Эффективность одноэтапной питательной среды и последовательной питательной среды на скорость бластуляции

Последовательные питательные среды предназначены для имитации изменяющейся среды в протоках яичников и матке in vivo. Однако существуют некоторые различия между условиями культивирования in vivo и in vitro. Следовательно, создаются одноступенчатые среды, которые позволяют самому эмбриону выбирать необходимые питательные вещества, сохраняя при этом более стабильную культуральную среду. Предыдущие исследования предполагают более высокую скорость бластуляции в одноступенчатой ​​среде, чем в последовательной.

Это рандомизированное контролируемое исследование (РКИ), в котором сравнивается скорость бластуляции в одноступенчатой ​​культуральной среде и последовательной культуральной среде. Протокол стимуляции является антагонистом. Пациент будет консультирован в день УЗИ, если он соответствует критериям включения и подпишет форму согласия. Затем медсестра откроет письмо, содержащее тип носителя для данного случая. Среда готовится в лаборатории за день до забора ооцитов.

После забора ооцитов комплекс ооцит-кумулюс (OCC) будет культивироваться в течение 2 часов при 37°C, 6% углекислого газа (CO2) и 5% кислорода (O2). Между тем, подготовка спермы будет проводиться с использованием градиентной техники. Через 2 часа OCC будет оголен и будет культивирован в течение 1 часа до интрацитоплазматической инъекции спермы (ICSI). Ооциты после ИКСИ будут культивироваться группами по 3-4 ооцита в тех же условиях 37°С, 6% СО2 и 5% О2. Процедура проверки оплодотворения через 16-18 часов после ИКСИ. На 3-й день эмбрионы будут оцениваться через 66-68 часов после ИКСИ, эмбрионы 1 степени идентифицируются с 7-9 бластомерами и фрагментацией от 0 до 10%. Пациенты будут проинформированы о качестве эмбриона. Если решение о переносе эмбрионов на 5-й день не принято, пациенту будет предложено перенести его на 3-й день. Частота бластуляции не будет регистрироваться.

Для группы последовательных культуральных сред эмбрионы будут перенесены в среду Sequential Blast. Для группы одноступенчатой ​​питательной среды эмбрионы будут перенесены в новую чашку для культивирования с той же средой. На 5-й день оценка качества эмбриона будет через 116±1 час после ИКСИ. Классификация бластоцист основана на расширении, качестве внутренней клеточной массы и качестве трофэктодермы. Две хорошие бластоцисты будут перенесены. Через 11 дней потребуется сдать анализ на бета-хорионический гонадотропин человека (ХГЧ). Если результат бета-ХГЧ положительный, обследование потребуется через 3 недели, а лютеиновая поддержка будет оказываться до 7 недель.