Androgenüberschuss als Ursache für adipogene Dysfunktion bei PCOS-Frauen

Ziel 1. Untersuchen der Mechanismen der Entwicklung von subkutanem abdominalem Fett (Fett) bei normalgewichtigen PCOS-Frauen im Vergleich zu BMI- und altersangepassten normalen (Kontroll-)Frauen.

Probanden und klinische Bewertung: Wir werden 16 schlanke (18,5–25 kg/m2) PCOS-Probanden und 16 alters- und BMI-angepasste Kontrollen rekrutieren. Die Probanden füllen einen standardisierten Fragebogen aus, in dem die Menstruationsdatierung, abnormales Haarwachstum und Akne hervorgehoben werden. Der Fragebogen wird auch Alter, Raucherstatus, Medikamente, chirurgische Vorgeschichte und Familiengeschichten von übermäßigem Haarwuchs bei weiblichen Verwandten und von Diabetes bei Eltern oder Geschwistern für Ausschlusskriterien und für die Einbeziehung einiger grundlegender Merkmale als Kovariaten anmerken. Die Probanden werden auch einer körperlichen Untersuchung unterzogen; Hirsutismus wird nach der modifizierten Ferriman-Gallwey (mFG)-Methode bewertet. Eine transvaginale Sonographie (TVUS) wird durchgeführt, um das Vorhandensein oder Fehlen von polyzystischen Ovarien zu bestimmen. Zur Bestimmung von Steroidhormonen, SHBG, TSH und Prolaktin wird eine Screening-Blutprobe entnommen.

Rekrutiert werden Frauen jeder ethnischen Zugehörigkeit im Alter zwischen 18 und 35 Jahren. PCOS-Patienten werden anhand der NIH-Kriterien von 1990 diagnostiziert. Die Kontrollen haben regelmäßige Menstruationszyklen in Abständen von 21 bis 35 Tagen, einen Progesteronspiegel (P4) in der Lutealphase von > 3 ng/ml und keine Anzeichen von Hirsutismus, Akne, Alopezie, polyzystischen Ovarien oder endokriner Dysfunktion. Ausschlusskriterien sind: gegenwärtige/vergangene Geschichte (

Die Studien werden in der Follikelphase bei Kontrollpersonen und während der Amenorrhoe bei PCOS-Frauen durchgeführt. Alle Probanden werden einem modifizierten, häufig entnommenen intravenösen Glukosetoleranztest (FSIGTT) unterzogen. Glukose in Form einer 50%igen Lösung (0,3 g/kg) und normales Humaninsulin (0,03 Einheiten/kg) werden durch eine intravenöse Leitung bei 0 bzw. 20 min injiziert. Blut wird bei -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 und 180 min für Glukose- und Insulinbestimmungen entnommen. Die mathematische Modellierung von seriellen Glukose- und Insulinbestimmungen berechnet: Insulinsensitivitätsindex (SI, d. h. die Wirkung von Insulin zur Beschleunigung der Glukoseaufnahme und Unterdrückung der Glukoseproduktion), Glukoseeffektivitätsindex (SG, d. h. die kombinierte Wirkung von Glukose zur Verstärkung der Glukoseaufnahme und Unterdrückung endogene Glukoseproduktion bei Basalinsulinspiegeln) und der akuten Reaktion auf Glukose (AIRG).

Isolierung und Kultur von Adipozyten: Ungefähr 1–2 g Fett werden aus dem unteren SC-Abdomen unter Verwendung von Standardverfahren unter örtlicher Betäubung gewonnen. Adipozyten (Fettzellen) und umgebendes Fettgewebe werden isoliert, um Anzahl und Durchmesser von Adipozytenzellen, Lipidakkumulation und -funktion, Adiponektin und Stammzellentwicklung zu messen.

