Efficacia dei terreni di coltura a passaggio singolo e dei terreni di coltura sequenziali sulla velocità di esplosione

I terreni di coltura sequenziali sono progettati per imitare l'ambiente in evoluzione nei dotti ovarici e nell'utero in vivo. Tuttavia, ci sono alcune differenze tra le condizioni di coltura in vivo e in vitro. Quindi, vengono creati supporti a passaggio singolo che consentono all'embrione stesso di scegliere i nutrienti necessari mantenendo un ambiente di coltura più stabile. Studi precedenti suggeriscono un tasso di blastulazione più elevato nei media a passaggio singolo rispetto ai media sequenziali.

Questo è uno studio controllato randomizzato (RCT) che confronta il tasso di blastulazione dei terreni di coltura a passaggio singolo e dei terreni di coltura sequenziali. Il protocollo di stimolazione è antagonista. Il paziente verrà consultato il giorno dell'ecografia se soddisfa i criteri di inclusione e firma il modulo di consenso. Quindi, l'infermiera aprirà la lettera contenente il tipo di supporto per quel caso. Il terreno viene preparato all'interno del laboratorio un giorno prima del prelievo degli ovociti.

Dopo il prelievo degli ovociti, il complesso ovocita-cumulo (OCC) sarà coltivato per 2 ore a 37°C, 6% di anidride carbonica (CO2) e 5% di ossigeno (O2). Nel frattempo, la preparazione dello sperma verrà eseguita utilizzando la tecnica del gradiente. Dopo 2 ore, l'OCC sarà denudato e sarà coltivato per 1 ora fino all'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI). Gli ovociti dopo ICSI saranno coltivati ​​in gruppi di 3-4 ovociti nelle stesse condizioni di 37°C, 6% CO2 e 5% O2. La procedura di controllo della fecondazione è a 16-18 ore dopo l'ICSI. Il giorno 3, gli embrioni saranno valutati in 66-68 ore dopo l'ICSI, gli embrioni di grado 1 sono identificati con 7-9 blastomeri e la frammentazione è dello 0-10%. I pazienti saranno informati sulla qualità dell'embrione. Se non si decide che gli embrioni debbano essere trasferiti il ​​giorno 5, il paziente verrà consultato per il trasferimento il giorno 3. Il tasso di blastulazione non verrà registrato.

Per il gruppo di terreni di coltura sequenziali, gli embrioni saranno trasferiti nel terreno di coltura sequenziale. Per il gruppo di terreni di coltura a passaggio singolo, gli embrioni verranno trasferiti nel nuovo piatto di coltura con lo stesso terreno. Il giorno 5, la valutazione della qualità dell'embrione avverrà a 116±1 ore dopo l'ICSI. La classificazione della blastocisti si basa sull'espansione, sulla qualità della massa cellulare interna e sulla qualità del trofectoderma. Verranno trasferite due buone blastocisti. Dopo 11 giorni, sarà richiesto il test della beta-gonadotropina corionica umana (hCG). Se il risultato della beta-hCG è positivo, l'esame sarà necessario dopo 3 settimane e il supporto luteale sarà somministrato fino a 7 settimane.