Behandlingen af ​​avanceret lungekræft med dribblingsantigen ved at målrette aktivering af T-celler

Ondartet tumor er blevet den førende dødsårsag hos mennesker, og den største dræber i ondartet tumor er lungekræft. Intensivering af miljøforurening kommer med stigende forekomst af lungekræft og høj dødelighed, hvad er det værste, at 5-års overlevelsesraten kun er omkring 15 %, hvilket tegner sig for førstepladsen i de ondartede tumorer. Udnyttelse af ny antitumorteknologi og produkter kommer at standse regeringernes og virksomhedernes voksende opmærksomhed på grund af den ueffektive dæmpning af tumortruslen mod folks liv og helbred ved konventionelle tre behandlinger (kirurgi, strålebehandling og kemoterapi). Biologisk og immunterapi blev kåret til et af de ti store gennembrud i 2013 af magasinet Science og betragtet som en ny udviklingsretning for kræftbehandling i det 21. århundrede.

Den eksisterende immunbehandling omfatter hovedsageligt: ​​adoptiv immunterapi, tumorvaccineterapi, immun checkpoint-antistofterapi og anden hjælpeterapi, og den adoptive immunterapi blev undersøgt og udviklet tidligere som den mest modne behandling blandt disse terapier. Den adoptive immunterapi er blevet udført i mange enheder, primært er den autologe DC - CIK-immunterapi, som kaldes dendritiske celler (Dendritiske celler, DC) og Cytokin-inducerede dræberceller (Cytokine-induceret dræber, CIK) immunterapi. Princippet i denne teknologi er: adskillelse af monocytter og lymfocytter af humant perifert blod, derefter ugmenteret og aktiveret af en række forskellige cytokiner in vitro (f.eks. IFN - gamma, IL - 1, IL - 2, anti - CD3 mAb) til en blandet lymfocyt med antigenpræsenterende og bredspektret funktion til at dræbe tumorceller. Den forstærkende aktiverede DC-CIK intravenøs tilbage til patienter, frigivelse af aktive stoffer såsom CIK-celler perforin og kornenzym B til tumorceller efter kombination med tumorcellerne i kroppen, som opløser tumorcellerne. I mellemtiden udskilles en række forskellige af cytokiner, såsom IL - 2, IFN - gamma og TNF alpha, forbedrer kroppens immunfunktion og giver rollen som antitumorfunktion.

Eksisterende litteraturrapport og vores tidligere undersøgelse i biologisk behandlingscenter viste, at god sikkerhed, små bivirkninger og god tolerance for langt de fleste patienter. I helbredende virkning afslører den nuværende rapport, at DC-CIK-teknologi har en god helbredende virkning på leukæmi, lymfom, kræft i æggestokkene, mavekræft osv., bortset fra lungekræft. Det kan på grund af det komplekse lungekræfttumorantigen eller svagt tumorspecifik T-cellerespons. Hvordan man forbedrer effektiviteten af ​​det præsenterede lungekræftantigen og stimulerer stærkere tumorspecifikke T-cellerespons, skal behandles for at forbedre den helbredende effekt af lungekræftimmunterapien.

I de senere år har checkpoint antistofterapi et gennembrud inden for tumorimmunterapi, herunder CTLA-4, PD - 1 og PD - L1. en række kliniske undersøgelser afslørede terapi af PD - 1 og PD - L1 antistof til fremskreden NSCLC, især i lungeplanocellulært karcinom har god behandlingseffekt, og den objektive sygdomsresponsrate opnår 10-23%. Autolog DC/CIK-terapi er blevet udført i vid udstrækning i hjemmet og har en god sikkerhed bevist af mange kliniske praksis. Da manglen på effektivt tumorantigen er der ingen store randomiserede, dobbeltblindede undersøgelser, der bekræfter dens funktion i at forlænge patientens overlevelse og forhindret tumorprogression indtil videre. Nogle hospitaler brugte tumorcellelysis-opløsningen eller enkeltmolekyleproteinpeptid/DC united CIK-teknologi, hvilket betyder at indlæse tumorcellelyse eller enkeltmolekyleproteinpeptid som et tumorantigen til DC forenes med in vitro-induceret CIK på samme tid. til CIK-terapi alene kan enhedsterapien ikke kun skade tumoren uspecifikt, men også få kroppen til at producere tumorspecifik immunrespons. De fleste af tumorantigener indeholdt i tumorcellelyse er dog langtidsprotein, som ikke effektivt kan indtages af DC, hvilket fører til begrænset effektivt antigen præsenteret af DC til T-lymfocyt. Derudover kan tumorantigenets levetidsprotein eksistere i lang tid i den naturlige vækst af tumorceller og kan genkendes af patienterne for sin egen organisation, derfor hæmmer immuntolerance immunresponset, der påvirker effekten af ​​at dræbe tumor. Enkeltmolekyleproteinpolypeptid inducerer kun specifik immunrespons på et enkelt eller få tumorantigen, ikke det muterede tumorantigen, hvilket resulterer i, at tumor undslipper. Vi er nødt til at udvikle nye cellebehandlinger på grund af autolog DC/CIK-terapi kan ikke producere effektiv immunrespons, for at give en ny aiternativ kandidat til at forene checkpoint-antistofterapi i fremtiden.

