Le traitement du cancer du poumon avancé avec l'antigène Dribbles en ciblant l'activation des cellules T

La tumeur maligne est devenue la principale cause de décès chez l'homme, et le premier tueur de tumeur maligne est le cancer du poumon. L'intensification de la pollution de l'environnement s'accompagne d'une augmentation de l'incidence du cancer du poumon et de la mortalité élevée, ce qui est pire que le taux de survie à 5 ans n'est que d'environ 15 %, ce qui représente la première place dans les tumeurs malignes, l'exploitation de nouvelles technologies et produits antitumoraux vient pour arrêter l'attention croissante des gouvernements et des entreprises en raison de la réduction inefficace de la menace tumorale pour la vie et la santé des personnes sur les trois traitements conventionnels (chirurgie, radiothérapie et chimiothérapie). La biologie et l'immunothérapie ont été élues parmi les dix grandes percées en 2013 par le magazine Science et considérées comme une nouvelle direction de développement pour le traitement du cancer au 21e siècle.

Le traitement immunitaire existant comprend principalement : l'immunothérapie adoptive, la thérapie par vaccin contre les tumeurs, la thérapie par anticorps anti-point de contrôle immunitaire et d'autres thérapies auxiliaires, et l'immunothérapie adoptive a été étudiée et développée en plus du traitement le plus mature parmi ces thérapies. L'immunothérapie adoptive a été réalisée dans de nombreuses unités principalement est l'immunothérapie autologue DC - CIK, qui a appelé l'immunothérapie des cellules dendritiques (cellules dendritiques, DC) et des cellules tueuses induites par les cytokines (Cytokine Induced Killer, CIK). Le principe de cette technologie est : la séparation des monocytes et des lymphocytes du sang périphérique humain, puis ugmentés et activés par une variété de cytokines in vitro (par exemple, IFN - gamma, IL - 1, IL - 2, anti - CD3 mAb) à un lymphocyte mixte avec présentation d'antigène et fonction à large spectre de destruction des cellules tumorales. L'amplification activée DC-CIK par voie intraveineuse vers les patients, libérant des substances actives telles que la perforine des cellules CIK et l'enzyme de grain B vers les cellules tumorales après combinaison avec les cellules tumorales dans le corps, ce qui dissout les cellules tumorales. Pendant ce temps, la sécrétion d'une variété des cytokines, telles que l'IL - 2, l'IFN - gamma et le TNF alpha, améliore la fonction immunitaire de l'organisme et confère le rôle de fonction anti-tumorale.

Le rapport de la littérature existante et notre précédente étude en centre de traitement biologique ont montré une bonne sécurité, de petits effets secondaires et une bonne tolérance pour la grande majorité des patients. En effet curatif, le rapport actuel révèle que la technologie DC-CIK a un bon effet curatif sur la leucémie, le lymphome, le cancer de l'ovaire, le cancer de l'estomac, etc., à l'exception du cancer du poumon. réponse des lymphocytes T spécifiques à la tumeur. Comment améliorer l'efficacité de l'antigène du cancer du poumon présenté et stimuler une réponse plus forte des lymphocytes T spécifiques à la tumeur doit être abordée pour améliorer l'effet curatif de l'immunothérapie du cancer du poumon.

Au cours des dernières années, la thérapie par anticorps de point de contrôle a fait une percée dans l'immunothérapie tumorale, notamment CTLA-4, PD - 1 et PD - L1. un certain nombre d'études cliniques ont révélé que la thérapie des anticorps PD - 1 et PD - L1 pour le NSCLC avancé, en particulier dans le carcinome épidermoïde du poumon, a un bon effet thérapeutique, et le taux de réponse objectif de la maladie atteint 10 à 23 %. La thérapie DC/CIK autologue a été largement pratiquée dans le pays et a une bonne sécurité prouvée par de nombreuses pratiques cliniques. Comme le manque d'antigène tumoral efficace, il n'y a pas de grande étude randomisée en double aveugle confirmant sa fonction dans l'extension de la survie des patients et empêchant la progression tumorale jusqu'à présent. Certains hôpitaux ont adopté la solution de lyse des cellules tumorales ou la technologie CIK unie de peptide protéique à molécule unique/DC, ce qui signifie charger la lyse des cellules tumorales ou le peptide protéique à molécule unique en tant qu'antigène tumoral pour s'unir aux CIK induites in vitro en même temps. Lorsque comparé à la thérapie CIK seule, la thérapie unitaire peut non seulement endommager la tumeur de manière non spécifique, mais également inciter le corps à produire une réponse immunitaire spécifique à la tumeur. Cependant, la plupart des antigènes tumoraux contenus dans la lyse des cellules tumorales sont des protéines de longévité qui ne peuvent pas être efficacement absorbées par DC, conduisant à un antigène efficace limité présenté par DC au lymphocyte T. De plus, la protéine de longévité de l'antigène tumoral peut exister pendant longtemps dans la croissance naturelle des cellules tumorales et peut être reconnue par les patients pour sa propre organisation. Par conséquent, la tolérance immunitaire inhibe la réponse immunitaire affectant l'effet de tuer la tumeur. Le polypeptide protéique à molécule unique n'induit qu'une réponse immunitaire spécifique à un seul ou à quelques antigènes tumoraux, et non à l'antigène tumoral mutant, entraînant une fuite de la tumeur. Nous devons développer de nouveaux traitements cellulaires car la thérapie autologue DC / CIK ne peut pas produire de réponse immunitaire efficace, pour fournir un nouveau candidat alternatif pour unir la thérapie par anticorps de point de contrôle à l'avenir.

