Integrazione giornaliera di acidi grassi omega-3 più aspirina a basso dosaggio nella terapia chirurgica per trattare la parodontite aggressiva

Lo studio è concepito come uno studio clinico prospettico, interventistico, parallelo, in cieco, randomizzato, controllato clinico di superiorità, con un follow-up di 6 mesi. La metodologia del presente studio seguirà gli standard di CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher et al., 2010) e SPIRIT 2013 (Chan et al., 2013) per studi clinici randomizzati.

Fonte dei dati La popolazione sarà composta da pazienti con diagnosi di parodontite aggressiva generalizzata (GAgP) reclutati presso l'Istituto di Scienza e Tecnologia - Unesp, a São José dos Campos / SP, che hanno già subito un trattamento parodontale non chirurgico e hanno ancora tasche con profondità di sondaggio ≥5 mm e sanguinamento sulla sonda.

Dimensione del campione Il calcolo della dimensione del campione è stato eseguito utilizzando il software Sealed EnvelopeTM. Per questo studio sarà inclusa una popolazione di 34 pazienti. Considerando α = 5% e β = 5% (potenza del 95%) per rilevare una variazione di almeno 1 mm nel livello di attacco clinico tra i gruppi, fino a una deviazione standard di 0,8 mm, saranno necessari 17 pazienti in ciascun gruppo

Parametri clinici Tutti i parametri clinici saranno valutati da un singolo esaminatore in cieco, addestrato e calibrato (CFA) prima della terapia chirurgica (basale) ea 3 e 6 mesi dopo l'utilizzo di una sonda manuale. Le misurazioni verranno eseguite in sei siti per dente (mesiobuccale, buccale, disto-buccale, distolinguale, linguale e mesiolinguale) in tutti i denti, ad eccezione dei terzi molari.

Verranno valutati i seguenti parametri clinici: 1) Indice di placca a bocca piena (PI); 2) Sanguinamento al sondaggio (BoP); 3) Profondità di sondaggio (PD): distanza dal fondo del solco/tasca al margine gengivale; 4) Recessione gengivale (GR): distanza dal margine gengivale libero alla giunzione cemento-smalto (CEJ); 5) Livello di attacco clinico (CAL): distanza dal fondo del solco/tasca alla CEJ. La CEJ sarà identificata da un'attenta sonda sulla zona cervicale.

Calibrazione e randomizzazione Inizialmente, verranno selezionati dieci pazienti con GAgP. L'esaminatore designato (CFA) misurerà CAL e PD in tutti i pazienti due volte entro 24 ore, con un intervallo di ≥ 1 ora tra gli esami. Quindi, le misure saranno sottoposte a test di correlazione intraclasse e l'esaminatore sarà giudicato calibrato se raggiunge un accordo del 90%.

I pazienti verranno assegnati in due gruppi in base a un elenco generato dal computer. L'assegnazione sarà attuata da un ricercatore (NC) che non è stato direttamente coinvolto nelle procedure di esame o trattamento.

Selezione di siti con tasche residue

Dopo la rivalutazione, una tasca parodontale residua con profondità di sondaggio ≥5 mm e sanguinamento sulla sonda verrà selezionata casualmente da un sito non situato nella regione della biforcazione, per ricevere uno dei seguenti trattamenti:

• Gruppo di controllo (CG): accesso chirurgico per scaling e levigatura radicolare + pillole placebo (n = 17);
• Gruppo test (TG): accesso chirurgico per scaling e levigatura radicolare associato a supplementazione giornaliera di 3 g di omega-3 e 100 mg di acido acetilsalicilico per 180 giorni (n = 17).

Trattamento

Un'ora prima della terapia chirurgica, i pazienti riceveranno una singola dose di desametasone 4 mg. La confezione dei prodotti verrà consegnata secondo la terapia indicata nella randomizzazione. La somministrazione inizierà immediatamente prima del trattamento chirurgico, che sarà eseguito da un unico operatore (CA), seguendo la sequenza:

