Behandlingen av avancerad lungcancer med dribblingsantigen genom att rikta aktivering av T-celler

Maligna tumörer har blivit den vanligaste dödsorsaken hos människor, och den största dödsorsaken i maligna tumörer är lungcancer. Intensifierande miljöföroreningar kommer med stigande incidens av lungcancer och den höga dödligheten, vad är det värsta att 5-års överlevnadsgraden bara är cirka 15%, vilket står för första platsen i de maligna tumörerna, utnyttjande av ny antitumörteknologi och produkter kommer att stoppa den växande uppmärksamheten från regeringar och företag på grund av den ineffektiva begränsningen av tumörhotet mot människors liv och hälsa med konventionella tre behandlingar (kirurgi, strålbehandling och kemoterapi). Biologisk och immunterapi röstades fram till ett av de tio stora genombrottet 2013 av tidskriften Science, och betraktades som en ny utvecklingsriktning för cancerbehandling under 2000-talet.

Den befintliga immunbehandlingen omfattar huvudsakligen: adoptiv immunterapi, tumörvaccinterapi, immunkontrollpunkt-antikroppsterapi och annan hjälpterapi, och den adoptiva immunterapin har forskats fram och utvecklats tidigare som den mest mogna behandlingen bland dessa terapier. Den adoptiva immunterapin har utförts på många enheter, främst den autologa DC - CIK-immunterapin, som kallas immunterapi för dendritiska celler (Dendritiska celler, DC) och cytokininducerade mördarceller (Cytokine Induced Killer, CIK). Principen för denna teknologi är: separering av monocyter och lymfocyter från mänskligt perifert blod, förstärkt och aktiverat av en mängd olika cytokiner in vitro (t.ex. IFN - gamma, IL - 1, IL - 2, anti - CD3 mAb) till en blandad lymfocyt med antigenpresenterande och bredspektrumfunktion för att döda tumörceller. Den förstärkande aktiverade DC-CIK intravenöst tillbaka till patienterna, frigöring av aktiva substanser såsom CIK-celler perforin och spannmålsenzym B till tumörceller efter kombination med tumörcellerna i kroppen, vilket löser upp tumörcellerna. Samtidigt utsöndras en mängd olika av cytokiner, såsom IL - 2, IFN - gamma och TNF alfa, förbättrar kroppens immunförsvar och ger rollen som antitumörfunktion.

Befintlig litteraturrapport och vår tidigare studie i biologiska behandlingscenter visade att god säkerhet, små biverkningar och god tolerans för de allra flesta patienter. I botande effekt avslöjar den aktuella rapporten att DC-CIK-teknologi har en bra botande effekt på leukemi, lymfom, äggstockscancer, magcancer, etc., förutom lungcancer. Det kan på grund av det komplexa lungcancertumörantigenet, eller svagt tumörspecifikt T-cellssvar. Hur man kan förbättra effektiviteten av det presenterade lungcancerantigenet och stimulera starkare tumörspecifikt T-cellssvar måste tas upp för att förbättra den botande effekten av lungcancerimmunterapin.

Under de senaste åren har antikroppsbehandling med checkpoint ett genombrott inom tumörimmunterapi, inklusive CTLA-4, PD - 1 och PD - L1. ett antal kliniska studier avslöjade terapi av PD - 1 och PD - L1 antikroppar för avancerad NSCLC, särskilt vid skivepitelcancer i lungor har god behandlingseffekt, och den objektiva sjukdomsresponsen uppnår 10-23%. Autolog DC/CIK-terapi har utförts i stor utsträckning i hemmet och har en god säkerhet som bevisats av många kliniska praxis. Eftersom bristen på effektivt tumörantigen finns det inga stora randomiserade, dubbelblinda studier som bekräftar dess funktion för att förlänga patienternas överlevnad och förhindrat tumörprogression hittills. Vissa sjukhus använde tumörcellslyslösningen eller singelmolekylproteinpeptid/DC united CIK-teknologi, vilket innebär att ladda tumörcellslys eller singelmolekylproteinpeptid som ett tumörantigen för att DC förenas med in vitro-inducerad CIK samtidigt. för enbart CIK-terapi kan enhetsterapin inte bara ospecifikt skada tumören, utan också få kroppen att producera tumörspecifikt immunsvar. De flesta tumörantigener som ingår i tumörcellslys är dock livslängdsprotein som inte kan intas effektivt av DC, vilket leder till begränsat effektivt antigen som presenteras av DC till T-lymfocyt. Dessutom kan tumörantigenets livslängdsprotein existera under lång tid i den naturliga tillväxten av tumörceller och kan kännas igen av patienterna för sin egen organisation, därför hämmar immuntolerans immunsvaret som påverkar effekten av att döda tumören. Enkelmolekylproteinpolypeptid inducerar endast ett specifikt immunsvar mot ett enda eller ett fåtal tumörantigen, inte det muterade tumörantigenet, vilket resulterar i att tumören rymmer. Vi behöver utveckla nya cellbehandlingar eftersom autolog DC/CIK-terapi inte kan ge ett effektivt immunsvar, för att tillhandahålla en ny aiternativ kandidat för att förena checkpoint-antikroppsterapi i framtiden.

