Sperma morfológia nagy nagyítással termékenységi férfiaknál (FERTIFORT)

A vizsgált populáció 50 18 és 45 év közötti, bizonyítottan spontán termékenységű férfiból állt. Minden alany beleegyezését adta a vizsgálatban való részvételhez. A teljes orvosi és andrológiai anamnézis kikérdezése után a spermamintákat önkielégítéssel vettük 2-5 napos szexuális absztinencia után, és 20 percig, 37 °C-on végzett cseppfolyósítás után feldolgoztuk elemzésre. Képelemző szoftverrel nagy nagyítás mellett spermiumszám-, motilitás-, vitalitás- és hagyományos morfológiai elemzést, valamint a vakuolák részletes morfometriai analízisét végeztük el. A nagy nagyítású analízishez 50 mikroliter friss spermát 2,5 ml mosóoldatban mostunk centrifugálással 5 percig 400 g-vel. A pelletet 100 µl mosóoldatban újraszuszpendáltuk, és a spermiumokat 100 µl foszfátpuffer hozzáadásával rögzítettük 3,7%-os sóoldat-formaldehiddel. Ebből a szuszpenzióból 2 mikrolitert üvegfenekű edénybe helyeztünk, és Nomarski-féle interferencia-kontraszt mikroszkóppal vizsgáltuk, 100x100-as immerziós objektíves mikroszkópra szerelt kamerával. Minden minta esetében a spermiumfej vakuólumait 100 spermiumon elemeztük, amelyeket véletlenszerűen lefényképeztünk, és külön elemeztünk digitális képalkotó rendszer szoftverrel. A szoftverrel végzett méréseket egyetlen kezelő végezte. Az interaktív mérési modul lehetővé teszi a spermiumfejek és a vakuólumok területeinek mérését a körvonaluk manuális ábrázolásával. Minden vakuólum területét és helyzetét feljegyeztük.