Thrombozyten-Acetyl-Coenzym-A-Carboxylase-Phosphorylierung bei koronarer Herzkrankheit (ACCTHEROMA)

Konsekutivpatienten mit geplanter Koronarangiographie an den Cliniques Universitaires Saint Luc, Brüssel, unabhängig von der Indikation, werden zwischen März 2015 und Februar 2016 eingeschlossen. Vor der Angiographie wird eine informierte Zustimmung eingeholt.

A. Blutentnahme Eine routinemäßige venöse Blutentnahme wird vor der Angiographie auf der Kardiologiestation in nüchternem Zustand durchgeführt (Versorgungsstandard für Patienten, die sich einer Koronarangiographie unterziehen).

Um eine zusätzliche Punktion zur Blutentnahme zu vermeiden und die Thrombozytenaktivierung zu begrenzen, werden vor jeder Medikamentenverabreichung Blutproben nach dem Einführen der Schleuse im Katheterlabor entnommen. Folgende Messungen werden durchgeführt:

• Routinegerinnungstests, einschließlich International Rationalize Ratio, aktivierte Kephalinzeit, Thrombinzeit, Prothrombinzeit, Fibrinogen, DDimere.
• Plättchenreaktivitätstest mit dem Multiple Electrode Aggregometer (Multiplate Analysis)
• Die Thrombozytenisolierung und Lysate werden für die Phosphoproteinanalyse durch Immunoblotting und Elektrochemilumineszenz (ECLIA) eingefroren gelagert.
• Aliquots von schlechtem Thrombozytenplasma, eingefroren für Entzündungen (HsCRP), Thrombinbildungstests (Thrombin-Antithrombin-Komplex, Prothrombinfragment F1.2, endogenes Thrombinbildungspotential-ETP), Thrombozytenaktivierungsmarker (Thrombozytenfaktor 4, löslicher CD40-Ligand, löslicher P- Selectin) und zirkulierende Mikro-RNA-Extraktion.
• Thrombozytenisolierung und weitere Reinigung für die Thrombozyten-spezifische Mikro-RNA-Extraktion.

B. Bewertung der Atherosklerose Alle Patienten wurden einem Koronarangiogramm unterzogen. Eine signifikante Koronararterienläsion ist definiert als eine Lumenstenose von über 50 %. Der Syntax-Score wird für alle Patienten berechnet.

Die globale atherosklerotische Plaquebelastung auf Koronar- und extrakoronaren Arterien wird durch Messung des Calcium-Scores auf einem Thorako-Bauch-Scanner mit prospektivem EKG-Gating in einer zufällig ausgewählten Untergruppe von Patienten bewertet. Koronararterienverkalkung (CAC) wird als Agatston-Score unter Verwendung von Calcium-Scoring-Software (Philips Healthcare) mit einem Schwellenwert von 130 Hounsfield-Einheiten ausgedrückt. Der Grad der atherosklerotischen Belastung der Koronararterien wird als leicht (Agatston-Score < 100), mittel (Agatston-Score 100–400) oder schwer (Agatston-Score > 400) eingestuft. Die Aortenverkalkung (AoC-Score) wurde bei allen Patienten vom Aortenbogen bis zu den Beckenarterien gemessen.

C. Datenerhebung Basismerkmale der Patienten werden aus der medizinischen Datenbank der Cliniques Universitaires Saint Luc erhoben. Alle Koronarangiogramme werden von 2 verschiedenen Ermittlern überprüft und der Syntax-Score wird mit dem Online-Syntax-Score-Rechner berechnet. CAC Agatston und AoC-Score werden ebenfalls von 2 verschiedenen Ermittlern bewertet.

D. Patientenklassifikation für die Thrombozyten-P-ACC-Analyse Die Analyse der Thrombozyten-ACC-Phosphorylierung (P-ACC) erfolgt durch Immunoblotting mit einem spezifischen Antikörper, der auf phosphoryliertes (Ser 79) ACC untersucht. Gereinigte gewaschene Blutplättchen, die mit 0,5 Einheiten/ml Thrombin stimuliert wurden, werden als positive interne Kontrollen verwendet.

Die Patienten werden zunächst auf der Grundlage der Ergebnisse des Koronarangiogramms und des CAC-Agatston-Scores in Nicht-CAD- und CAD-Gruppen eingeteilt: Nicht-CAD (Fehlen einer Läsion im Angiogramm und/oder CAC-Agatston-Score < 100) und CAD (Vorhandensein von mindestens 1 Läsion im Angiogramm und/oder CAC-Agatston-Score >100).

In einer zweiten Analyse, basierend auf der klinischen Präsentation, wird die KHK-Gruppe weiter unterteilt in stabile KHK oder instabile KHK [akutes Koronarsyndrom (ACS)]. Plättchen-P-ACC wird in beiden Untergruppen verglichen. Diese detaillierte Klassifikation wird Hochrisikopatienten mit anhaltendem akutem Koronarsyndrom skizzieren.

E. Stichprobengröße und statistische Analyse. Basierend auf unseren vorläufigen Daten stellten wir fest, dass die Aufnahme von 102 Patienten eine Power von 80 % bei einem Signifikanzniveau von 5 % liefern würde, um einen Unterschied von 0,15 (A.U.) in der Phosphorylierung von ACC bei atherosklerotischen Patienten im Vergleich zu Nicht-KHK-Patienten nachzuweisen .

Kontinuierliche Variablen werden als Mittelwert +/- eine Standardabweichung, kategoriale Variablen als Anzahl und Prozentsätze ausgedrückt. Die Patienten werden je nach P-ACC-Niveau (Quartile) in vier Gruppen eingeteilt. Klinisches Erscheinungsbild, Thrombinbildungsmarker und Calciumbewertung werden in all diesen Gruppen basierend auf einer ANOVA-Analyse verglichen. Variablen werden einem logistischen Regressionstest unterzogen, um unabhängige Prädiktoren für einen hohen ACC-Phosphorylierungszustand zu identifizieren. Anschließend wird die Rolle von P-ACC mit hohem Thrombozytenwert bei der Einschätzung des Risikos der Patienten untersucht.

F. Follow-up Ein Follow-up-Zeitraum von 3 Jahren ist geplant. Ereignisse, die während des Nachsorgezeitraums aufgezeichnet wurden, werden aus der medizinischen Datenbank abgerufen und bei fehlenden Daten wird ein Telefonanruf durchgeführt.