Nyligen lade Dr Hu Hong - Mings team fram en innovativ cancerbehandlingsstrategi: användning av autofagirollen för att fånga tumörantigen för beredning av tumörvaccin. I denna strategi orsakar den blockerande proteasomaktiviteten hos in vitro-odlade tumörceller som hanteras med Bortezomib (proteasomhämmare) anrikning av kortlivade proteiner (SLiPs) och felveckade proteiner (DRiPs) i autofagosomen, kallad DRibbles corpuscle. Tumörvaccin framställt från insamling av dessa DRibbles-kroppspreparat som, även känt som DRibble-vaccinet. Våra tidiga studier har föreslagit att DRibble-tumörvaccinerna är mer kraftfulla än tumörcellsvaccinet, eftersom hela tumörcellsvaccinet inte innehåller lättnedbrytbara kort- levde proteiner som inte kan korsvisas till DC effektivt. Dessa kortlivade proteiner undviker att brytas ned av proteasomen i DRibble-vaccinet och förpackas i autofagosomvesiklar med dubbelmembranstruktur. Dessa vesiklar innehåller endogena risksignalmolekyler (såsom HSP90, HMGB1, etc.), kan effektivt utlösa det medfödda immunsvaret. Därför, vid samodling med en gång DRibble-vaccin, kan DC effektivt inta DRibble-vaccin och presentera tumörrelaterat antigen till DC-ytan, kombinerat med MHC-molekyler för att aktivera T-celler, vilket resulterar i immunsvaret. Jämfört med hel lungcancervaccin kan DRibble lungcancervacciner ge ett bredare spektrum av tumörassocierade antigener, göra att kroppen inte längre håller toleransen för brist på korsning, vilket kan orsaka starkt immunsvar. Dr Hu Hong Mings team har också funnit att allogen Dribble kan inducera ett lika effektivt immunsvar jämfört med autologa tumörceller DRibble-vaccin och tumörregression, resultatet har bekräftats i flera tumörmodeller. På grund av avsaknaden av klassiska MHC-molekyler kan DRibble-vaccinproteiner snabbt nedbrytas av DC, och allogent DRibble-vaccin skulle inte inducera negativa effekter på grund av induktionen av allotransplantatimmunsvar, vilket förblir dess säkerhet och effektivitet.

Dribble yta har ett stort antal målmolekylära ligander av DC, kombineras direkt med xDC-celler med högt uttryck CLEC9A på ytan. xDC-celler kan effektivt korsa närvarande antigen till DC, vilket kan förbättra effektiviteten av att presentera DRibble-antigen. Dessutom har immunsvar som induceras av DRibble immunminne och identifierar en mängd olika tumörspecifika antigener, det kommer att förstärka palying mot tumörcellers regenerering och förhindra tumörflykt när den stimuleras igen. Av Providence cancercenter i USA för nästan 10 års forskning , säkerheten för DRibble har validerats helt av Ⅰ/Ⅱ kliniska prövningar.

Baserat på ovanstående forskningsgrund, avser vårt projekt att genomföra följande forskning: 1. Den botande effekten och påverkan av den totala överlevnaden av patienter med NSCLC i sent skede efter att ha fått nytt DRibble-vaccin, och jämfört med den befintliga DC/CIK-terapieffekten, 2. Studera vidare mekanismen för effekterna av Dribble-vaccinets terapi på mänskliga lungcancerceller, systemanalys och utvärdera den kliniskt botande effekten och främjandets värde.

