El exceso de andrógenos como causa de disfunción adipogénica en mujeres con SOP

Objetivo 1. Examinar los mecanismos del desarrollo del tejido adiposo (grasa) abdominal subcutáneo en mujeres con SOP de peso normal frente a mujeres normales (control) del mismo índice de masa corporal y edad.

Sujetos y evaluación clínica: reclutaremos 16 sujetos delgados (18,5-25 kg/m2) con SOP y 16 controles de la misma edad e IMC. Los sujetos completarán un cuestionario estandarizado que enfatiza la datación menstrual, el crecimiento anormal del cabello y el acné. El cuestionario también anotará la edad, el tabaquismo, los medicamentos, los antecedentes quirúrgicos y los antecedentes familiares de crecimiento excesivo de vello en parientes femeninos y de diabetes en padres o hermanos para los criterios de exclusión y para la inclusión de algunos rasgos básicos como covariables. Los sujetos también se someterán a un examen físico; el hirsutismo se calificará mediante el método modificado de Ferriman-Gallwey (mFG). Se realizará una ecografía transvaginal (TVUS) para determinar la presencia o ausencia de ovarios poliquísticos. Se obtendrá una muestra de sangre de detección para determinaciones de hormonas esteroides, SHBG, TSH y prolactina.

Se reclutarán mujeres de cualquier etnia entre 18 y 35 años de edad. Los pacientes con SOP serán diagnosticados según los criterios del NIH de 1990. Los controles tendrán ciclos menstruales regulares en intervalos de 21 a 35 días, un nivel de progesterona (P4) de fase lútea > 3 ng/mL y no habrá evidencia de hirsutismo, acné, alopecia, ovarios poliquísticos o disfunción endocrina. Los criterios de exclusión son: historia presente/pasada (

Los estudios se realizarán en la fase folicular en los controles y durante la amenorrea en mujeres con SOP. Todos los sujetos se someterán a una prueba modificada de tolerancia a la glucosa intravenosa con muestreo frecuente (FSIGTT). Se inyectará glucosa en forma de solución al 50% (0,3 g/kg) e insulina humana regular (0,03 unidades/kg) por vía intravenosa a los 0 y 20 min, respectivamente. Se recolectará sangre a -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 y 180 min para determinaciones de glucosa e insulina. El modelado matemático de las determinaciones seriadas de glucosa e insulina calculará: índice de sensibilidad a la insulina (SI, es decir, la acción de la insulina para acelerar la captación de glucosa y suprimir la producción de glucosa), índice de eficacia de la glucosa (SG, es decir, el efecto combinado de la glucosa para mejorar la captación de glucosa y suprimir la producción de glucosa). producción endógena de glucosa a niveles basales de insulina) y la respuesta aguda a la glucosa (AIRG).

Aislamiento y cultivo de adipocitos: Se obtendrán aproximadamente 1-2 g de grasa de la parte inferior del abdomen SC utilizando procedimientos estándar bajo anestesia local. Los adipocitos (células grasas) y el tejido adiposo circundante se aislarán para medir el número y el diámetro de las células adipocitarias, la acumulación y función de los lípidos, la adiponectina y el desarrollo de células madre.

Procedimientos: Todos los procedimientos se realizarán en mujeres normales y con SOP al comienzo del estudio.

i). Venopunción: se recolectará sangre en ayunas para hemograma, panel de química, LH, FSH, T total/libre, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, hormona antimülleriana (AMH), SHBG, adiponectina, leptina, IL-6 , perfil lipídico y ácidos grasos libres (FFA).

ii). Composición corporal: la composición corporal se evaluará mediante el IMC, la circunferencia de la cintura a la cadera y la exploración DEXA. Las circunferencias se medirán en la cintura (la sección más estrecha del torso entre las costillas y el ombligo) y las caderas (la mayor protuberancia de la región de la cadera, por encima del pliegue de los glúteos). Para la grasa corporal total y la distribución regional de la grasa, se realizarán exploraciones de todo el cuerpo utilizando imágenes DEXA.

iii). Distribución de la grasa corporal: el DEXA corporal total medirá la grasa abdominal (es decir, el área entre la cúpula del diafragma y la parte superior de la cadera). Las imágenes DEXA de todo el cuerpo también determinarán el % de grasa corporal; masa corporal libre de grasa; grasa corporal total, abdominal y de las piernas; y relación masa grasa abdomen/piernas. La región de la pierna es el área debajo de la parte superior del hueso de la cadera (trocánter mayor).

iv). Pruebas ováricas: se realizará una ecografía transvaginal en la fase folicular en los controles y durante la amenorrea en las mujeres con SOP. Se calculará el volumen ovárico. El número de folículos antrales, definido como el número total de folículos (2-9 mm de diámetro) de ambos ovarios, lo determinará 1 investigador (D.A.D.). Se identificarán los ovarios poliquísticos, con uno de esos ovarios suficiente para definir PCO

Objetivo 2. Determinar el papel de los andrógenos en la disfunción del ASC abdominal SC y su relación con el metabolismo en mujeres con SOP de peso normal a través de andrógenos. antagonismo por el uso clínico de flutamida frente a placebo.

Estudios adipogénicos y FSIGTT modificados: El FSIGTT modificado y todos los estudios adipogénicos realizados al inicio del estudio se repetirán al final de la intervención de 6 meses con flutamida versus placebo en mujeres con SOP.

Procedimientos: Todos los procedimientos realizados al inicio del estudio también se repetirán al final de los seis ciclos de 28 días de intervención con flutamida versus placebo en mujeres con SOP. Además, se realizarán estudios mensuales de la función hepática para detectar posibles elevaciones de los niveles de transaminasas séricas por encima del rango normal durante la terapia con flutamida frente a placebo.

Registros menstruales: la frecuencia de la ovulación se determinará haciendo que los sujetos mantengan un registro menstrual diario y recolectando muestras de orina semanales de la primera mañana para posibles determinaciones de progesterona y creatinina. Las muestras de orina se congelarán para un análisis posterior para determinar la evidencia de ovulación, según sea necesario.

Objetivo 3. Identificar los cambios epigenéticos que subyacen a la disfunción del ASC abdominal SC en mujeres con SOPQ de peso normal frente a controles emparejados por IMC y edad.

Las células madre adiposas abdominales subcutáneas de SOP y de mujeres de control se convertirán en células grasas recién formadas (adipocitos) en el laboratorio. Las células se estudiarán antes y después de 6 meses de tratamiento con placebo frente a flutamida para detectar cambios en el epigenoma celular (metilación, secuencias de ARN y modificación de histonas).