Nadbytek androgenů jako příčina adipogenní dysfunkce u žen s PCOS

Cíl 1. Prozkoumat mechanismy rozvoje subkutánního abdominálního tukového (tuku) u žen s normální hmotností PCOS vs. BMI a normálních (kontrolních) žen odpovídajícího věku.

Subjekty a klinické hodnocení: Přijmeme 16 hubených (18,5-25 kg/M2) subjektů PCOS a 16 kontrol odpovídajících věku a BMI. Subjekty vyplní standardizovaný dotazník zdůrazňující randění s menstruací, abnormální růst vlasů a akné. Dotazník bude také anotovat věk, kouření, léky, chirurgickou anamnézu a rodinnou anamnézu nadměrného růstu vlasů u příbuzných žen a diabetu u rodičů nebo sourozenců pro vylučovací kritéria a pro zahrnutí některých základních rysů jako kovariát. Subjekty také podstoupí fyzické vyšetření; hirsutismus bude hodnocen modifikovanou Ferriman-Gallweyovou (mFG) metodou. K určení přítomnosti nebo nepřítomnosti polycystických vaječníků bude provedena transvaginální sonografie (TVUS). Bude odebrán screeningový vzorek krve pro stanovení steroidních hormonů, SHBG, TSH a prolaktinu.

Budou přijaty ženy jakéhokoli etnika ve věku od 18 do 35 let. Pacienti s PCOS budou diagnostikováni podle kritérií NIH z roku 1990. Kontroly budou mít pravidelné menstruační cykly v intervalech 21 až 35 dnů, hladinu progesteronu v luteální fázi (P4) > 3 ng/ml a nebudou mít žádné známky hirsutismu, akné, alopecie, polycystických vaječníků nebo endokrinní dysfunkce. Kritéria vyloučení jsou: současná/minulá historie (

Studie budou prováděny ve folikulární fázi u kontrol a během amenorey u žen s PCOS. Všechny subjekty podstoupí modifikovaný často odebraný intravenózní glukózový toleranční test (FSIGTT). Glukóza ve formě 50% roztoku (0,3 g/kg) a běžný lidský inzulín (0,03 jednotek/kg) budou injikovány intravenózní linkou v 0 a 20 minutách. Krev bude odebírána v -20, -15, -5, 0, 2, 4, 8, 19, 22, 30, 40, 50, 70, 90 a 180 minutách pro stanovení glukózy a inzulínu. Matematické modelování sériového stanovení glukózy a inzulínu vypočítá: index citlivosti na inzulín (SI, tj. působení inzulínu na urychlení vychytávání glukózy a potlačení produkce glukózy), index účinnosti glukózy (SG, tj. kombinovaný účinek glukózy na zvýšení vychytávání glukózy a její potlačení). endogenní produkce glukózy při bazálních hladinách inzulínu) a akutní reakce na glukózu (AIRG).

Izolace a kultivace adipocytů: Přibližně 1-2 g tuku bude získáno z podbřišku SC standardními postupy v lokální anestezii. Adipocyty (tukové buňky) a okolní tuková tkáň budou izolovány za účelem měření počtu a průměru buněk adipocytů, akumulace a funkce lipidů, adiponektinu a vývoje kmenových buněk.

Postupy: Všechny postupy budou provedeny u normálních žen a žen s PCOS na začátku studie.

i). Venipunkce: Bude odebrána krev nalačno pro krevní obraz, chemický panel, LH, FSH, celkový/volný T, DHT, A4, DHEAS, E1, E2, anti-mullerian hormon (AMH), SHBG, adiponektin, leptin, IL-6 lipidový profil a volné mastné kyseliny (FFA).

ii). Složení těla: Složení těla bude posouzeno pomocí BMI, obvodu pasu a boků a skenováním DEXA. Obvody budou měřeny v pase (nejužší část trupu mezi žebry a pupkem) a v bocích (největší výčnělek kyčle nad hýžďovým záhybem). Pro celkovou distribuci tělesného tuku a regionální distribuci tuku budou provedeny skeny celého těla s využitím zobrazení DEXA.

iii). Distribuce tělesného tuku: Total body DEXA bude měřit břišní tuk (tj. oblast mezi kupolí bránice a horní částí kyčle. Celkové tělesné snímky DEXA také určí % tělesného tuku; tělesná hmota bez tuku; celkový tělesný tuk, břišní tuk a tuk na nohou; a poměr hmotnosti tuku na břiše/nohách. Oblast nohou je oblast pod vrcholem kyčelní kosti (větší trochanter).

iv). Testování vaječníků: Transvaginální ultrazvuk bude proveden ve folikulární fázi u kontrol a během amenorey u žen s PCOS. Bude vypočítán objem vaječníků. Počet antrálních folikulů, definovaný jako celkový počet folikulů (2-9 mm v průměru) obou vaječníků, bude stanoven 1 zkoušejícím (D.A.D.). Budou identifikovány polycystické vaječníky, přičemž jeden takový vaječník stačí k definování PCO

Cíl 2. Určit roli androgenu u SC abdominální dysfunkce ASC a jeho vztah k metabolismu u žen s PCOS s normální hmotností prostřednictvím androgenu. antagonismu klinickým použitím flutamidu vs. placeba.

Modifikované FSIGTT a adipogenní studie: Modifikované FSIGTT a všechny adipogenní studie provedené při zahájení studie budou opakovány na konci 6měsíční intervence flutamidu vs. placebo u žen s PCOS.

Postupy: Všechny postupy provedené při zahájení studie budou také opakovány na konci šesti 28denních cyklů intervence flutamidu vs. placebo u žen s PCOS. Kromě toho budou prováděny měsíční studie jaterních funkcí k detekci možného zvýšení hladin sérových transamináz nad normální rozmezí během léčby flutamidem vs.

Menstruační záznamy: Frekvence ovulace bude stanovena tak, že si subjekty vedou denní menstruační záznam a sbírají každý týden první ranní vzorky moči pro možná stanovení progesteronu a kreatininu. Vzorky moči budou zmraženy pro pozdější analýzu, aby se v případě potřeby určily známky ovulace.

Cíl 3. Identifikovat epigenetické změny, které jsou základem SC abdominální dysfunkce ASC u žen s normální hmotností PCOS vs. BMI a věkově odpovídající kontroly.

Subkutánní abdominální tukové kmenové buňky z PCOS a kontrolních žen budou v laboratoři pěstovány do nově vytvořených tukových buněk (adipocytů). Buňky budou studovány před a po 6měsíční léčbě placebem vs flutamidem na změny v buněčném epigenomu (methylace, sekvence RNA a modifikace histonů).