Verfahren: Alle Verfahren werden zu Beginn der Studie bei gesunden und PCOS-Frauen durchgeführt.

ich). Venenpunktion: Nüchternblut wird für Blutbild, Chemie-Panel, LH, FSH, Gesamt-/freies T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, Anti-Müller-Hormon (AMH), SHBG, Adiponektin, Leptin, IL-6 entnommen , Lipidprofil und freie Fettsäuren (FFAs).

ii). Körperzusammensetzung: Die Körperzusammensetzung wird anhand des BMI, des Taillen-Hüft-Umfangs und des DEXA-Scans beurteilt. Der Umfang wird an der Taille (schmalster Abschnitt des Rumpfes zwischen Rippen und Nabel) und an den Hüften (größter Vorsprung der Hüftregion, oberhalb der Gesäßfalte) gemessen. Für das Gesamtkörperfett und die regionale Fettverteilung werden Ganzkörperscans unter Verwendung von DEXA-Bildgebung durchgeführt.

iii). Körperfettverteilung: Ganzkörper-DEXA misst das Bauchfett (d. h. den Bereich zwischen der Kuppel des Zwerchfells und der Hüfte). Ganzkörper-DEXA-Bilder bestimmen auch den Prozentsatz des Körperfetts; fettfreie Körpermasse; Gesamtkörper-, Bauch- und Beinfett; und Bauch/Bein-Fettmassenverhältnis. Die Beinregion ist der Bereich unterhalb des Hüftknochens (Trochanter major).

iv). Eierstocktests: Transvaginaler Ultraschall wird in der Follikelphase bei Kontrollen und während der Amenorrhoe bei PCOS-Frauen durchgeführt. Das Ovarialvolumen wird berechnet. Die Antralfollikelzahl, definiert als die Gesamtfollikelzahl (2-9 mm im Durchmesser) beider Eierstöcke, wird von 1 Prüfarzt (D.A.D.) bestimmt. Polyzystische Eierstöcke werden identifiziert, wobei ein solcher Eierstock ausreicht, um PCO zu definieren

Ziel 2. Bestimmung der Rolle von Androgen bei SC-abdominaler ASC-Dysfunktion und ihrer Beziehung zum Metabolismus bei normalgewichtigen PCOS-Frauen durch Androgen. Antagonismus durch klinische Anwendung von Flutamid vs. Placebo.

Modifizierter FSIGTT und adipogene Studien: Der modifizierte FSIGTT und alle zu Beginn der Studie durchgeführten adipogenen Studien werden am Ende der 6-monatigen Flutamid vs. Placebo-Intervention bei PCOS-Frauen wiederholt.

Verfahren: Alle zu Beginn der Studie durchgeführten Verfahren werden auch am Ende der sechs 28-tägigen Zyklen der Flutamid- vs. Placebo-Intervention bei PCOS-Frauen wiederholt. Darüber hinaus werden monatliche Leberfunktionsstudien durchgeführt, um mögliche Erhöhungen der Serumtransaminasewerte über den Normalbereich während der Flutamid- vs. Placebo-Therapie zu erkennen.

Menstruationsaufzeichnungen: Die Ovulationsfrequenz wird bestimmt, indem die Probanden eine tägliche Menstruationsaufzeichnung führen und wöchentlich erste Morgenurinproben für mögliche Progesteron- und Kreatininbestimmungen sammeln. Urinproben werden für eine spätere Analyse eingefroren, um bei Bedarf den Eisprung festzustellen.

Ziel 3. Epigenetische Veränderungen zu identifizieren, die der abdominalen SC-ASC-Dysfunktion bei normalgewichtigen PCOS-Frauen im Vergleich zu BMI- und altersangepassten Kontrollen zugrunde liegen.

Subkutane abdominale Fettstammzellen von PCOS und Kontrollfrauen werden im Labor zu neu gebildeten Fettzellen (Adipozyten) gezüchtet. Die Zellen werden vor und nach einer 6-monatigen Behandlung mit Placebo vs. Flutamid auf Veränderungen im Zell-Epigenom (Methylierung, RNA-Sequenzen und Histonmodifikation) untersucht.