Skuteczność pożywek do hodowli jednoetapowych i pożywek do hodowli sekwencyjnych na szybkość blastulacji

Pożywki do hodowli sekwencyjnych są zaprojektowane tak, aby naśladować zmieniające się środowisko w przewodach jajnikowych i macicy in vivo. Istnieją jednak pewne różnice między warunkami hodowli in vivo i in vitro. W ten sposób tworzone są pożywki jednoetapowe, które pozwalają zarodkowi samemu wybrać niezbędne składniki odżywcze, zachowując jednocześnie bardziej stabilne środowisko hodowli. Wcześniejsze badania sugerują wyższą częstość blastulacji w ośrodkach jednoetapowych niż w ośrodkach sekwencyjnych.

Jest to badanie z randomizacją i grupą kontrolną (RCT) porównujące szybkość blastulacji jednoetapowych pożywek hodowlanych i sekwencyjnych pożywek hodowlanych. Protokół stymulacji jest antagonistą. Pacjent zostanie skonsultowany w dniu USG, jeśli spełni kryteria włączenia i podpisze formularz zgody. Następnie pielęgniarka otworzy list zawierający rodzaj nośnika dla tego przypadku. Pożywki są przygotowywane w laboratorium na dzień przed pobraniem oocytów.

Po pobraniu oocytów kompleks oocyt-cumulus (OCC) będzie hodowany przez 2 godziny w temperaturze 37°C, 6% dwutlenku węgla (CO2) i 5% tlenu (O2). W międzyczasie preparacja plemników zostanie przeprowadzona techniką gradientową. Po 2 godzinach OCC zostanie obnażone i będzie hodowane przez 1 godzinę do czasu wstrzyknięcia plemnika do cytoplazmy (ICSI). Oocyty po ICSI będą hodowane w grupach po 3-4 oocyty w tych samych warunkach 37°C, 6% CO2 i 5% O2. Procedura kontroli zapłodnienia odbywa się 16-18 godzin po ICSI. W dniu 3 zarodki zostaną ocenione w 66-68 godzin po ICSI, zarodki stopnia 1 zostaną zidentyfikowane na podstawie 7-9 blastomerów, a fragmentacja wynosi od 0 do 10%. Pacjentki zostaną poinformowane o jakości zarodków. Jeśli zarodki nie zostaną przeniesione w dniu 5, pacjentka zostanie poproszona o przeniesienie w dniu 3. Częstość blastulacji nie zostanie zarejestrowana.

W przypadku grupy pożywek do hodowli sekwencyjnych zarodki zostaną przeniesione na pożywkę Sequential Blast. W przypadku grupy pożywek jednoetapowych zarodki zostaną przeniesione do nowej szalki hodowlanej z tą samą pożywką. W 5. dniu ocena jakości zarodka odbędzie się 116 ± 1 godziny po ICSI. Klasyfikacja blastocysty opiera się na ekspansji, jakości masy komórek wewnętrznych i jakości trofektodermy. Przeniesione zostaną dwie dobre blastocysty. Po 11 dniach wymagane będzie oznaczenie beta-ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (hCG). Jeśli wynik beta-hCG będzie pozytywny, po 3 tygodniach konieczne będzie badanie, a do 7 tygodnia zostanie podane wsparcie lutealne.