Metabolismus und gesundheitliche Auswirkungen von Zitrus-Limonoiden bei Menschen mit Hypercholesterinämie

Dies ist eine 127-Tage-Studie mit Cross-Over-Design, die in drei Stoffwechselperioden (P1, P2 und P3) unterteilt ist. In den ersten 14 Tagen (P1) erhalten alle Probanden zwei Placebo-Getränke und werden gebeten, jeweils eines zum Frühstück und Abendessen zu sich zu nehmen. Dann werden die Probanden in Stoffwechselperiode 2 (P2) nach dem Zufallsprinzip einer von zwei Gruppen (Gruppe 1 und Gruppe 2) zugeordnet. In den nächsten 56 Tagen wird Gruppe 1 weiterhin zwei Placebo-Getränke pro Tag konsumieren, während Gruppe 2 zwei Getränke mit Limonoiden (250 mg/Getränk) konsumieren wird. Während der letzten 56 Tage (P3) enthalten die an Gruppe 1 gelieferten Getränke Limonoide, und die an Gruppe 2 gelieferten Getränke sind Placebo. Sowohl das Placebo- als auch das Limonoid-Getränk sind gepufferte, sterile, künstlich gesüßte 12-oz-Getränke mit Orangengeschmack, die 60 mg Vitamin C, 11 mg Riboflavin und null Kalorien enthalten. Die Probanden werden angewiesen, dass sie das gesamte bereitgestellte Getränk jeden Tag trinken müssen. Getränke enthalten einen Biomarker (Riboflavin), und der Biomarker wird in Urinproben getestet, die alle 2 Wochen bei den Getränkeabholterminen entnommen werden, um die Einhaltung zu überwachen. Die Probanden werden darüber informiert, dass sie auf Einhaltung überwacht werden. Limoninglucosid wird aus Zitrusabfällen unter Verwendung chromatographischer Methoden gewonnen, die für Lebensmittel zugelassene Medien und Lösungsmittel verwenden. Das endgültige reine Limoninglucosid wird aus einer konzentrierten Wasserlösung eines chromatographisch gereinigten Extrakts fraktioniert kristallisiert. Das kristalline Material wird von der Mutterlauge getrennt, getrocknet und einer massenspektralen und kernmagnetischen Resonanzuntersuchung unterzogen. Die Spektraldaten werden mit Daten verglichen, die für einen reinen Limonin-Glucosid-Standard erfasst wurden, um eine endgültige Reinheit festzustellen, die besser als 95 % ist.

Blutproben (ca. 70 ml, weniger als fünf Esslöffel) werden nach 12-stündigem Fasten über Nacht an den Studientagen 1, 15, 71 und 127 durch Venenpunktion entnommen. Diese Blutproben werden verwendet, um Serum-Limonoide, vollständiges Blutbild (CBC) und umfassendes Chemie-Panel (CCP), Serumlipide, Entzündungsmarker, Lymphozyten- und Monozytenfunktionen zu bestimmen. Zusätzlich zu den nüchternen Blutentnahmen an Tag 15 (Gruppe 2) und Tag 71 (Gruppe 1) werden wiederholte Blutproben (jeweils 5 ml, ungefähr ein Teelöffel) um 2, 4, 6, 8 und 24 Stunden entnommen nach der Einnahme von zwei 12-Unzen-Limonoiden (insgesamt 500 mg Limonoide), um die Absorption und den Metabolismus von Limonoiden zu bestimmen. Die Forscher merken an, dass die Blutproben, die 24 Stunden nach der Limonoid-Einnahme entnommen wurden, am Studientag 16 für Gruppe 2 und am Tag 72 für Gruppe 1 sein werden. Die Gesamtmenge des entnommenen Blutes beträgt weniger als 500 ml (2 Tassen) in 127 Tagen. Eine Stichprobenurinprobe wird beim gleichen Besuch wie bei den Nüchternblutabnahmen und alle zwei Wochen bei den Getränkeabholterminen entnommen. Wiederholte Blutentnahmen 0, 2, 4, 6 und 8 Stunden nach der Limonoid-Ergänzung werden von der Sammlung von Urinproben begleitet. Während der 8 Stunden ist kein Essen erlaubt; Die Wasseraufnahme wird überwacht und auf einen Liter begrenzt. Den Probanden werden während dieser Zeit zwei standardisierte Mahlzeiten serviert, die jeweils 35 % ihrer täglichen Kalorienaufnahme darstellen, eine nach der 0-stündigen Blutabnahme und die andere nach der 8-stündigen Blutabnahme.

Die Probanden werden angewiesen, ihre Ernährung, Bewegung oder ihren Lebensstil im Laufe der Studie nicht zu ändern. Sie werden auch angewiesen, während der gesamten Studie keine Zitrusfrüchte/Saft (Orange, Grapefruit) zu konsumieren. Während der letzten Woche jeder Stoffwechselperiode (P1, P2, P3) werden telefonisch drei 24-Stunden-Ernährungsrückrufe gesammelt. Eine standardisierte Diät wird für alle drei Mahlzeiten für jeden Tag vor den Blutentnahmen serviert.