Forskningsobjekt: denna studie avser att inkludera ⅢA/ⅢB/Ⅳ period icke-småcellig lungcancer utan radikal prostatektomi (cirka 60 % av det totala antalet), patienter som fått 2-6 kurer med kemoterapi, accepterar eller inte accepterar strålbehandling och sjukdomskontrollstadiet. Utvalda patienter delades slumpmässigt in i ny immunterapi och konventionell DC/CIK-behandlingsgrupp.

Terapeutiskt schema: Denna prövning av allogent DRibble-vaccin kombineras med DC/CIK eller DC/CIK enbart för behandling av steg IIIA eller B NSCLC. Två armar kommer att studeras. 30 patienter kommer att randomiseras till arm 1 och 2.

Arm1: DRibble-vaccin med DC/CIK(Experimentgruppen) Arm2: DC/CIK(Kontrollgruppen) Metoder och procedurer

1. Sjukhusetiska kommitténs godkännande.
2. Rekrytering av lämpliga patienter enligt inklusionskriterierna och uteslutningskriterierna.
3. Skriv under patienternas informerade samtycke
4. Framställning av DRibble-lungcancervacciner
5. Insamling av blodprover: Samla upp 10 ml perifert blod från patienter, separera PBMC som före behandlingens referensprov.
6. Dag 1: DRibble-grupp guidad av ultraljud hos patienter med inguinala lymfkörtlar under vaccinet av inject DRibble, kontrollgruppen inga injektioner
7. Dag 8: Samla 50 ml perifert blod och separera monocyter och lymfocyter
8. Intensivera amplifiering av immunceller (biologiskt behandlingscenter): med aktivering av CD3-antikroppar främjar IL-2 lymfocytproliferation för de dödande cellerna; GM-CSF inducerar mononukleära celldifferentiering för DC, gemensam immunbehandlingsgrupp för att DRibble vaccinsamodling med DC-celler för 24h i Dribble-enhet med DC/CIK-grupp.
9. Identifiering av immunceller (kliniskt laboratorium, biologiskt behandlingscenter): räkning av cellantal, cellaktivitet, ytmarkörerna.
10. Detektion av immunceller mikrobiella (kliniskt laboratorium, biologiskt behandlingscenter): bakterier, mykoplasma och endotoxin.
11. 20-22 dagar: immunceller tillbaka till patienterna: fysiologiska saltlösningstvättceller, venös återgång efter suspension, inom en behandlingsperiod med flera gånger.
12. 55 dagar: Samla upp 10 ml perifert blod, efter separationen av PBMC in vitro inducerad till DC, samodlade med DRibble och subkutan injektion på 60:e dagen.
13. Dag 75: samla in 10 ml perifert blod, separera PBMC och detektera T-cells immunsvarsförmåga.

System utvärdering den terapeutiska effekten och främjande värdet av Dribble: 1.Den kliniska utvärderingen av botande effekt: jämföra den experimentella gruppen och kontrollgruppen av progressionsfri överlevnad och total överlevnad, ritning överlevnadskurva, och statistiskt analyserad. 2. utvärdera DRibble-immunsvaret, jämföra första gången insamlat perifert blod med det behandlade perifera blodet och uppföljningsstadiet, immunfunktion upptäckt av tester huvudsakligen inkluderat nedan: in vitro-testnivå av DRibble-specifika T-celler i det perifera blodet före och efter behandlingen, för att klargöra det antigen som produceras specifikt immunsvar; odla de specifika T-cellerna in vitro, utföra igenkänningsexperiment och patientens autologa tumör (om framgångsrik separerad) och multipla byggda stammar lungcancerceller isolerade från patienter in vitro, för att klargöra de specifika T-cellerna som genereras av experimentgruppen skulle kunna känna igen många stammar av lungcancerceller betyder att allogena DRibble-specifika T-celler kan svara på olika patients tumörceller. 3. Säkerhetsutvärderingsindex: biverkningar (rodnad och svullnad, smärta, hudutslag, klåda, etc. Allergiska reaktioner); Blodprovsindexet är i enlighet med standarden (rutinmässigt blod, lever och njurfunktion, elektrolyt, etc); Livskvalitet (Vikt och BMI, blodproteinnivå, fysisk styrka, psykologisk, emotionell utvärdering, etc).