Récemment, l'équipe du Dr Hu Hong - Ming a proposé une stratégie innovante de traitement du cancer : l'utilisation du rôle de l'autophagie pour capturer l'antigène tumoral pour la préparation d'un vaccin antitumoral. Dans cette stratégie, l'activité bloquante du protéasome des cellules tumorales cultivées in vitro traitées avec le bortézomib (inhibiteurs du protéasome) provoque un enrichissement en protéines à vie courte (SLiP) et en protéines mal repliées (DRiP) dans l'autophagosome, appelé corpuscule DRibbles. Vaccin antitumoral fabriqué à partir de la collecte de ces préparations de corpuscules DRibble, également connu sous le nom de vaccin DRibble.Nos premières études ont suggéré que les vaccins antitumoral DRibble sont plus puissants que le vaccin contre les cellules tumorales, car le vaccin contre les cellules tumorales entières ne contient pas facilement dégradé court- protéines vivantes qui ne peuvent pas être présentées de manière croisée aux CD de manière efficace. Ces protéines à vie courte évitent d'être dégradées par le protéasome dans le vaccin DRibble, et conditionnées dans des vésicules autophagosomes à structure à double membrane. Ces vésicules contiennent des molécules endogènes de signalisation de risque (telles que HSP90, HMGB1, etc.), pouvant déclencher efficacement la réponse immunitaire congénitale. Par conséquent, lors de la co-culture avec une fois le vaccin DRibble, les DC peuvent efficacement ingérer le vaccin DRibble et présenter l'antigène lié à la tumeur à la surface des DC, se combinant avec les molécules du CMH pour activer les cellules T, entraînant la réponse immunitaire. Par rapport au vaccin contre le cancer du poumon entier, les vaccins contre le cancer du poumon DRibble peuvent fournir une gamme plus large d'antigènes associés à la tumeur, ce qui empêche le corps de conserver la tolérance au manque de présentation croisée, ce qui peut provoquer une forte réponse immunitaire. L'équipe du Dr Hu Hong Ming a également découvert que le Dribble allogénique peut induire une réponse immunitaire tout aussi efficace que le vaccin DRibble de cellules tumorales autologues et la régression tumorale, le résultat a été confirmé dans plusieurs modèles de tumeurs. En raison de l'absence de molécules MHC classiques, les protéines du vaccin DRibble peuvent être rapidement dégradées par les DC, et le vaccin DRibble allogénique n'induirait pas d'effets indésirables dus à l'induction d'une réponse immunitaire d'allogreffe, ce qui en reste la sécurité et l'efficacité.

La surface DRibble a un grand nombre de ligands moléculaires cibles de DC, se combinent directement avec des cellules xDC avec une expression CLEC9A élevée sur la surface. Les cellules xDC peuvent croiser efficacement l'antigène présent vers les DC, ce qui peut améliorer l'efficacité de la présentation de l'antigène DRibble. En outre, la réponse immunitaire induite par DRibble a une mémoire immunitaire et identifie une grande variété d'antigènes spécifiques de la tumeur, elle amplifiera la lutte contre la régénération des cellules tumorales et empêchera la tumeur de s'échapper lorsqu'elle est stimulée à nouveau. , la sécurité du DRibble a été entièrement validée par Ⅰ/Ⅱ essais cliniques.

Sur la base de la base de recherche ci-dessus, notre projet a l'intention de mener les recherches suivantes : 1. L'effet curatif et l'influence de la survie globale des patients atteints de NSCLC à un stade avancé après avoir reçu le nouveau vaccin DRibble, et par rapport à l'efficacité de la thérapie DC/CIK existante, 2. Étudier plus avant le mécanisme des effets de la thérapie vaccinale Dribble sur les cellules cancéreuses pulmonaires humaines, analyse du système et évaluer l'effet curatif clinique et la valeur de promotion.