For nylig fremlagde Dr Hu Hong - Mings team en innovativ kræftbehandlingsstrategi: brug af autofagi-rolle til at fange tumorantigen til fremstilling af tumorvaccine. I denne strategi forårsager den blokerende proteasomaktivitet af in vitro-dyrkede tumorceller behandlet med Bortezomib (proteasomhæmmere) berigelse af kortlivede proteiner (SLiP'er) og fejlfoldede proteiner (DRiP'er) i autophagosom, kaldet DRibbles corpuscle. Tumorvaccine fremstillet ved at indsamle disse DRibbles-legemepræparater som også kendt som DRibble-vaccinen. Vores tidlige undersøgelser har antydet, at DRibble-tumorvaccinerne er stærkere end tumorcellevaccinen, fordi hele tumorcellevaccinen ikke indeholder let nedbrydelige kort- levede proteiner, som ikke kan krydspræsenteres for DC effektivt. Disse kortlivede proteiner undgår at blive nedbrudt af proteasomet i DRibble-vaccinen og pakket ind i autophagosom-vesikler med dobbeltmembranstruktur. Disse vesikler indeholder endogene risikosignalmolekyler (såsom HSP90, HMGB1 osv.), kan effektivt udløse det medfødte immunrespons. Derfor, når der dyrkes sammen med én gang DRibble-vaccine, kan DC effektivt indtage DRibble-vaccine og præsentere tumorrelateret antigen til DC-overfladen, kombineret med MHC-molekyler for at aktivere T-celler, hvilket resulterer i immunresponset. Sammenlignet med hel lungekræftvaccine kan DRibble lungekræftvacciner give et bredere udvalg af tumorassocierede antigener, få kroppen til ikke længere at holde tolerancen for manglende krydsning, hvilket kan forårsage stærk immunrespons. Dr. Hu Hong Mings team har også fundet ud af, at allogen Dribble kan inducere lige så effektiv immunrespons sammenlignet med autologe tumorceller DRibble-vaccine og tumorregression, resultatet er blevet bekræftet i flere tumormodeller. På grund af manglen på klassiske MHC-molekyler kan DRibble-vaccineproteiner hurtigt nedbrydes af DC, og allogen DRibble-vaccine vil ikke fremkalde uønskede virkninger på grund af induktionen af ​​allograft-immunrespons, hvilket forbliver dets sikkerhed og effektivitet.

DRibble-overfladen har et stort antal målmolekylære ligander af DC, direkte kombineret med xDC-celler med høj ekspression CLEC9A på overfladen. xDC-celler kan effektivt krydse præsenteret antigen til DC og kan således forbedre effektiviteten af ​​at præsentere DRibble-antigen. Desuden har immunrespons induceret af DRibble immunhukommelse og identificerer en bred vifte af tumorspecifikke antigener, det vil forstærke palying mod tumorcellers regenerering og forhindre tumorudslip, når det stimuleres igen. Af Providence cancercentre i USA i næsten 10 års forskning , sikkerheden af ​​DRibble er blevet fuldt valideret af Ⅰ/Ⅱ kliniske forsøg.

Med udgangspunkt i ovenstående forskningsgrundlag har vores projekt til hensigt at udføre følgende forskning: 1. Den helbredende effekt og indflydelsen af ​​den samlede overlevelse af NSCLC-patienter i det sene stadie efter modtagelse af ny DRibble-vaccine, og sammenlignet med den eksisterende DC/CIK-terapieffektivitet, 2. Undersøg yderligere mekanismen for Dribble-vaccinebehandlings virkninger på humane lungekræftceller, systemanalyse og evaluere den klinisk helbredende effekt og fremmeværdi.

Forskningsobjekter: denne undersøgelse har til hensigt at inkludere ⅢA/ⅢB/Ⅳ periode ikke-småcellet lungekræft uden radikal prostatektomi (ca. 60 % af det samlede antal), patienter, der modtog 2-6 kemoterapiforløb, accepterer eller ikke accepterer strålebehandling og sygdomsbekæmpelsesstadiet. Udvalgte patienter blev tilfældigt opdelt i ny immunterapi og konventionel DC/CIK-behandlingsgruppe.

Terapeutisk tidsplan: Dette forsøg med allogen DRibble-vaccine kombineres med DC/CIK eller DC/CIK alene til behandling af trin IIIA eller B NSCLC. To arme vil blive studeret. 30 patienter vil blive randomiseret til arm 1 og 2.

Arm1: Dribble vaccine med DC/CIK(Forsøgsgruppen) Arm2: DC/CIK(Kontrolgruppen) Metoder og procedurer

1. Godkendelse af hospitalets etiske udvalg.
2. Rekruttering af de relevante patienter i henhold til inklusionskriterierne og eksklusionskriterierne.
3. Underskriv patienternes informerede samtykke
4. Fremstilling af DRibble lungekræftvacciner
5. Indsamling af blodprøver: Opsaml 10 ml perifert blod fra patienterne, separat PBMC som før behandlingsreferenceprøver.
6. Dag 1: DRibble-gruppe styret af ultralyd hos patienter med lyskelymfeknuder under vaccinen med inject DRibble, kontrolgruppen ingen injektioner
7. Dag 8: Saml 50 ml perifert blod og adskil monocytter og lymfocytter
8. Intensiver immuncellers amplifikation (biologisk behandlingscenter): ved hjælp af CD3-antistofaktivering fremmer IL-2 lymfocytproliferation for de dræbende celler; GM-CSF inducerer mononukleære cellers differentiering for DC, fælles immunbehandlingsgruppe til DRibble vaccine co-kultur med DC-celler for 24 timer i Dribble enhed med DC/CIK gruppe.
9. Identifikation af immunceller (klinisk laboratorium, biologisk behandlingscenter): optælling af celleantal, celleaktivitet, overflademarkørerne.
10. Påvisning af immunceller mikrobielle (klinisk laboratorium, biologisk behandlingscenter): bakterier, mycoplasma og endotoksin.
11. 20-22 dage: immunceller tilbage til patienter: fysiologiske saltvandsvaskeceller, venøs tilbagevenden efter suspension, inden for en behandlingsperiode med flere gange.
12. 55 dage: opsaml 10 ml perifert blod, efter adskillelse af PBMC in vitro induceret til DC, samdyrk med DRibble og subkutan injektion på 60. dag.
13. Dag 75: Saml 10 ml perifert blod, adskil PBMC og påvis T-celle immunresponsevne.

Systemevaluering den terapeutiske effekt og fremme værdien af ​​Dribble: 1.Den kliniske evaluering af helbredende effekt: sammenligning af den eksperimentelle gruppe og kontrolgruppe af progressionsfri overlevelse og samlet overlevelse, tegning af overlevelseskurve og statistisk analyseret. 2. Evaluering af DRibble-immunrespons, sammenligning af første gang indsamlet perifert blod med det behandlede perifere blod og opfølgningsstadium, immunfunktion detekteret af test hovedsageligt inkluderet nedenfor: in vitro-testniveau af DRibble-specifikke T-celler i det perifere blod før og efter behandlingen for at tydeliggøre det antigen, der produceres specifikt immunrespons; dyrkning af de specifikke T-celler in vitro, udførelse af genkendelseseksperiment og patienters autologe tumor (hvis vellykket adskilt) og flere opbyggede stammer lungekræftceller isoleret fra patienter in vitro, for at gøre det klart, at de specifikke T-celler genereret af forsøgsgruppen kunne genkende mange stammer af lungekræftceller betyder, at allogene DRibble-specifikke T-celler kan reagere på forskellige patients tumorceller. 3. Sikkerhedsvurderingsindekser: bivirkning (rødme og hævelse, smerte, hududslæt, kløe osv. Allergiske reaktioner); Blodprøveindekset er i overensstemmelse med standarden (Rutinemæssigt blod-, lever- og nyrefunktion, elektrolyt osv.); Livskvaliteten (vægt og BMI, blodproteinniveau, fysisk styrkegrad, psykologisk, følelsesmæssig evaluering osv.).