Verihiutaleasetyylikoentsyymi A -karboksylaasifosforylaatio sepelvaltimotaudissa (ACCTHEROMA)

Peräkkäiset potilaat, joille on suunniteltu sepelvaltimon angiogrammi Cliniques Universitaires Saint Lucissa, Brysselissä, käyttöaiheesta riippumatta, otetaan mukaan maaliskuun 2015 ja helmikuun 2016 välisenä aikana. Tietoinen suostumus hankitaan ennen angiografiaa.

A. Verinäytteenotto Rutiininomainen laskimoverinäyte otetaan paastotilassa kardiologian osastolla ennen angiogrammaa (sepelvaltimon angiografiaa saavien potilaiden hoidon standardi).

Ylimääräisten pistosten välttämiseksi verinäytteitä varten ja verihiutaleiden aktivoitumisen rajoittamiseksi verinäytteitä otetaan Cath-laboratoriossa sen jälkeen, kun vaippa on asetettu ennen lääkkeen antamista. Seuraavat mittaukset tehdään:

• Rutiininomaiset hyytymistestit, mukaan lukien kansainvälinen rationalisointisuhde, aktivoitu kefaliiniaika, trombiiniaika, protrombiiniaika, fibrinogeeni, DDimeerit.
• Verihiutaleiden reaktiivisuuden testaus Multiple Electrode Aggregometerilla (Multiplate Analysis)
• Verihiutaleiden eristys ja lysaatit varastoidaan pakastettuina fosfoproteiinianalyysiä varten immunoblottauksella ja elektrokemiluminesenssilla (ECLIA)
• Alikvootit huonosta verihiutaleplasmasta varastoitu tulehduksen varalta (HsCRP), trombiinin muodostumistestit (trombiini-antitrombiinikompleksi, protrombiinifragmentti F1.2, endogeeninen trombiinin muodostumispotentiaali-ETP), verihiutaleiden aktivaatiomarkkereita (verihiutaletekijä 4, liukoinen CD40-ligandi, liukoinen P- selektiini) ja kiertävän mikro-RNA:n uutto.
• Verihiutaleiden eristäminen ja lisäpuhdistus verihiutalespesifistä mikro-RNA:ta varten.

B. Ateroskleroosin arviointi Kaikille potilaille tehtiin sepelvaltimon angiogrammi. Merkittävä sepelvaltimoleesio määritellään yli 50 %:n luminaalisen ahtautumisena. Syntaksipisteet lasketaan kaikille potilaille.

Maailmanlaajuinen ateroskleroottinen plakkitaakka sepelvaltimoissa ja ekstrakoronaarisissa valtimoissa arvioidaan mittaamalla kalsiumpisteet thorako-vatsan skannerilla mahdollisella EKG-portauksella satunnaisesti valitussa potilasalaryhmässä. Sepelvaltimon kalkkiutuminen (CAC) ilmaistaan ​​Agatston-pisteinä käyttämällä kalsiumin pisteytysohjelmistoa (Philips Healthcare) 130 Hounsfield-yksikön kynnyksellä. Sepelvaltimoiden ateroskleroottisen kuormituksen aste luokitellaan lieväksi (Agatston-pistemäärä <100), kohtalaiseksi (Agatston-pistemäärä 100-400) tai vakavaksi (Agatston-pistemäärä > 400). Aortan kalkkeutuminen (AoC-pisteet) mitattiin kaikilta potilailta aortan kaaresta lonkkavaltimoihin.

C. Tiedonkeruu Potilaiden perustiedot kerätään Cliniques Universitaires Saint Lucin lääketieteellisestä tietokannasta. Kaikki sepelvaltimon angiogrammit tarkistaa 2 eri tutkijaa ja syntaksipisteet lasketaan online-syntaksipistelaskurilla. CAC Agatston ja AoC pisteet arvioivat myös 2 eri tutkijaa.

D. Potilaat Verihiutaleiden P-ACC-analyysin luokittelu Verihiutaleiden ACC-fosforylaatio (P-ACC) -analyysi tehdään immunoblottauksella spesifisellä vasta-aineella, joka tutkii fosforyloitua (Ser 79) ACC:tä. Puhdistettuja pestyjä verihiutaleita, jotka on stimuloitu 0,5 yksikköä/ml trombiinilla, käytetään positiivisina sisäisinä kontrolleina.

Potilaat luokitellaan ensin ei-CAD- ja CAD-ryhmiin sepelvaltimon angiogrammin tulosten ja CAC Agatston -pistemäärän perusteella: Ei-CAD (leesion puuttuminen angiogrammissa ja/tai CAC Agatston -pistemäärä <100) ja CAD (läsnäolo vähintään 1 leesio angiogrammissa ja/tai CAC Agatston -pistemäärä> 100).

Toisessa analyysissä, joka perustuu kliiniseen esitykseen, CAD-ryhmä jaetaan edelleen stabiiliin CAD:iin tai epävakaan CAD:iin [akuutti sepelvaltimotauti (ACS)]. Verihiutale P-ACC:tä verrataan molemmissa alaryhmissä. Tämä yksityiskohtainen luokittelu määrittelee korkean riskin potilaat, joilla on jatkuva akuutti sepelvaltimotauti.

E. Otoskoko ja tilastollinen analyysi. Alustavien tietojemme perusteella päätimme, että 102 potilaan ilmoittautuminen antaisi 80 %:n tehon 5 %:n merkitsevyystasolla havaitsemaan 0,15 (A.U.) eron ACC:n fosforylaatiossa ateroskleroottisilla potilailla verrattuna muihin kuin CAD-potilaisiin. .

Jatkuvat muuttujat ilmaistaan ​​keskiarvona +/- yksi standardipoikkeama, kategoriamuuttujat lukuina ja prosentteina. Potilaat jaetaan neljään ryhmään riippuen P-ACC-tasosta (kvartiilit). Kaikissa näissä ryhmissä verrataan kliinistä esitystä, trombiinin muodostumismarkkereita ja kalsiumin pisteytystä ANOVA-analyysin perusteella. Muuttujat lähetetään logistiseen regressiotestiin korkean ACC-fosforylaatiotilan riippumattomien ennustajien tunnistamiseksi. Tämän jälkeen tutkitaan korkean verihiutaleiden P-ACC:n roolia potilaiden riskin arvioinnissa.

F.Seuranta Suunniteltu 3 vuoden seurantajakso. Seurantajakson aikana tallennetut tapahtumat haetaan lääketieteellisestä tietokannasta ja puuttuvien tietojen osalta soitetaan.