Metabolisme og sundhedseffekter af citruslimonoider hos mennesker med hyperkolesterolæm

Dette er et 127-dages studie med et cross-over design, opdelt i tre metaboliske perioder (P1, P2 og P3). I de første 14 dage (P1) vil alle forsøgspersoner modtage to placebo-drikke og vil blive bedt om at indtage en hver med morgenmad og aftensmad. Derefter i metabolisk periode 2 (P2), vil forsøgspersoner blive tilfældigt tildelt en af ​​to grupper (Gruppe 1 og Gruppe 2). I de næste 56 dage vil gruppe 1 fortsætte med at indtage to placebo-drikke om dagen, mens gruppe 2 vil indtage to drikkevarer indeholdende limonoider (250 mg/drik). I løbet af de sidste 56 dage (P3) vil drikkevarerne til gruppe 1 indeholde limonoider, og drikkevarer til gruppe 2 vil være placebo. Både placebo- og limonoid-drikkene vil være 12-oz bufret, steril, kunstigt sødet drik med appelsinsmag, indeholdende 60 mg C-vitamin, 11 mg riboflavin og nul kalorier. Forsøgspersonerne instrueres i, at de skal drikke alle de drikkevarer, der gives hver dag. Drikkevarer vil indeholde en biomarkør (riboflavin), og biomarkøren analyseres i urinprøver, der indsamles hver 2. uge ved afhentning af drikkevarer for at overvåge overholdelse. Forsøgspersonerne vil blive informeret om, at de bliver overvåget for overholdelse. Limoninglucosid opnås fra citrusaffaldsmaterialer ved hjælp af kromatografiske metoder, der anvender fødevaregodkendte medier og opløsningsmidler. Det endelige rene limoninglucosid krystalliseres fraktioneret fra en koncentreret vandopløsning af en kromatografisk renset ekstrakt. Det krystallinske materiale separeres fra moderluden, tørres og udsættes for massespektral og kernemagnetisk resonansvurdering. Spektraldataene sammenlignes med data opnået for en ren limoninglukosidstandard for at fastslå den endelige renhed, som er bedre end 95 %.

Blodprøver (ca. 70 ml, mindre end fem spiseskefulde) vil blive udtaget efter 12 timers faste natten over på undersøgelsesdage 1, 15, 71 og 127 ved venepunktur. Disse blodprøver vil blive brugt til at bestemme serumlimonoider, fuldstændigt blodcelletal (CBC) og omfattende kemipanel (CCP), serumlipider, inflammationsmarkører, lymfocyt- og monocytterfunktioner. Ud over de fastende blodprøver på dag 15 (gruppe 2) og dag 71 (gruppe 1), vil der blive udtaget gentagne blodprøver (5 ml hver gang, ca. en teskefuld) efter 2, 4, 6, 8 og 24 timer efter at have taget to 12-oz limonoid-drikke (i alt limonoider 500mg) for at bestemme absorptionen og metabolismen af ​​limonoider. Efterforskerne bemærker, at blodprøverne udtaget 24 timer efter limonoidindtagelsen vil være på undersøgelsesdag 16 for gruppe 2 og dag 72 for gruppe 1. Den samlede mængde af udtaget blod vil være mindre end 500 ml (2 kopper) på 127 dage. En pleturinprøve vil blive indsamlet ved samme besøg, som det fastende blod udtages, og hver anden uge ved afhentning af drikkevarer. Gentagne blodudtagninger 0, 2, 4, 6 og 8 timer efter limonoidtilskuddet vil blive ledsaget af indsamling af urinprøver. Ingen mad vil være tilladt i løbet af de 8 timer; vandindtaget vil blive overvåget og begrænset til en liter. Forsøgspersonerne vil få serveret to standardiserede måltider i løbet af denne tid, der hver repræsenterer 35 % af deres daglige kalorieindtag, et efter 0 timers blodprøvetagning og det andet efter 8 timers blodprøvetagning.

Forsøgspersonerne vil blive instrueret i ikke at ændre deres kostvaner, motion eller livsstil i løbet af undersøgelsen. De vil også blive instrueret i ikke at indtage citrusfrugter/juice (appelsin, grapefrugt) under hele undersøgelsen. Tre 24-timers kosttilbagekaldelser vil blive indsamlet telefonisk i løbet af den sidste uge af hver metabolisk periode (P1, P2, P3). En standardiseret diæt vil blive serveret til alle tre måltider for hver dag før blodprøverne.