Blodplateacetylkoenzym A-karboksylasefosforylering ved koronararteriesykdom (ACCTHEROMA)

Påfølgende pasienter med planlagt koronar angiogram ved Cliniques Universitaires Saint Luc, Brussel, uansett indikasjon, vil bli inkludert mellom mars 2015 og februar 2016. Informert samtykke vil bli innhentet før angiografi.

A. Blodprøvetaking Rutinemessig venøs blodprøve vil bli tatt under fastende tilstand på kardiologisk avdeling før angiogrammet (standardbehandling for pasienter som gjennomgår koronar angiogram).

For å unngå ytterligere punktering for blodprøvetaking og for å begrense blodplateaktivering, tas blodprøver etter innsetting av skjede på Cath-laboratoriet før eventuell legemiddeladministrering. Følgende målinger vil bli utført:

• Rutinemessige koagulasjonstester inkludert internasjonal rasjonaliseringsratio, aktivert cefalintid, trombintid, protrombintid, fibrinogen, DDimerer.
• Blodplatereaktivitetstesting med Multiple Electrode Aggregometer (Multiplate Analysis)
• Blodplateisolering og lysater vil lagres frosset for fosfoproteinanalyse ved immunoblotting og elektrokjemiluminescens (ECLIA)
• Alikvoter av dårlig blodplateplasma lagret frosset for betennelse (HsCRP), trombingenerasjonstester (trombin-antitrombinkompleks, protrombinfragment F1.2, endogent trombingenerasjonspotensial-ETP), blodplateaktiveringsmarkører (blodplatefaktor 4, løselig CD40-ligand, løselig P- selectin) og sirkulerende mikro-RNA-ekstraksjon.
• Blodplateisolering og videre rensing for blodplatespesifikk mikro-RNA-ekstraksjon.

B. Evaluering av aterosklerose Alle pasienter gjennomgikk koronar angiogram. Signifikant koronararterielesjon er definert som en luminal stenose over 50 %. Syntaksscore vil bli beregnet for alle pasienter.

Global aterosklerotisk plakkbelastning på koronare og ekstrakoronare arterier vil bli evaluert ved å måle kalsiumskår på thoraco-abdominal skanner med prospektiv EKG-gate i en tilfeldig utvalgt undergruppe av pasienter. Koronararterieforkalkning (CAC) uttrykkes som Agatston-score ved bruk av kalsiumscoringsprogramvare (Philips Healthcare) med en terskel på 130 Hounsfield-enheter. Graden av aterosklerotisk belastning på koronararteriene er klassifisert som mild (Agatston-score <100), moderat (Agatston-score 100-400) eller alvorlig (Agatston-score >400). Aortaforkalkning (AoC score) ble målt fra aortabue til iliaca arterier hos alle pasienter.

C. Datainnsamling Baseline-karakteristika for pasienter vil bli samlet inn fra den medisinske databasen til Cliniques Universitaires Saint Luc. Alle koronar angiogrammer vil bli gjennomgått av 2 forskjellige etterforskere og syntaksscore vil bli beregnet med den elektroniske syntaksscorekalkulatoren. CAC Agatston og AoC score vil også bli vurdert av 2 forskjellige etterforskere.

D. Pasientklassifisering for blodplate-P-ACC-analyse Blodplate-ACC-fosforylering (P-ACC)-analyse vil bli utført ved immunoblotting med et spesifikt antistoff-probing for fosforylert (Ser 79) ACC. Rensede vaskede blodplater stimulert med 0,5 enheter/ml trombin vil bli brukt som positive interne kontroller.

Pasienter vil først bli klassifisert i ikke-CAD- og CAD-grupper basert på resultatene av koronar angiogram og CAC Agatston-skåre: Ikke-CAD (fravær av lesjon på angiogram og/eller CAC Agatston-score <100) og CAD (tilstedeværelse av minst 1 lesjon på angiogram og/eller CAC Agatston-score >100).

I en andre analyse, basert på klinisk presentasjon, vil CAD-gruppen videre deles inn i Stabil CAD eller Ustabil CAD [akutt koronarsyndrom (ACS)]. Blodplater P-ACC vil bli sammenlignet i begge undergruppene. Denne detaljerte klassifiseringen vil skissere høyrisikopasienter med pågående akutt koronarsyndrom.

E. Prøvestørrelse og statistisk analyse. Basert på våre foreløpige data, fastslo vi at innrullering av 102 pasienter ville gi en kraft på 80 % ved et signifikansnivå på 5 % for å oppdage en forskjell på 0,15 (A.U.) i fosforyleringen av ACC hos aterosklerotiske pasienter, sammenlignet med ikke-CAD-pasienter .

Kontinuerlige variabler vil uttrykkes som gjennomsnitt +/- ett standardavvik, kategoriske variabler som antall og prosenter. Pasientene deles i fire grupper avhengig av nivået av P-ACC (kvartiler). Klinisk presentasjon, trombingenerasjonsmarkører og kalsiumskåring vil bli sammenlignet i alle disse gruppene, basert på ANOVA-analyse. Variabler vil bli sendt til logistisk regresjonstest for å identifisere uavhengige prediktorer for høy ACC-fosforyleringstilstand. Rollen til høye blodplater P-ACC i vurderingen av risikoen til pasientene vil deretter bli studert.

F.Oppfølging Det legges opp til en oppfølgingsperiode på 3 år. Hendelser registrert i oppfølgingsperioden vil bli hentet fra den medisinske databasen og en telefonsamtale vil bli tatt i tilfelle manglende data.