Efficacité des milieux de culture en une seule étape et des milieux de culture séquentiels sur le taux de blastulation

Les milieux de culture séquentiels sont conçus pour imiter l'environnement changeant dans les canaux ovariens et l'utérus in vivo. Cependant, il existe certaines différences entre les conditions de culture in vivo et in vitro. Par conséquent, des milieux en une seule étape sont créés, ce qui permet à l'embryon lui-même de choisir les nutriments nécessaires tout en maintenant un environnement de culture plus stable. Des études antérieures suggèrent un taux de blastulation plus élevé dans les médias à une seule étape que dans les médias séquentiels.

Il s'agit d'une étude d'essai contrôlé randomisé (ECR) comparant le taux de blastulation de milieux de culture en une seule étape et de milieux de culture séquentiels. Le protocole de stimulation est antagoniste. Le patient sera consulté le jour de l'échographie s'il répond aux critères d'inclusion et signe le formulaire de consentement. Ensuite, l'infirmière ouvrira la lettre contenant le type de média pour ce cas. Le milieu est préparé à l'intérieur du laboratoire un jour avant le prélèvement des ovocytes.

Après le prélèvement des ovocytes, le complexe ovocyte-cumulus (OCC) sera cultivé pendant 2 heures à 37°C, 6% de dioxyde de carbone (CO2) et 5% d'oxygène (O2). Pendant ce temps, la préparation du sperme sera effectuée en utilisant la technique du gradient. Après 2 heures, l'OCC sera dénudé et sera cultivé pendant 1 heure jusqu'à l'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI). Les ovocytes après ICSI seront cultivés par groupes de 3-4 ovocytes dans les mêmes conditions de 37°C, 6% CO2 et 5% O2. La procédure de vérification de la fertilisation a lieu 16 à 18 heures après l'ICSI. Au jour 3, les embryons seront évalués 66 à 68 heures après l'ICSI, les embryons de grade 1 sont identifiés avec 7 à 9 blastomères et la fragmentation est de 0 à 10 %. Les patientes seront informées de la qualité de l'embryon. S'il n'est pas décidé de transférer les embryons au jour 5, le patient sera consulté pour le transfert au jour 3. Le taux de blastulation ne sera pas enregistré.

Pour le groupe de milieux de culture séquentiels, les embryons seront transférés sur du milieu Sequential Blast. Pour le groupe de milieux de culture en une seule étape, les embryons seront transférés dans la nouvelle boîte de culture avec le même milieu. Au jour 5, l'évaluation de la qualité des embryons se fera à 116 ± 1 heures après l'ICSI. Le classement des blastocystes est basé sur l'expansion, la qualité de la masse cellulaire interne et la qualité du trophectoderme. Deux bons blastocystes seront transférés. Après 11 jours, un test de bêta-gonadotrophine chorionique humaine (hCG) sera requis. Si le résultat bêta-hCG est positif, un examen sera nécessaire après 3 semaines et le soutien lutéal sera administré jusqu'à 7 semaines.