Eficácia do Meio de Cultura de Etapa Única e do Meio de Cultura Sequencial na Taxa de Blastulação

Os meios de cultura sequencial são projetados para imitar o ambiente em mudança nos ductos ovarianos e no útero in vivo. No entanto, existem algumas diferenças entre as condições de cultura in vivo e in vitro. Portanto, são criados meios de etapa única que permitem que o próprio embrião escolha os nutrientes necessários, mantendo um ambiente de cultura mais estável. Estudos anteriores sugerem maior taxa de blastulação na mídia de etapa única do que na mídia sequencial.

Este é um estudo randomizado controlado (RCT) comparando a taxa de blastulação de meios de cultura de etapa única e meios de cultura sequenciais. O protocolo de estimulação é antagonista. O paciente será consultado no dia do ultrassom se atender aos critérios de inclusão e assinar o termo de consentimento. Em seguida, a enfermeira abrirá a carta contendo o tipo de mídia para aquele caso. A mídia é preparada dentro do laboratório um dia antes da coleta dos oócitos.

Após a coleta oocitária, o complexo oócito-cúmulo (OCC) será cultivado por 2 horas a 37°C, 6% de dióxido de carbono (CO2) e 5% de oxigênio (O2). Enquanto isso, a preparação do esperma será realizada usando a técnica de gradiente. Após 2 horas, o OCC será desnudado e cultivado por 1 hora até a Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI). Os oócitos após ICSI serão cultivados em grupos de 3-4 oócitos nas mesmas condições de 37°C, 6% CO2 e 5% O2. O procedimento de verificação da fertilização ocorre 16-18 horas após a ICSI. No dia 3, os embriões serão avaliados em 66-68 horas após a ICSI, os embriões de grau 1 são identificados com 7-9 blastômeros e a fragmentação é de 0-10%. As pacientes serão informadas sobre a qualidade do embrião. Se não for decidida a transferência dos embriões no dia 5, a paciente será consultada para transferência no dia 3. A taxa de blastulação não será registrada.

Para o grupo de meios de cultura sequencial, os embriões serão transferidos para o meio Sequential Blast. Para o grupo de meio de cultura de etapa única, os embriões serão transferidos para a nova placa de cultura com o mesmo meio. No dia 5, a avaliação da qualidade do embrião será às 116±1 horas após o ICSI. A classificação do blastocisto é baseada na expansão, na qualidade da massa celular interna e na qualidade do trofectoderma. Dois bons blastocistos serão transferidos. Após 11 dias, será necessário o teste de beta-gonadotrofina coriônica humana (hCG). Se o resultado do beta-hCG for positivo, o exame será necessário após 3 semanas e o suporte lúteo será dado até 7 semanas.