Acetylo-koenzym płytkowy Fosforylacja karboksylazy w chorobie wieńcowej (ACCTHEROMA)

Kolejni pacjenci z planowaną angiografią wieńcową w Cliniques Universitaires Saint Luc w Brukseli, niezależnie od wskazania, zostaną włączeni do badania między marcem 2015 r. a lutym 2016 r. Świadoma zgoda zostanie uzyskana przed angiografią.

A. Pobieranie krwi Rutynowe pobieranie krwi żylnej będzie pobierane na czczo na oddziale kardiologii przed wykonaniem koronarografii (standard postępowania u pacjentów poddawanych koronarografii).

Aby uniknąć dodatkowych nakłuć w celu pobrania krwi i ograniczyć aktywację płytek krwi, próbki krwi pobiera się po założeniu koszulki w pracowni cewnikowania przed podaniem jakiegokolwiek leku. Wykonane zostaną następujące pomiary:

• Rutynowe testy krzepnięcia, w tym międzynarodowy współczynnik racjonalizacji, aktywowany czas cefalinowy, czas trombinowy, czas protrombinowy, fibrynogen, DDimery.
• Badanie reaktywności płytek za pomocą agregometru wieloelektrodowego (analiza wielopłytkowa)
• Izolacja płytek krwi i lizaty będą przechowywane zamrożone do analizy fosfo-białkowej metodą immunoblottingu i elektrochemiluminescencji (ECLIA)
• Porcje ubogiego osocza płytkowego, zamrożone do celów zapalenia (HsCRP), testy generacji trombiny (kompleks trombina-antytrombina, fragment protrombiny F1.2, endogenny potencjał wytwarzania trombiny-ETP), markery aktywacji płytek krwi (czynnik płytkowy 4, rozpuszczalny ligand CD40, rozpuszczalny P- selektyna) i ekstrakcja krążącego mikro-RNA.
• Izolacja płytek krwi i dalsze oczyszczanie w celu ekstrakcji specyficznego dla płytek krwi mikro-RNA.

B. Ocena miażdżycy U wszystkich pacjentów wykonano koronarografię. Istotne uszkodzenie tętnicy wieńcowej definiuje się jako zwężenie światła powyżej 50%. Wynik składni zostanie obliczony dla wszystkich pacjentów.

Globalne obciążenie blaszką miażdżycową tętnic wieńcowych i pozawieńcowych zostanie ocenione poprzez pomiar poziomu wapnia na skanerze klatki piersiowej i jamy brzusznej z prospektywnym bramkowaniem EKG w losowo wybranej podgrupie pacjentów. Zwapnienie tętnic wieńcowych (CAC) wyraża się w skali Agatstona przy użyciu oprogramowania do oceny wapnia (Philips Healthcare) z progiem 130 jednostek Hounsfielda. Stopień obciążenia tętnic wieńcowych miażdżycą klasyfikuje się jako łagodny (punktacja Agatstona <100), umiarkowany (punktacja Agatstona 100-400) lub ciężki (punktacja Agatstona >400). Zwapnienie aorty (ocena AoC) mierzono od łuku aorty do tętnic biodrowych u wszystkich pacjentów.

C. Gromadzenie danych Wyjściowa charakterystyka pacjentów zostanie zebrana z medycznej bazy danych Cliniques Universitaires Saint Luc. Wszystkie angiogramy wieńcowe zostaną sprawdzone przez 2 różnych badaczy, a wynik składni zostanie obliczony za pomocą internetowego kalkulatora wyników składni. CAC Agatston i wynik AoC będą również oceniane przez 2 różnych badaczy.

D. Klasyfikacja pacjentów do analizy płytkowej P-ACC Analiza fosforylacji płytkowej ACC (P-ACC) zostanie przeprowadzona przez immunoblotting ze swoistym przeciwciałem sondującym fosforylowany (Ser 79) ACC. Oczyszczone przemyte płytki krwi stymulowane 0,5 jednostkami/ml trombiny będą używane jako pozytywne kontrole wewnętrzne.

Pacjenci zostaną najpierw sklasyfikowani w grupach bez CAD i CAD na podstawie wyników koronarografii i wyniku CAC Agatston: Non-CAD (brak zmiany na angiogramie i/lub CAC Agatston w skali <100) i CAD (obecność co najmniej 1 zmiana na angiogramie i/lub punktacja CAC Agatston >100).

W drugiej analizie, opartej na obrazie klinicznym, grupa CAD zostanie dalej podzielona na stabilną CAD lub niestabilną CAD [ostry zespół wieńcowy (ACS)]. Płytkowe P-ACC zostanie porównane w obu podgrupach. Ta szczegółowa klasyfikacja przedstawi pacjentów wysokiego ryzyka z trwającym ostrym zespołem wieńcowym.

E. Wielkość próby i analiza statystyczna. Na podstawie naszych wstępnych danych ustaliliśmy, że włączenie 102 pacjentów zapewni moc 80% na poziomie istotności 5% do wykrycia różnicy 0,15 (AU) w fosforylacji ACC u pacjentów z miażdżycą tętnic w porównaniu z pacjentami bez CAD .

Zmienne ciągłe będą wyrażone jako średnia +/- jedno odchylenie standardowe, zmienne kategoryczne jako liczby i procenty. Pacjenci zostaną podzieleni na cztery grupy w zależności od poziomu P-ACC (kwartyle). Obraz kliniczny, markery generacji trombiny i punktacja wapnia zostaną porównane we wszystkich tych grupach na podstawie analizy ANOVA. Zmienne zostaną poddane testowi regresji logistycznej w celu zidentyfikowania niezależnych predyktorów wysokiego stanu fosforylacji ACC. Następnie zbadana zostanie rola wysokiego poziomu płytek krwi P-ACC w ocenie ryzyka pacjentów.

F. Kontynuacja Planuje się okres obserwacji wynoszący 3 lata. Zdarzenia zarejestrowane w okresie obserwacji zostaną pobrane z bazy danych medycznych, aw przypadku ich braku zostanie przeprowadzona rozmowa telefoniczna.