Metabolisme en gezondheidseffecten van Citrus Limonoids bij hypercholesterolemische mensen

Dit is een 127 dagen durend onderzoek met een cross-over opzet, verdeeld in drie metabole perioden (P1, P2 en P3). Gedurende de eerste 14 dagen (P1) krijgen alle proefpersonen twee placebo-drankjes en wordt hen gevraagd er één te consumeren bij het ontbijt en het avondeten. Vervolgens worden proefpersonen in metabolische periode 2 (P2) willekeurig toegewezen aan een van de twee groepen (groep 1 en groep 2). Gedurende de volgende 56 dagen zal groep 1 twee placebodranken per dag blijven consumeren, terwijl groep 2 twee limonoïdenhoudende dranken zal consumeren (250 mg/drank). Tijdens de laatste 56 dagen (P3) zullen de dranken die aan Groep 1 worden verstrekt limonoïden bevatten en zullen de dranken die aan Groep 2 worden verstrekt placebo zijn. Zowel de placebo- als de limonoïde-dranken zijn 12-oz gebufferde, steriele, sinaasappelsmaak, kunstmatig gezoete drank, die 60 mg vitamine C, 11 mg riboflavine en nul calorieën bevat. Proefpersonen krijgen de instructie dat ze elke dag alle aangeboden drank moeten drinken. Dranken bevatten een biomarker (riboflavine) en de biomarker wordt getest in urinemonsters die om de 2 weken worden verzameld bij de afhaalafspraken om de naleving te controleren. De proefpersonen krijgen te horen dat ze worden gecontroleerd op naleving. Limonin-glucoside wordt verkregen uit citrusafvalmaterialen met behulp van chromatografische methoden die goedgekeurde media en oplosmiddelen van voedingskwaliteit gebruiken. Het uiteindelijke zuivere limonineglucoside wordt gefractioneerd gekristalliseerd uit een geconcentreerde waterige oplossing van een chromatografisch gezuiverd extract. Het kristallijne materiaal wordt gescheiden van de moederloog, gedroogd en onderworpen aan massaspectrale en nucleaire magnetische resonantiebeoordeling. De spectrale gegevens worden vergeleken met gegevens die zijn verkregen voor een zuivere limonineglucosidestandaard om een ​​uiteindelijke zuiverheid vast te stellen die beter is dan 95%.

Bloedmonsters (ongeveer 70 ml, minder dan vijf eetlepels) zullen worden afgenomen na 12 uur vasten gedurende de nacht op studiedagen 1, 15, 71 en 127 door middel van venapunctie. Deze bloedmonsters zullen worden gebruikt voor het bepalen van serumlimonoïden, het volledige aantal bloedcellen (CBC) en het uitgebreide chemiepanel (CCP), serumlipiden, ontstekingsmarkers, functies van lymfocyten en monocyten. Naast de nuchtere bloedafnames op dag 15 (groep 2) en dag 71 (groep 1), zullen herhaalde bloedmonsters (5 ml per keer, ongeveer één theelepel) worden afgenomen om 2, 4, 6, 8 en 24 uur na het nemen van twee 12-oz limonoiddranken (totaal limonoids 500mg) om de absorptie en het metabolisme van limonoids te bepalen. De onderzoekers merken op dat de bloedmonsters die 24 uur na de inname van limonoid worden afgenomen op studiedag 16 voor groep 2 en dag 72 voor groep 1 zullen zijn. De totale hoeveelheid afgenomen bloed is minder dan 500 ml (2 kopjes) in 127 dagen. Een spot urinemonster zal worden verzameld tijdens hetzelfde bezoek als de nuchtere bloedafname en om de twee weken bij de afhaalafspraken voor drankjes. Herhaalde bloedafnames op 0, 2, 4, 6 en 8 uur na het limonoidsupplement gaan gepaard met het verzamelen van urinemonsters. Tijdens de 8 uur is er geen eten toegestaan; de waterinname wordt gecontroleerd en beperkt tot één liter. De proefpersonen krijgen gedurende deze tijd twee gestandaardiseerde maaltijden geserveerd, die elk 35% van hun dagelijkse calorie-inname vertegenwoordigen, één na de bloedafname van 0 uur en de andere na de bloedafname van 8 uur.

Proefpersonen zullen worden geïnstrueerd om hun dieet, lichaamsbeweging of levensstijl tijdens de studie niet te veranderen. Ze zullen ook worden geïnstrueerd om tijdens het onderzoek geen citrusvruchten/sap (sinaasappel, druivenfruit) te consumeren. Tijdens de laatste week van elke metabolische periode (P1, P2, P3) worden drie 24-uurs dieetherinneringen telefonisch verzameld. Elke dag voorafgaand aan de bloedafname wordt voor alle drie de maaltijden een gestandaardiseerd dieet geserveerd.