Метаболизм и влияние цитрусовых лимоноидов на здоровье у людей с гиперхолестеринемией

Это 127-дневное перекрестное исследование, разделенное на три метаболических периода (P1, P2 и P3). В течение первых 14 дней (P1) все субъекты получат два напитка плацебо, и их попросят употреблять по одному за завтраком и ужином. Затем в метаболическом периоде 2 (P2) субъекты будут случайным образом распределены в одну из двух групп (группа 1 и группа 2). В течение следующих 56 дней группа 1 будет продолжать употреблять два напитка плацебо в день, в то время как группа 2 будет потреблять два напитка, содержащих лимоноиды (250 мг/напиток). В течение последних 56 дней (P3) напитки, предоставляемые Группе 1, будут содержать лимоноиды, а напитки, предоставляемые Группе 2, будут плацебо. И плацебо, и лимоноидные напитки будут представлять собой забуференный, стерильный, искусственно подслащенный напиток со вкусом апельсина на 12 унций, содержащий 60 мг витамина С, 11 мг рибофлавина и ноль калорий. Субъектов проинструктировали, что они должны выпивать весь предложенный напиток каждый день. Напитки будут содержать биомаркер (рибофлавин), и биомаркер анализируется в образцах мочи, собираемых каждые 2 недели во время приема напитков для контроля за соблюдением режима. Субъекты будут проинформированы о том, что они находятся под наблюдением на предмет соблюдения. Глюкозид лимонина получают из отходов цитрусовых с использованием хроматографических методов, в которых используются одобренные для пищевых продуктов среды и растворители. Конечный чистый глюкозид лимонина фракционно кристаллизуют из концентрированного водного раствора хроматографически очищенного экстракта. Кристаллический материал отделяют от маточного раствора, сушат и подвергают масс-спектрометрии и ядерно-магнитному резонансу. Спектральные данные сравнивают с данными, полученными для чистого стандарта глюкозида лимонина, чтобы установить окончательную чистоту, которая лучше 95%.

Образцы крови (приблизительно 70 мл, менее пяти столовых ложек) будут взяты после 12-часового ночного голодания в дни исследования 1, 15, 71 и 127 путем венепункции. Эти образцы крови будут использоваться для определения содержания лимоноидов в сыворотке, полного подсчета клеток крови (CBC) и комплексной биохимической панели (CCP), липидов сыворотки, маркеров воспаления, функций лимфоцитов и моноцитов. В дополнение к забору крови натощак на 15-й день (группа 2) и 71-й день (группа 1) повторные образцы крови (по 5 мл каждый раз, примерно одна чайная ложка) будут браться через 2, 4, 6, 8 и 24 часа. после приема двух порций лимоноида по 12 унций (общее количество лимоноидов 500 мг) для определения всасывания и метаболизма лимоноидов. Исследователи отмечают, что образцы крови, взятые через 24 часа после приема лимоноида, будут на 16-й день исследования для группы 2 и на 72-й день для группы 1. Общий объем взятой крови будет менее 500 мл (2 стакана) за 127 дней. Образец выборочной мочи будет собираться во время того же визита, когда проводится забор крови натощак, и каждые две недели во время приема напитков. Повторные заборы крови через 0, 2, 4, 6 и 8 часов после приема лимоноида будут сопровождаться сбором образцов мочи. Никакая еда не будет разрешена в течение 8 часов; потребление воды будет контролироваться и ограничиваться одним литром. В течение этого времени субъектам будет предложено два стандартных приема пищи, каждый из которых составляет 35% их дневного потребления калорий, один после 0-часового забора крови, а другой - после 8-часового забора крови.

Субъекты будут проинструктированы не менять свою диету, физические упражнения или образ жизни в ходе исследования. Они также будут проинструктированы не употреблять какие-либо цитрусовые/соки (апельсин, грейпфрут) на протяжении всего исследования. Три 24-часовых диетических отзыва будут собраны по телефону в течение последней недели каждого метаболического периода (P1, P2, P3). Стандартная диета будет подаваться для всех трех приемов пищи на каждый день до забора крови.