Acides gras oméga-3 et supplémentation quotidienne en aspirine à faible dose dans le traitement chirurgical pour traiter la parodontite agressive

L'étude est conçue comme un essai clinique prospectif, interventionnel, parallèle, en aveugle, randomisé, contrôlé de supériorité, avec un suivi de 6 mois. La méthodologie de la présente étude suivra les normes CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher et al., 2010) et SPIRIT 2013 (Chan et al., 2013) pour les essais cliniques randomisés.

Source des données La population sera composée de patients diagnostiqués avec une parodontite agressive généralisée (GAgP) recrutés à l'Institut des sciences et technologies - Unesp, à São José dos Campos / SP, qui ont déjà subi un traitement parodontal non chirurgical et qui ont encore des poches avec profondeur de sondage ≥ 5 mm et saignement sur la sonde.

Taille de l'échantillon Le calcul de la taille de l'échantillon a été effectué à l'aide du logiciel Sealed EnvelopeTM. Pour cette étude, une population de 34 patients sera incluse. Considérant α = 5% et β = 5% (puissance de 95%) pour détecter un changement d'au moins 1 mm du niveau d'attache clinique entre les groupes, à un écart type de 0,8 mm, 17 patients seront nécessaires dans chaque groupe

Paramètres cliniques Tous les paramètres cliniques seront évalués par un seul examinateur en aveugle, formé et calibré (CFA) avant le traitement chirurgical (ligne de base) et à 3 et 6 mois après l'utilisation d'une sonde manuelle. Les mesures seront effectuées sur six sites par dent (mésiobuccal, buccal, disto-buccal, distolingual, lingual et mésiolingual) sur toutes les dents, à l'exception des troisièmes molaires.

Les paramètres cliniques suivants seront évalués : 1) Indice de plaque buccale complète (IP) ; 2) Saignement au sondage (BoP); 3) Profondeur de sondage (PD) : distance entre le bas du sulcus/poche et la marge gingivale ; 4) Récession gingivale (GR) : distance entre le bord gingival libre et la jonction ciment-émail (CEJ) ; 5) Niveau d'attache clinique (CAL) : distance entre le bas du sulcus/poche et le CEJ. Le CEJ sera identifié par une sonde minutieuse sur la région cervicale.

Étalonnage et randomisation Dans un premier temps, dix patients atteints de GAgP seront sélectionnés. L'examinateur désigné (CFA) mesurera CAL et PD chez tous les patients deux fois dans les 24 heures, avec un intervalle ≥ 1 heure entre les examens. Ensuite, les mesures seront soumises à un test de corrélation intraclasse et l'examinateur sera jugé calibré s'il atteint 90 % d'accord.

Les patients seront répartis en deux groupes selon une liste générée par ordinateur. L'attribution sera mise en œuvre par un investigateur (NC) qui n'a pas été directement impliqué dans les procédures d'examen ou de traitement.

Sélection de sites avec des poches résiduelles

Après la réévaluation, une poche parodontale résiduelle avec une profondeur de sondage ≥5 mm et un saignement à la sonde sera sélectionnée d'un site non situé dans la région de la furcation, par hasard, pour recevoir l'un des traitements suivants :

• Groupe témoin (GC) : accès chirurgical pour détartrage et surfaçage radiculaire + pilules placebo (n = 17) ;
• Groupe test (TG) : accès chirurgical pour détartrage et surfaçage radiculaire associé à une supplémentation quotidienne de 3 g d'oméga-3 et 100 mg d'acide acétylsalicylique pendant 180 jours (n = 17).

Traitement

Une heure avant le traitement chirurgical, les patients recevront une dose unique de dexaméthasone 4 mg. L'emballage des produits sera livré selon la thérapie indiquée dans la randomisation. L'administration commencera immédiatement avant le traitement chirurgical, qui sera effectué par un seul opérateur (AC), suivant la séquence :

