冠動脈疾患における血小板アセチル補酵素 A カルボキシラーゼのリン酸化 (ACCTHEROMA)

2015 年 3 月から 2016 年 2 月までの間に、ブリュッセルの Cliniques Universitaires Saint Luc で連続して冠動脈造影検査を受ける患者が含まれます。 血管造影の前にインフォームド コンセントが得られます。

A. 採血 通常の静脈血サンプルは、血管造影検査の前に心臓病棟で絶食状態で行われます (冠動脈造影検査を受ける患者の標準治療)。

採血のための追加の穿刺を回避し、血小板の活性化を制限するために、カテーテル検査室でシースを挿入した後、薬剤投与の前に血液サンプルを抜き取ります。 次の測定が行われます。

• 国際合理化比、活性化セファリン時間、トロンビン時間、プロトロンビン時間、フィブリノゲン、DDimers を含む定期的な凝固検査。
• Multiple Electrode Aggregometer (Multiplate Analysis) による血小板反応性試験
• 血小板の分離とライセートは、イムノブロッティングと電気化学発光 (ECLIA) によるリン酸化タンパク質分析のために凍結保存されます。
• 炎症 (HsCRP)、トロンビン生成テスト (トロンビン-アンチトロンビン複合体、プロトロンビン フラグメント F1.2、内因性トロンビン生成ポテンシャル ETP)、血小板活性化マーカー (血小板因子 4、可溶性 CD40 リガンド、可溶性 P-セレクチン) および循環マイクロ RNA 抽出。
• 血小板の分離と血小板特異的マイクロ RNA 抽出のためのさらなる精製。

B. アテローム性動脈硬化症の評価 すべての患者は冠動脈造影検査を受けました。 重要な冠動脈病変は、50%を超える管腔狭窄として定義されます。 構文スコアは、すべての患者について計算されます。

冠状動脈および冠状動脈外動脈に対する全体的なアテローム硬化性プラーク負荷は、無作為に選択された患者のサブグループで前向きECGゲーティングを使用して胸腹部スキャナーでカルシウムスコアを測定することにより評価されます。 冠動脈石灰化（ＣＡＣ）は、カルシウムスコアリングソフトウェア（Ｐｈｉｌｉｐｓ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、１３０ハウンズフィールド単位の閾値でＡｇａｔｓｔｏｎスコアとして表される。 冠動脈のアテローム硬化性負荷の程度は、軽度 (Agatston スコア <100)、中等度 (Agatston スコア 100-400)、または重度 (Agatston スコア >400) に分類されます。 大動脈石灰化 (AoC スコア) は、すべての患者の大動脈弓から腸骨動脈まで測定されました。

C. データ収集 患者のベースライン特性は、Cliniques Universitaires Saint Luc の医療データベースから収集されます。 すべての冠動脈造影図は 2 人の異なる研究者によってレビューされ、シンタックス スコアはオンラインのシンタックス スコア計算機で計算されます。 CAC Agatston および AoC スコアも、2 人の異なる調査員によって評価されます。

Ｄ．血小板Ｐ－ＡＣＣ分析のための患者分類 血小板ＡＣＣリン酸化（Ｐ－ＡＣＣ）分析は、リン酸化（Ｓｅｒ７９）ＡＣＣをプローブする特異的抗体を用いたイムノブロッティングによって行われる。 ０．５単位／ｍｌのトロンビンで刺激した精製洗浄血小板を陽性内部対照として使用する。

患者は、冠動脈造影図およびCAC Agatstonスコアの結果に基づいて、最初に非CADおよびCADグループに分類されます。血管造影および/またはCAC Agatstonスコア> 100の病変)。

2 番目の分析では、臨床症状に基づいて、CAD グループはさらに安定型 CAD または不安定型 CAD [急性冠症候群 (ACS)] に分類されます。 血小板 P-ACC は、両方のサブグループで比較されます。 この詳細な分類は、進行中の急性冠症候群の高リスク患者の概要を示します。

E. サンプルサイズと統計分析。 予備データに基づいて、非CAD患者と比較して、アテローム性動脈硬化患者のACCのリン酸化で0.15（AU）の差を検出するために、102人の患者の登録が5％の有意水準で80％の検出力を提供すると判断しました.

連続変数は平均 +/- 1 標準偏差として表され、カテゴリ変数はカウントとパーセンテージとして表されます。 患者は、P-ACC (四分位数) のレベルに応じて 4 つのグループに分けられます。 ＡＮＯＶＡ分析に基づいて、臨床症状、トロンビン生成マーカーおよびカルシウムスコアをこれらすべての群で比較する。 高ACCリン酸化状態の独立した予測因子を特定するために、変数をロジスティック回帰テストに提出します。 その後、患者のリスク評価における高血小板 P-ACC の役割が研究されます。

F.フォローアップ 3年間のフォローアップを予定しています。 フォローアップ期間中に記録されたイベントは、医療データベースから取得され、データが欠落している場合は電話がかけられます。