ovarier eller endokrin dysfunktion. Eksklusionskriterier er: nuværende/tidligere historie (

Undersøgelser vil blive udført i follikulær fase hos kontroller og under amenoré hos PCOS-kvinder. Alle forsøgspersoner vil gennemgå en modificeret, hyppigt udtaget intravenøs glukosetolerancetest (FSIGTT). Glukose i form af en 50% opløsning (0,3 g/kg) og almindelig human insulin (0,03 enheder/kg) vil blive injiceret gennem en intravenøs slange efter henholdsvis 0 og 20 min. Blod vil blive opsamlet ved -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 og 180 minutter til glukose- og insulinbestemmelser. Matematisk modellering af serielle glukose- og insulinbestemmelser vil beregne: insulinfølsomhedsindeks (SI, dvs. insulins virkning for at accelerere glukoseoptagelse og undertrykke glukoseproduktion), glukoseeffektivitetsindeks (SG, dvs. den kombinerede effekt af glukose til at øge glukoseoptagelsen og undertrykke glukose) endogen glucoseproduktion ved basale insulinniveauer) og den akutte reaktion på glucose (AIRG).

Adipocytter isolering og dyrkning: Ca. 1-2 g fedt vil blive opnået fra den nedre SC abdomen ved at bruge standard procedurer under lokalbedøvelse. Adipocytter (fedtceller) og omgivende fedtvæv vil blive isoleret for at måle adipocytcelleantal og -diameter, lipidakkumulering og funktion, adiponectin og stamcelleudvikling.

Procedurer: Alle procedurer vil blive udført hos normale kvinder og PCOS-kvinder ved studiestart.

jeg). Venepunktur: Fastende blod vil blive indsamlet til blodtælling, kemipanel, LH, FSH, total/fri T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-mullerian hormon (AMH), SHBG, adiponectin, leptin, IL-6 , lipidprofil og frie fedtsyrer (FFA).

ii). Kropssammensætning: Kropssammensætning vil blive vurderet ved BMI, talje-til-hofte-omkreds og DEXA-scanning. Gjorde vil blive målt ved taljen (den smalleste del af torsoen mellem ribben og navle) og hofter (største fremspring af hofteregionen, over glutealfolden). For total kropsfedt og regional fedtfordeling vil der blive udført helkropsscanninger ved hjælp af DEXA-billeddannelse.

iii). Kropsfedtfordeling: Den samlede krops DEXA vil måle abdominalt fedt (dvs. området mellem membranens kuppel og toppen af ​​hoften. Total krops DEXA-billeder vil også bestemme % kropsfedt; fedtfri kropsmasse; total krops-, abdominal- og benfedt; og mave/ben fedtmasseforhold. Benregionen er det område under toppen af ​​hoftebenet (større trochanter).

iv). Ovarietest: Transvaginal ultralyd vil blive udført i follikulær fase hos kontroller og under amenoré hos PCOS-kvinder. Ovarievolumen vil blive beregnet. Antral follikelnummer, defineret som det totale follikeltal (2-9 mm i diameter) af begge æggestokke, vil blive bestemt af 1 investigator (D.A.D.). Polycystiske ovarier vil blive identificeret, med en sådan ovarie tilstrækkelig til at definere PCO

Mål 2. Bestem androgens rolle i SC abdominal ASC dysfunktion og dets relation til metabolisme hos normalvægtige PCOS-kvinder gennem androgen. antagonisme ved klinisk brug af flutamid vs. placebo.

Modificerede FSIGTT og adipogene undersøgelser: De modificerede FSIGTT og alle adipogene undersøgelser udført ved studiestart vil blive gentaget i slutningen af ​​den 6-måneders flutamid vs. placebo intervention hos PCOS kvinder.

Procedurer: Alle procedurer, der udføres ved studiestart, vil også blive gentaget i slutningen af ​​de seks 28-dages cyklusser af flutamid vs. placebo-intervention hos PCOS-kvinder. Derudover vil der blive udført månedlige leverfunktionsundersøgelser for at påvise mulige forhøjelser af serumtransaminaseniveauer over normalområdet under flutamid versus placebobehandling.

Menstruationsjournaler: Ægløsningshyppigheden vil blive bestemt ved at lade forsøgspersonerne føre en daglig menstruationsjournal og indsamle ugentlige første morgenurinprøver for mulige progesteron- og kreatininbestemmelser. Urinprøver vil blive frosset til senere analyse for at bestemme tegn på ægløsning efter behov.

Mål 3. Identificere epigenetiske ændringer, der ligger til grund for SC abdominal ASC-dysfunktion hos normalvægtige PCOS-kvinder vs. BMI- og aldersmatchede kontroller.

Subkutane abdominale fedtstamceller fra PCOS og kontrolkvinder vil blive dyrket til nydannede fedtceller (adipocytter) i laboratoriet. Celler vil blive undersøgt før og efter 6 måneders behandling med placebo vs flutamid for ændringer i celleepigenomet (methylering, RNA-sekvenser og histonmodifikation).