Морфология сперматозоидов при большом увеличении у мужчин с фертильностью (FERTIFORT)
4 июля 2013 г. обновлено: University Hospital, Toulouse
Оценка морфологии сперматозоидов при большом увеличении (x6000) с интерференционно-контрастной микроскопией у фертильных мужчин.
Разработана новая концепция наблюдения тонкой морфологии сперматозоидов при большом увеличении (6000х) с помощью инвертированного микроскопа, цифровой камеры с использованием дифференциального интерференционного контраста (1).
Этот метод, называемый исследованием органелларной морфологии подвижных сперматозоидов, позволяет увидеть некоторые аномалии, в основном вакуоли на головках сперматозоидов.
Эти вакуоли, по-видимому, связаны с повреждением ДНК сперматозоидов и влияют на потенциал развития эмбриона (2, 3, 4).
Применение исследования органелларной морфологии подвижных сперматозоидов может улучшить оценку качества спермы с некоторыми потенциальными клиническими последствиями на диагностическом/прогностическом уровне.
В первую очередь исследователям нужны данные о фертильных мужчинах, чтобы определить «нормальность» морфологии сперматозоидов при большом увеличении.
Таким образом, цель данного исследования состоит в том, чтобы лучше охарактеризовать эти вакуоли (количество, поверхность, положение) в популяции фертильных мужчин, чтобы установить критерии нормальности.
Обзор исследования
Статус
Завершенный
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Исследуемую популяцию составили 50 мужчин в возрасте от 18 до 45 лет с доказанной спонтанной фертильностью.
Все испытуемые дали информированное согласие на участие в исследовании.
После опроса по полному медицинскому и андрологическому анамнезу образцы спермы собирали путем мастурбации после 2–5 дней полового воздержания и обрабатывали для анализа после разжижения в течение 20 мин при 37°C.
Мы провели подсчет сперматозоидов, подвижность, жизнеспособность и обычный морфологический анализ, а также подробный морфометрический анализ вакуолей при большом увеличении с использованием программного обеспечения для анализа изображений.
Для анализа при большом увеличении пятьдесят микролитров свежей спермы промывали в 2,5 мл промывочного раствора путем центрифугирования в течение 5 минут при 400 g.
Осадок ресуспендировали в 100 мкл промывочного раствора и сперматозоиды фиксировали добавлением 100 мкл фосфатного буфера, солевого раствора и формальдегида 3,7%.
Два микролитра этой суспензии помещали в чашку со стеклянным дном и исследовали методом интерференционно-контрастной микроскопии Номарского с помощью камеры, установленной на микроскопе с иммерсионным объективом x100.
Для каждого образца вакуоли головки спермия были проанализированы на 100 сперматозоидах, которые были случайно сфотографированы и отдельно проанализированы с использованием программного обеспечения системы цифровой обработки изображений.
Измерения с помощью программного обеспечения проводились одним оператором.
Модуль интерактивного измерения позволяет измерять площади головок сперматозоидов и площади вакуолей путем ручного изображения их контура.
Регистрировали площадь и положение каждой вакуоли.
Тип исследования
Интервенционный
Регистрация (Действительный)
54
Фаза
- Непригодный
Контакты и местонахождение
В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.
Места учебы
-
-
-
Toulouse, Франция, 31059
- Centre d'AMP Hôpital Paule de Viguier
-
-
Критерии участия
Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
От 18 лет до 45 лет (Взрослый)
Принимает здоровых добровольцев
Да
Полы, имеющие право на обучение
Мужской
Описание
КРИТЕРИИ ВКЛЮЧЕНИЯ:
- Возраст: от 18 до 45 лет
- Пол: мужской
- Мужчины с доказанной спонтанной фертильностью (беременность наступила менее чем за два года до включения)
- от 2 до 5 дней полового воздержания
- Все испытуемые дали информированное согласие на участие в исследовании
- Субъекты должны быть связаны с системой социального обеспечения.
КРИТЕРИЙ ИСКЛЮЧЕНИЯ:
- Личная история бесплодия
- Личная история химиотерапии
- Повторный выкидыш в анамнезе у пары
- Андрологический анамнез с последней беременности: урогенитальная инфекция, травма яичка, перекрут яичка, варикоцеле, операции на органах малого таза.
- Лихорадка в течение 3 месяцев до включения.
Учебный план
В этом разделе представлена подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Диагностика
- Распределение: Н/Д
- Интервенционная модель: Одногрупповое задание
- Маскировка: Нет (открытая этикетка)
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Другой: Фертильные мужчины
Оценка морфологии сперматозоидов при большом увеличении с интерференционно-контрастной микроскопией.
|
Вакуоли головки сперматозоида были проанализированы на 100 сперматозоидах, которые были случайно сфотографированы и отдельно проанализированы с использованием программного обеспечения системы цифровой обработки изображений.
Модуль интерактивного измерения позволяет измерять площади головок сперматозоидов и площади вакуолей путем ручного изображения их контура.
Регистрировали площадь и положение каждой вакуоли.
Относительная площадь вакуолей – это отношение площади всех вакуолей сперматозоида к площади его головки.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Среднее количество вакуолей и средняя площадь вакуолей
Временное ограничение: 1 день
|
Для каждого пациента в день сбора спермы были получены изображения 100 сперматозоидов.
|
1 день
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Составной критерий исхода: локализация вакуоли, объем спермы, количество сперматозоидов, подвижность, жизнеспособность, процент нормальных форм.
Временное ограничение: 1 день
|
Для каждого пациента вторичные показатели результатов были собраны в день включения.
|
1 день
|
Соавторы и исследователи
Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Roger LEANDRI, MD-PhD, University Hospital of Toulouse
Даты записи исследования
Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.
Изучение основных дат
Начало исследования
1 октября 2011 г.
Первичное завершение (Действительный)
1 октября 2012 г.
Завершение исследования (Действительный)
1 февраля 2013 г.
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
22 января 2013 г.
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
4 июля 2013 г.
Первый опубликованный (Оценивать)
10 июля 2013 г.
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
10 июля 2013 г.
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
4 июля 2013 г.
Последняя проверка
1 июля 2013 г.
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Другие идентификационные номера исследования
- 11 175 03
- HAO 2011 (Другой номер гранта/финансирования: ARTS)
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .