生殖能力のある男性における高倍率による精子の形態学 (FERTIFORT)

研究された集団は、自然生殖能力が証明されている18歳から45歳の男性50人で構成されていました。 すべての被験者は研究に参加することにインフォームドコンセントを与えました。 完全な病歴および男性学的病歴についての質問の後、2～5日間の性的禁欲後にマスターベーションによって精液サンプルが収集され、37℃で20分間液状化された後、分析のために処理されました。 精子数、運動性、活力、従来の形態解析に加え、画像解析ソフトを使用した高倍率での液胞の詳細な形態計測解析を実施しました。 高倍率での分析のために、50マイクロリットルの新鮮な精子を2.5mlの洗浄溶液中で400gで5分間の遠心分離により洗浄した。 ペレットを100μlの洗浄溶液に再懸濁し、100μlのリン酸緩衝食塩水-ホルムアルデヒド3.7%を加えて精子を固定した。 この懸濁液 2 マイクロリットルをガラス底の皿に置き、液浸対物レンズ x 100 を備えた顕微鏡に取り付けられたカメラを用いたノマルスキー干渉コントラスト顕微鏡法によって検査しました。 各サンプルについて、ランダムに写真を撮影し、デジタル画像システム ソフトウェアを使用して個別に分析した 100 個の精子の精子頭部空胞を分析しました。 ソフトウェアを使用した測定は 1 人のオペレーターによって実行されました。 インタラクティブ測定モジュールを使用すると、精子の頭部領域と液胞領域の輪郭を手動で描画することで測定できます。 各液胞の面積と位置を記録しました。