Fosforilação da Acetil Coenzima A Carboxilase de Plaquetas na Doença Arterial Coronária (ACCTHEROMA)

Pacientes consecutivos com angiografia coronária planejada nas Cliniques Universitaires Saint Luc, Bruxelas, qualquer que seja a indicação, serão incluídos entre março de 2015 e fevereiro de 2016. O consentimento informado será obtido antes do angiograma.

A. Amostragem de sangue Amostra de sangue venoso de rotina será feita em jejum na enfermaria de cardiologia antes do angiograma (padrão de atendimento para pacientes submetidos a angiograma coronário).

A fim de evitar punções adicionais para amostragem de sangue e limitar a ativação plaquetária, as amostras de sangue são retiradas após a inserção da bainha no laboratório de cateterismo antes da administração de qualquer medicamento. Serão feitas as seguintes medições:

• Testes de coagulação de rotina, incluindo razão racionalizada internacional, tempo de cefalina ativada, tempo de trombina, tempo de protrombina, fibrinogênio, DDimers.
• Teste de reatividade plaquetária pelo Agregômetro de Eletrodos Múltiplos (Análise de Placas Múltiplas)
• Isolamento de plaquetas e lisados ​​serão estocados congelados para análise de fosfoproteína por imunoblotting e eletroquimioluminescência (ECLIA)
• Alíquotas de plasma pobre em plaquetas estocadas congeladas para inflamação (HsCRP), testes de geração de trombina (complexo trombina-antitrombina, fragmento de protrombina F1.2, potencial de geração de trombina endógena-ETP), marcadores de ativação plaquetária (fator plaquetário 4, ligante CD40 solúvel, P- selectina) e extração de micro-RNA circulante.
• Isolamento de plaquetas e purificação adicional para extração de micro-RNA específico de plaquetas.

B. Avaliação da aterosclerose Todos os pacientes realizaram angiografia coronariana. Lesão significativa da artéria coronária é definida como uma estenose luminal acima de 50%. A pontuação de sintaxe será calculada para todos os pacientes.

A carga global da placa aterosclerótica nas artérias coronárias e extracoronárias será avaliada pela medição do escore de cálcio no scanner toraco-abdominal com eletrocardiograma prospectivo em um subgrupo de pacientes selecionados aleatoriamente. A calcificação da artéria coronária (CAC) é expressa como pontuação de Agatston usando software de pontuação de cálcio (Philips Healthcare) com um limite de 130 unidades Hounsfield. O grau de carga aterosclerótica nas artérias coronárias é classificado como leve (escore de Agatston <100), moderado (escore de Agatston 100-400) ou grave (escore de Agatston >400). A calcificação aórtica (escore AoC) foi medida do arco aórtico às artérias ilíacas em todos os pacientes.

C. Coleta de dados As características basais dos pacientes serão coletadas do banco de dados médico da Cliniques Universitaires Saint Luc. Todos os angiogramas coronários serão revisados ​​por 2 investigadores diferentes e a pontuação de sintaxe será calculada com a calculadora de pontuação de sintaxe on-line. A pontuação CAC Agatston e AoC também serão avaliadas por 2 investigadores diferentes.

D. Classificação dos pacientes para análise de plaquetas P-ACC A análise de fosforilação de plaquetas ACC (P-ACC) será feita por imunoblotting com uma sondagem de anticorpo específico para ACC fosforilado (Ser 79). Plaquetas lavadas purificadas e estimuladas com 0,5 unidades/ml de trombina serão utilizadas como controles internos positivos.

Os pacientes serão primeiramente classificados em grupos não-DAC e DAC com base nos resultados da angiografia coronária e no escore CAC Agatston: Não-DAC (ausência de lesão no angiograma e/ou escore CAC Agatston <100) e CAD (presença de pelo menos 1 lesão no angiograma e/ou escore CAC Agatston>100).

Em uma segunda análise, com base na apresentação clínica, o grupo de DAC será ainda dividido em DAC estável ou DAC instável [síndrome coronariana aguda (SCA)]. As plaquetas P-ACC serão comparadas em ambos os subgrupos. Esta classificação detalhada irá delinear os pacientes de alto risco com síndrome coronariana aguda em curso.

E. Tamanho da amostra e análise estatística. Com base em nossos dados preliminares, determinamos que a inscrição de 102 pacientes forneceria um poder de 80% a um nível de significância de 5% para detectar uma diferença de 0,15 (A.U.) na fosforilação de ACC em pacientes ateroscleróticos, em comparação com pacientes sem DAC .

Variáveis ​​contínuas serão expressas como média +/- um desvio padrão, variáveis ​​categóricas como contagens e porcentagens. Os pacientes serão separados em quatro grupos, dependendo do nível de P-ACC (quartis). A apresentação clínica, os marcadores de geração de trombina e o escore de cálcio serão comparados em todos esses grupos, com base na análise ANOVA. As variáveis ​​serão submetidas ao teste de regressão logística para identificar preditores independentes de alto estado de fosforilação do ACC. O papel das plaquetas altas P-ACC na avaliação do risco dos pacientes será então estudado.

F.Acompanhamento Está previsto um período de acompanhamento de 3 anos. Os eventos registrados durante o período de acompanhamento serão obtidos do banco de dados médico e um telefonema será feito em caso de falta de dados.