Effectiviteit van Single Step Culture Media en Sequential Culture Media op de snelheid van ontploffing

Sequentiële kweekmedia zijn ontworpen om de veranderende omgeving in de eierstokkanalen en de baarmoeder in vivo na te bootsen. Er zijn echter enkele verschillen tussen in vivo en in vitro kweekomstandigheden. Daarom worden single-step media gecreëerd die het embryo in staat stellen zelf de noodzakelijke voedingsstoffen te kiezen terwijl een stabielere kweekomgeving behouden blijft. Eerdere studies suggereren een hogere blastulatiesnelheid in de single-step media dan de sequentiële media.

Dit is een gerandomiseerde gecontroleerde studie (RCT) waarin de blastulatiesnelheid van kweekmedia in één stap en sequentiële kweekmedia wordt vergeleken. Het stimulatieprotocol is antagonistisch. Patiënt wordt op de dag van de echo geraadpleegd als hij voldoet aan de inclusiecriteria en het toestemmingsformulier heeft ondertekend. Vervolgens opent de verpleegkundige de brief met het type media voor die casus. De media worden een dag voor het ophalen van de eicel in het laboratorium bereid.

Na het ophalen van de eicel wordt het oöcyt-cumulus-complex (OCC) gedurende 2 uur gekweekt bij 37°C, 6% koolstofdioxide (CO2) en 5% zuurstof (O2). Ondertussen zal de voorbereiding van het sperma worden uitgevoerd met behulp van de gradiënttechniek. Na 2 uur wordt OCC ontbloot en gedurende 1 uur gekweekt tot intracytoplasmatische sperma-injectie (ICSI). Oöcyten worden na ICSI gekweekt in groepen van 3-4 oöcyten onder dezelfde omstandigheden van 37°C, 6% CO2 en 5% O2. Bevruchtingscontrole vindt 16-18 uur na ICSI plaats. Op dag 3 worden de embryo's binnen 66-68 uur na ICSI beoordeeld, embryo's van graad 1 worden geïdentificeerd met 7-9 blastomeren en fragmentatie is van 0-10%. De patiënten worden geïnformeerd over de kwaliteit van het embryo. Als niet wordt besloten dat de embryo's op dag 5 worden teruggeplaatst, wordt de patiënt geraadpleegd om op dag 3 terug te plaatsen. Het blastulatiepercentage wordt niet geregistreerd.

Voor de sequentiële kweekmediagroep zullen embryo's worden overgebracht naar Sequential Blast-medium. Voor de eenstapscultuurmediagroep zullen embryo's met hetzelfde medium worden overgebracht naar de nieuwe kweekschaal. Op dag 5 vindt de beoordeling van de embryokwaliteit plaats op 116 ± 1 uur na ICSI. De classificatie van blastocysten is gebaseerd op de expansie, de kwaliteit van de binnenste celmassa en de kwaliteit van het trophectoderm. Er worden twee goede blastocysten overgeplaatst. Na 11 dagen is een bèta-humaan choriongonadotrofine (hCG) -test vereist. Als de bèta-hCG-uitslag positief is, is na 3 weken onderzoek nodig en wordt de luteale ondersteuning gegeven tot 7 weken.