Métabolisme et effets sur la santé des limonoïdes d'agrumes chez les humains hypercholestérolémiques

Il s'agit d'une étude de 127 jours avec une conception croisée, divisée en trois périodes métaboliques (P1, P2 et P3). Pendant les 14 premiers jours (P1), tous les sujets recevront deux boissons placebo et seront invités à en consommer une au petit-déjeuner et au dîner. Ensuite, dans la période métabolique 2 (P2), les sujets seront assignés au hasard à l'un des deux groupes (groupe 1 et groupe 2). Pendant les 56 prochains jours, le groupe 1 continuera à consommer deux boissons placebo par jour, tandis que le groupe 2 consommera deux boissons contenant des limonoïdes (250 mg/boisson). Au cours des 56 derniers jours (P3), les boissons fournies au groupe 1 contiendront des limonoïdes et les boissons fournies au groupe 2 seront un placebo. Les boissons placebo et limonoïde seront toutes deux tamponnées, stériles, aromatisées à l'orange, édulcorées artificiellement, contenant 60 mg de vitamine C, 11 mg de riboflavine et aucune calorie. Les sujets sont informés qu'ils doivent boire toute la boisson fournie chaque jour. Les boissons contiendront un biomarqueur (riboflavine), et le biomarqueur est dosé dans des échantillons d'urine prélevés toutes les 2 semaines lors des rendez-vous de ramassage des boissons pour surveiller la conformité. Les sujets seront informés qu'ils sont surveillés pour la conformité. Le glucoside de limonine est obtenu à partir de déchets d'agrumes en utilisant des méthodes chromatographiques qui utilisent des milieux et des solvants approuvés de qualité alimentaire. Le glucoside de limonine pur final est cristallisé de manière fractionnée à partir d'une solution aqueuse concentrée d'un extrait purifié par chromatographie. Le matériau cristallin est séparé de la liqueur mère, séché et soumis à une évaluation par spectre de masse et résonance magnétique nucléaire. Les données spectrales sont comparées aux données acquises pour un standard de glucoside de limonine pur pour établir une pureté finale meilleure que 95 %.

Des échantillons de sang (environ 70 ml, moins de cinq cuillères à soupe) seront prélevés après un jeûne nocturne de 12 heures les jours 1, 15, 71 et 127 de l'étude par ponction veineuse. Ces échantillons de sang seront utilisés pour déterminer les limonoïdes sériques, la numération globulaire complète (CBC) et le panel de chimie complet (CCP), les lipides sériques, les marqueurs d'inflammation, les fonctions des lymphocytes et des monocytes. En plus des prises de sang à jeun les jours 15 (groupe 2) et 71 jours (groupe 1), des échantillons de sang répétés (5 ml à chaque fois, environ une cuillère à café) seront prélevés à 2, 4, 6, 8 et 24 h après avoir pris deux boissons limonoïdes de 12 oz (limonoïdes totaux 500 mg) pour déterminer l'absorption et le métabolisme des limonoïdes. Les enquêteurs notent que les échantillons de sang prélevés 24 heures après la prise de limonoïdes seront le 16e jour d'étude pour le groupe 2 et le 72e jour pour le groupe 1. La quantité totale de sang prélevé sera inférieure à 500 ml (2 tasses) en 127 jours. Un échantillon d'urine ponctuel sera prélevé lors de la même visite que la prise de sang à jeun et toutes les deux semaines lors des rendez-vous de ramassage des boissons. Des prises de sang répétées à 0, 2, 4, 6 et 8 heures après le supplément limonoïde seront accompagnées de la collecte d'échantillons d'urine. Aucune nourriture ne sera autorisée pendant les 8 heures; la consommation d'eau sera surveillée et limitée à un litre. Les sujets recevront deux repas standardisés pendant cette période, chacun représentant 35 % de leur apport calorique quotidien, l'un après le prélèvement sanguin de 0 heure et l'autre après le prélèvement sanguin de 8 heures.

Les sujets seront informés de ne pas modifier leur régime alimentaire, leur exercice ou leur mode de vie au cours de l'étude. Il leur sera également demandé de ne pas consommer d'agrumes/jus (orange, pamplemousse) tout au long de l'étude. Trois rappels alimentaires de 24 heures seront collectés par téléphone au cours de la dernière semaine de chaque période métabolique (P1, P2, P3). Un régime standardisé sera servi pour les trois repas de chaque jour avant les prises de sang.