1. Verranno forniti 10 mL di soluzione di clorexidina digluconato allo 0,1% (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda - Osasco - SP) da masticare al paziente per 1 minuto per la disinfezione intraorale;
2. Antisepsi della regione periorale con garza sterile imbevuta di soluzione di clorexidina digluconato 0,2%;
3. Il paziente riceverà anestesia locale iniettabile con mepivacaina 2% con epinefrina 1: 100.000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) attraverso una tecnica infiltrativa;
4. L'accesso chirurgico sarà eseguito con tecnica chirurgica modificata da Kirkland (Kirland, 1931). Con una lama da 15c verranno praticate incisioni intrasulculari sul fondo della tasca/solco sulle superfici buccali, linguali e interprossimali. Le incisioni si estenderanno nelle direzioni mesiale e distale del dente interessato. Il tessuto gengivale verrà staccato dall'osso per consentire l'esposizione della superficie radicolare che verrà accuratamente ridimensionata e spianata con curette parodontali dopo la rimozione di tutto il tessuto di granulazione. Dopo abbondante irrigazione con soluzione fisiologica, il lembo verrà riposizionato e mantenuto mediante suture interprossimali con sutura in seta Ethicon ® 4-0 (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos - SP).

Postoperatorio I pazienti riceveranno le seguenti raccomandazioni postoperatorie: non bere bevande alcoliche; non toccare la ferita chirurgica; Non spazzolare e passare il filo interdentale per 7 giorni; Ingerire solo liquidi freddi (gelato, yogurt, succhi e gelatina) nelle prime 24 ore; Collutorio con clorexidina digluconato allo 0,12% (Periogard®) ogni 12 ore per 14 giorni. Dipirone sodico 500 mg ogni 4 ore sarà prescritto in caso di dolore. Le suture verranno rimosse dopo 7 giorni dall'intervento.

Valutazione microbiologica I campioni microbiologici sottogengivali saranno raccolti al basale, 3 e 6 mesi dopo la terapia. Il sito sarà isolato con un rullo di cotone sterile e il biofilm sopragengivale sarà accuratamente rimosso con curette parodontali e una carta sterile verrà inserita nella tasca parodontale per 30 s (Hartoth et al., 1999). Il campione verrà conservato in microtubi sterili. I campioni verranno quindi liofilizzati e inviati al Dipartimento di Parodontologia dell'Università della Florida, dove verranno analizzati.

Valutazione delle citochine Per l'analisi dei cambiamenti immunologici, il liquido gengivale crevicolare (CGF) sarà raccolto al basale, 3 e 6 mesi dopo il trattamento. Ogni sito sarà isolato con un rullo di cotone sterile e il biofilm sopragengivale sarà rimosso. Successivamente, il CGF verrà raccolto con strisce Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), inserite nella tasca per 15 secondi. Verrà misurato il volume del fluido raccolto (Periotron 8000, Oraflow). Le strisce Periopaper verranno conservate in un tubo sterile contenente 300μl di fosfato salino (PBS) con Tween-20 al 5% e conservate in un congelatore a -20 ° C fino al test multiplex. Il livello delle seguenti citochine sarà misurato nel CGF: interferone (IFN) -γ, interleuchine (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, fattore di necrosi tumorale (TNF) -α, fattore infiammatorio dei macrofagi proteina 1α (MIP1α), proteina chemiotattica monocitica 1α (MCP-1α). Il kit 10-plex ad alta sensibilità (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) sarà utilizzato secondo le istruzioni del produttore e analizzato utilizzando la piattaforma MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, USA). I campioni saranno analizzati individualmente (ogni tasca separatamente) e le concentrazioni saranno calcolate utilizzando una curva standard a 5 parametri nel programma Xponet (Millipore Corporation). La concentrazione di ciascun marcatore sarà data in pg/ml. Tutte le analisi delle concentrazioni di citochine saranno effettuate in duplicato.

Analisi statistica Verranno eseguite due analisi: Per Protocol e Intention-to-treat (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Per ciascuno di essi verrà calcolata la media e la deviazione standard in ciascuno dei parametri. PI, GI, PD, CAL e GR a bocca piena saranno sottoposti al test di Shapiro-Wilk per valutare la distribuzione di questi dati e quindi sottoposti al test della varianza per il confronto sia all'interno che all'interno del gruppo. Inoltre, il numero di tasche ≥ 5 mm, la frequenza di chiusura di queste tasche, la riduzione media di PS e l'aumento di CAL di queste tasche saranno valutati prima e dopo la terapia eseguendo analisi intra e intergruppo.

La concentrazione di ciascuna citochina sarà analizzata mediante test della varianza per il confronto intra e intergruppo.