Thrombocyta-acetil-koenzim A karboxiláz foszforiláció koszorúér-betegségben (ACCTHEROMA)

A brüsszeli Cliniques Universitaires Saint Luc-ban tervezett koszorúér angiográfián átesett, egymást követő betegeket, bármilyen indikációt is jeleznek, 2015 márciusa és 2016 februárja között bevonják. Az angiográfia előtt tájékozott beleegyezést kell kérni.

A. Vérvétel A rutin vénás vérmintát éhgyomorra veszik a kardiológiai osztályon az angiogram előtt (a koszorúér angiogramon átesett betegek szokásos ellátása).

A vérmintavételhez szükséges további szúrások elkerülése és a thrombocyta-aktiváció korlátozása érdekében a vérmintákat a Cath-laboratóriumban a hüvely felhelyezése után minden gyógyszer beadása előtt le kell venni. A következő méréseket kell elvégezni:

• Rutin véralvadási tesztek, beleértve a nemzetközi racionalizálási arányt, aktivált cefalin időt, trombin időt, protrombin időt, fibrinogént, DDimereket.
• A vérlemezke reaktivitás vizsgálata többelektródos aggregométerrel (többlemezes elemzés)
• A thrombocyta-izolációt és a lizátumokat fagyasztva tárolják a foszfo-protein elemzéshez immunoblottal és elektrokemilumineszcenciával (ECLIA)
• Gyulladásra (HsCRP) lefagyasztott szegény vérlemezkeplazma alikvot részei, trombingenerációs tesztek (trombin-antitrombin komplex, F1.2 protrombin fragmentum, endogén trombingenerációs potenciál-ETP), vérlemezke aktivációs markerek (4-es thrombocyta-faktor, oldható CD40ligand, oldható P-). szelektin) és keringő mikro-RNS extrakció.
• Thrombocyta izolálás és további tisztítás vérlemezke-specifikus mikro-RNS extrakcióhoz.

B. Érelmeszesedés kiértékelése Minden betegnél koszorúér angiogramot végeztek. Szignifikáns koszorúér-léziónak minősül az 50% feletti luminalis szűkület. A szintaxis pontszámot minden betegre kiszámítjuk.

A koszorúér- és extracoronariás artériákon kialakuló globális ateroszklerotikus plakk-terhelést a kalcium-pontszám mérésével thoraco-abdominalis szkenneren, prospektív EKG-kapuzás mellett értékelik a betegek véletlenszerűen kiválasztott alcsoportjában. A koszorúér meszesedést (CAC) Agatston-pontszámban fejezik ki kalciumpontozó szoftver (Philips Healthcare) segítségével, 130 Hounsfield-egység küszöbértékkel. A szívkoszorúér artériák ateroszklerotikus terhelése enyhe (Agatston-pontszám <100), közepes (Agatston-pontszám 100-400) vagy súlyos (Agatston-pontszám>400) fokozatú. Az aorta meszesedését (AoC pontszám) az aortaívtől a csípőartériákig minden betegnél mértük.

C. Adatgyűjtés A betegek kiindulási jellemzőit a Cliniques Universitaires Saint Luc orvosi adatbázisából gyűjtjük össze. Az összes koszorúér angiogramot 2 különböző vizsgáló ellenőrzi, és a szintaktikai pontszámot az online szintaktikai pontszám kalkulátorral számítják ki. A CAC Agatston és az AoC pontszámot szintén 2 különböző vizsgáló fogja értékelni.

D. Betegek Osztályozás a vérlemezke P-ACC analízishez A vérlemezke ACC foszforiláció (P-ACC) analízise specifikus antitesttel végzett immunblottal történik, amely a foszforilált (Ser 79) ACC-t vizsgálja. Pozitív belső kontrollként 0,5 egység/ml trombinnal stimulált, tisztított, mosott vérlemezkék kerülnek felhasználásra.

A betegeket először nem CAD és CAD csoportokba sorolják a koszorúér angiogram és a CAC Agatston pontszám alapján: nem CAD (lézió hiánya az angiogramon és/vagy CAC Agatston pontszám < 100) és CAD (legalább 1 jelenléte) lézió az angiogramon és/vagy a CAC Agatston pontszám >100).

Egy második elemzésben, a klinikai megjelenés alapján, a CAD-csoportot tovább osztják stabil CAD-re vagy instabil CAD-re [akut koronária szindróma (ACS)]. A thrombocyta P-ACC-t mindkét alcsoportban összehasonlítják. Ez a részletes besorolás felvázolja a fennálló akut koszorúér-szindrómában szenvedő, magas kockázatú betegeket.

E. Mintanagyság és statisztikai elemzés. Előzetes adataink alapján megállapítottuk, hogy 102 beteg bevonása 5%-os szignifikanciaszint mellett 80%-os teljesítményt biztosít az ACC foszforilációjában 0,15 (A.U.) különbség kimutatására atherosclerosisban szenvedő betegeknél a nem CAD-ben szenvedő betegekhez képest. .

A folytonos változókat átlag +/- egy szórással, a kategorikus változókat pedig számokkal és százalékokkal fejezzük ki. A betegeket négy csoportra osztják a P-ACC (kvartilis) szintjétől függően. A klinikai megjelenést, a trombingenerációs markereket és a kalcium-pontszámot az összes csoportban összehasonlítjuk az ANOVA elemzés alapján. A változókat logisztikus regressziós tesztnek vetjük alá, hogy azonosítsuk a magas ACC foszforilációs állapot független prediktorait. Ezután megvizsgálják a magas vérlemezkeszámú P-ACC szerepét a betegek kockázatának felmérésében.

F. Nyomon követés 3 éves követési időszakot terveznek. A nyomon követési időszakban rögzített eseményeket az orvosi adatbázisból nyerjük, és az adatok hiánya esetén telefonálunk.