1. 10 mL de solution de digluconate de chlorhexidine à 0,1% (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda - Osasco - SP) seront fournis à mâcher par le patient pendant 1 minute pour une désinfection intra-orale ;
2. Antisepsie de la région péribuccale avec une gaze stérile imbibée d'une solution de digluconate de chlorhexidine à 0,2 % ;
3. Le patient recevra une anesthésie locale injectable avec de la mépivacaïne 2% avec épinéphrine 1: 100 000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) par une technique d'infiltration ;
4. L'accès chirurgical sera réalisé par la technique chirurgicale modifiée de Kirkland (Kirland, 1931). Avec une lame 15c, des incisions intrasulculaires seront pratiquées jusqu'au fond de la poche/sillon sur les surfaces buccales, linguales et interproximales. Les incisions s'étendront dans les directions mésiale et distale de la dent affectée. Le tissu gingival sera détaché de l'os pour permettre l'exposition de la surface radiculaire qui sera soigneusement détartrée et lissée avec des curettes parodontales après élimination de tout le tissu de granulation. Après une irrigation abondante avec une solution saline, le lambeau sera repositionné et maintenu par des sutures interproximales avec du fil de soie Ethicon ® 4-0 (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos - SP).

Les patients postopératoires recevront les recommandations postopératoires suivantes : ne buvez pas de boissons alcoolisées ; ne touchez pas la plaie chirurgicale; Ne brossez pas et n'utilisez pas de fil dentaire pendant 7 jours ; Ingérer uniquement des liquides froids (crème glacée, yaourt, jus et gélatine) dans les 24 premières heures ; Bain de bouche au digluconate de chlorhexidine 0,12% (Periogard®) toutes les 12 heures pendant 14 jours. Dipyrone sodique 500 mg toutes les 4 heures sera prescrit en cas de douleur. Les sutures seront retirées après 7 jours de chirurgie.

Évaluation microbiologique Des échantillons microbiologiques sous-gingivaux seront prélevés au départ, 3 et 6 mois après le traitement. Le site sera isolé avec un rouleau de coton stérile et le biofilm supragingival sera soigneusement retiré avec des curettes parodontales et un papier stérile sera inséré dans la poche parodontale pendant 30 s (Hartoth et al., 1999). L'échantillon sera conservé dans des microtubes stériles. Les échantillons seront ensuite lyophilisés et envoyés au Département de parodontologie de l'Université de Floride, où les échantillons seront analysés.

Évaluation des cytokines Pour l'analyse des modifications immunologiques, le liquide gingival créviculaire (CGF) sera prélevé au départ, 3 et 6 mois après le traitement. Chaque site sera isolé avec un rouleau de coton stérile et le biofilm supragingival sera retiré. Après cela, le CGF sera collecté avec des bandes Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), insérées dans la poche pendant 15 secondes. Le volume de fluide collecté sera mesuré (Periotron 8000, Oraflow). Les bandelettes Periopaper seront conservées dans un tube stérile contenant 300μl de solution saline phosphatée (PBS) avec 5% de Tween-20 et conservées au congélateur à -20°C jusqu'au test multiplex. Le niveau des cytokines suivantes sera mesuré dans le CGF : interféron (IFN) -γ, interleukines (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, facteur de nécrose tumorale (TNF) -α, macrophage inflammatoire protéine 1α (MIP1α), protéine chimiotactique des monocytes 1α (MCP-1α). Le kit 10-plex haute sensibilité (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) sera utilisé conformément aux instructions du fabricant et analysé à l'aide de la plateforme MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, USA). Les échantillons seront analysés individuellement (chaque poche séparément) et les concentrations seront calculées à l'aide d'une courbe standard à 5 paramètres dans le programme Xponet (Millipore Corporation). La concentration de chaque marqueur sera donnée en pg/ml. Toutes les analyses des concentrations de cytokines seront effectuées en double.

Analyse statistique Deux analyses seront réalisées : Per Protocol et Intention-to-treat (Moher, 2010 ; Gupta, 2011 ; Day, 2008). Pour chacun d'eux, la moyenne et l'écart type seront calculés dans chacun des paramètres. Les PI, GI, PD, CAL et GR pleine bouche seront soumis au test de Shapiro-Wilk pour évaluer la distribution de ces données, puis soumis au test de variance pour la comparaison intra- et intra-groupe. De plus, le nombre de poches ≥ 5mm, la fréquence de fermeture de ces poches, la réduction moyenne de PS et le gain de CAL de ces poches seront évalués avant et après la thérapie en réalisant des analyses intra- et inter-groupes.

La concentration de chaque cytokine sera analysée par test de variance pour comparaison intra et intergroupe.