Objets de recherche : cette étude vise à inclure le cancer du poumon non à petites cellules de période ⅢA/ⅢB/Ⅳ sans prostatectomie radicale (environ 60 % du nombre total), les patients ayant reçu 2 à 6 cycles de chimiothérapie, acceptant ou non la radiothérapie et stade de contrôle de la maladie. Les patients sélectionnés ont été divisés au hasard en nouvelle immunothérapie et en groupe de traitement DC/CIK conventionnel.

Calendrier thérapeutique : Cet essai du vaccin DRibble allogénique s'unit au DC/CIK ou au DC/CIK seul pour le traitement du NSCLC de stade IIIA ou B. Deux bras seront étudiés. 30 patients seront randomisés dans les bras 1 et 2.

Arm1 : vaccin DRibble avec DC/CIK (le groupe expérimental) Arm2 : DC/CIK (le groupe de contrôle) Méthodes et procédures

1. Approbation du comité d'éthique de l'hôpital.
2. Recruter les patients appropriés selon les critères d'inclusion et les critères d'exclusion.
3. Signer le consentement éclairé du patient
4. La préparation des vaccins DRibble contre le cancer du poumon
5. Prélèvement d'échantillons sanguins : prélèvement de 10 ml de sang périphérique de patients, séparation des PBMC comme avant le traitement des échantillons de référence.
6. Jour 1 : groupe DRibble guidé par échographie chez les patients présentant des ganglions lymphatiques inguinaux sous le vaccin d'injection DRibble, le groupe contrôle sans injections
7. Jour 8 : prélever 50 ml de sang périphérique et séparer les monocytes et les lymphocytes
8. Intensifier l'amplification des cellules immunitaires (centre de traitement biologique) : en utilisant l'activation des anticorps CD3, l'IL - 2 favorise la prolifération des lymphocytes pour les cellules tueuses ; le GM-CSF induit la différenciation des cellules mononucléaires pour les DC, groupe de traitement immunitaire conjoint à la co-culture du vaccin DRibble avec les cellules DC pour 24h en unité Dribble avec groupe DC/CIK.
9. Identification de cellule immunitaire (laboratoire clinique, centre de traitement biologique) : comptage du nombre de cellules, de l'activité cellulaire, des marqueurs de surface.
10. Détection des cellules immunitaires microbiennes (laboratoire clinique, centre de traitement biologique) : bactéries, mycoplasmes et endotoxines.
11. 20-22 jours : retour des cellules immunitaires aux patients : lavage des cellules au sérum physiologique, retour veineux après suspension, dans un délai de traitement en plusieurs fois.
12. 55 jours : prélever 10 ml de sang périphérique, après la séparation in vitro des PBMC induits aux DC, cocultiver avec DRibble et injection sous-cutanée au 60ème jour.
13. Jour 75 : recueillir 10 ml de sang périphérique, séparer les PBMC et détecter la capacité de réponse immunitaire des lymphocytes T.

Évaluation du système de l'effet thérapeutique et de la valeur de promotion de Dribble : 1. L'évaluation clinique de l'effet curatif : comparer le groupe expérimental et le groupe témoin de la survie sans progression et de la survie globale, dessiner la courbe de survie et analyser statistiquement. 2. évaluer la réponse immunitaire DRibble, en comparant le sang périphérique prélevé pour la première fois avec le sang périphérique traité et l'étape de suivi, la fonction immunitaire détectée des tests principalement inclus ci-dessous : test in vitro niveau de cellules T spécifiques DRibble dans le sang périphérique avant et après le traitement, afin de préciser que l'antigène a produit une réponse immunitaire spécifique ; cultiver les lymphocytes T spécifiques in vitro, effectuer une expérience de reconnaissance et des tumeurs autologues de patients (si elles sont séparées avec succès) et plusieurs souches construites de cellules cancéreuses pulmonaires isolées de patients in vitro, afin de clarifier les lymphocytes T spécifiques générés par le groupe expérimental pourrait reconnaître de nombreux souches de cellules cancéreuses du poumon, signifie que les cellules T spécifiques DRibble allogéniques peuvent répondre aux cellules tumorales de différents patients. 3. Indices d'évaluation de la sécurité : réaction indésirable (rougeur et gonflement, douleur, éruptions cutanées, démangeaisons, etc. Réactions allergiques) ; l'indice de test sanguin est conforme à la norme (fonction sanguine, hépatique et rénale de routine, électrolyte, etc.) ; La qualité de vie (Poids et IMC, taux de protéines sanguines, degré de force physique, évaluation psychologique, émotionnelle, etc.).