Morphologie des spermatozoïdes par fort grossissement chez les hommes fertiles (FERTIFORT)

La population étudiée était constituée de 50 hommes âgés de 18 à 45 ans ayant une fertilité spontanée avérée. Tous les sujets ont donné leur consentement éclairé pour participer à l'étude. Après interrogatoire sur les antécédents médicaux et andrologiques complets, des échantillons de sperme ont été prélevés par masturbation après 2 à 5 jours d'abstinence sexuelle et ont été traités pour analyse après liquéfaction pendant 20 min à 37°C. Nous avons effectué une analyse du nombre de spermatozoïdes, de la motilité, de la vitalité et de la morphologie conventionnelle ainsi qu'une analyse morphométrique détaillée des vacuoles à fort grossissement à l'aide d'un logiciel d'analyse d'images. Pour l'analyse à fort grossissement, cinquante microlitres de sperme frais ont été lavés dans 2,5 ml de solution de lavage par centrifugation pendant 5 minutes à 400g. Le culot a été remis en suspension dans 100 µl de solution de lavage et les spermatozoïdes ont été fixés par addition de 100 µl de tampon phosphate salin-formaldéhyde 3,7 %. Deux microlitres de cette suspension ont été placés dans une capsule à fond de verre et examinés par microscopie à contraste interférentiel Nomarski avec une caméra montée sur un microscope avec un objectif à immersion x100. Pour chaque échantillon, les vacuoles de la tête de sperme ont été analysées sur 100 spermatozoïdes qui ont été photographiés au hasard et analysés séparément à l'aide d'un logiciel de système d'imagerie numérique. Les mesures à l'aide du logiciel ont été réalisées par un seul opérateur. Le module de mesure interactive permet de mesurer les zones de la tête des spermatozoïdes et les zones des vacuoles en décrivant manuellement leur contour. La surface et la position de chaque vacuole ont été enregistrées.