Phosphorylation plaquettaire de l'acétyl coenzyme A carboxylase dans les maladies coronariennes (ACCTHEROMA)

Les patients consécutifs avec coronarographie planifiée aux Cliniques Universitaires Saint Luc, Bruxelles, quelle que soit l'indication, seront inclus entre mars 2015 et février 2016. Un consentement éclairé sera obtenu avant l'angiographie.

A. Prélèvement sanguin Un prélèvement sanguin veineux de routine sera effectué à jeun dans le service de cardiologie avant l'angiographie (norme de soins pour les patients subissant une angiographie coronarienne).

Afin d'éviter une ponction supplémentaire pour prélèvement sanguin et de limiter l'activation plaquettaire, des prélèvements sanguins sont effectués après pose de gaine au laboratoire de Cath avant toute administration de médicament. Les mesures suivantes seront effectuées :

• Tests de coagulation de routine, y compris le rapport de rationalisation international, le temps de céphaline activée, le temps de thrombine, le temps de prothrombine, le fibrinogène, les DDimères.
• Test de réactivité plaquettaire par l'agrégomètre à électrodes multiples (analyse multiplaque)
• L'isolement plaquettaire et les lysats seront stockés congelés pour l'analyse des phospho-protéines par immunotransfert et électrochimiluminescence (ECLIA)
• Aliquots de plasma pauvre en plaquettes stocké congelé pour l'inflammation (HsCRP), tests de génération de thrombine (complexe thrombine-antithrombine, fragment de prothrombine F1.2, potentiel de génération de thrombine endogène-ETP), marqueurs d'activation plaquettaire (facteur plaquettaire 4, ligand CD40 soluble, P- sélectine) et extraction de micro-ARN circulants.
• Isolement plaquettaire et purification supplémentaire pour l'extraction de micro-ARN spécifiques aux plaquettes.

B. Évaluation de l'athérosclérose Tous les patients ont subi une coronarographie. Une lésion coronarienne significative est définie comme une sténose luminale supérieure à 50 %. Le score de syntaxe sera calculé pour tous les patients.

La charge globale de plaque d'athérosclérose sur les artères coronaires et extracoronaires sera évaluée en mesurant le score de calcium sur un scanner thoraco-abdominal avec synchronisation ECG prospective dans un sous-groupe de patients sélectionnés au hasard. La calcification de l'artère coronaire (CAC) est exprimée en score d'Agatston à l'aide d'un logiciel de notation du calcium (Philips Healthcare) avec un seuil de 130 unités Hounsfield. Le degré de charge athérosclérotique sur les artères coronaires est classé comme léger (score d'Agatston <100), modéré (score d'Agatston 100-400) ou sévère (score d'Agatston >400). La calcification aortique (score AoC) a été mesurée de l'arc aortique aux artères iliaques chez tous les patients.

C. Collecte des données Les caractéristiques de base des patients seront recueillies à partir de la base de données médicale des Cliniques Universitaires Saint Luc. Tous les angiogrammes coronariens seront examinés par 2 enquêteurs différents et le score de syntaxe sera calculé avec le calculateur de score de syntaxe en ligne. Le score CAC Agatston et AoC sera également évalué par 2 enquêteurs différents.

D. Classification des patients pour l'analyse du P-ACC plaquettaire L'analyse de la phosphorylation de l'ACC plaquettaire (P-ACC) sera effectuée par immunotransfert avec un anticorps spécifique sondant l'ACC phosphorylé (Ser 79). Des plaquettes lavées purifiées et stimulées avec 0,5 unité/ml de thrombine seront utilisées comme contrôles internes positifs.

Les patients seront d'abord classés en groupes non CAD et CAD en fonction des résultats de l'angiographie coronarienne et du score CAC Agatston : Non CAD (absence de lésion à l'angiographie et/ou score CAC Agatston<100) et CAD (présence d'au moins 1 lésion sur angiographie et/ou score CAC Agatston>100).

Dans une deuxième analyse, basée sur la présentation clinique, le groupe CAD sera ensuite divisé en CAD stable ou CAD instable [syndrome coronarien aigu (SCA)]. Les plaquettes P-ACC seront comparées dans les deux sous-groupes. Cette classification détaillée décrira les patients à haut risque atteints d'un syndrome coronarien aigu en cours.

E. Taille de l'échantillon et analyse statistique. Sur la base de nos données préliminaires, nous avons déterminé que le recrutement de 102 patients fournirait une puissance de 80 % à un niveau de signification de 5 % pour détecter une différence de 0,15 (UA) dans la phosphorylation de l'ACC chez les patients athéroscléreux, par rapport aux patients non coronariens. .

Les variables continues seront exprimées en moyenne +/- un écart-type, les variables catégorielles en nombres et pourcentages. Les patients seront séparés en quatre groupes en fonction du niveau de P-ACC (quartiles). La présentation clinique, les marqueurs de génération de thrombine et le score de calcium seront comparés dans tous ces groupes, sur la base d'une analyse ANOVA. Les variables seront soumises à un test de régression logistique afin d'identifier des prédicteurs indépendants d'un état de phosphorylation élevé de l'ACC. Le rôle du taux élevé de plaquettes P-ACC dans l'évaluation du risque des patients sera ensuite étudié.

F.Suivi Une période de suivi de 3 ans est prévue. Les événements enregistrés pendant la période de suivi seront obtenus à partir de la base de données médicale et un appel téléphonique sera effectué en cas de données manquantes.