Tägliche Nahrungsergänzung mit Omega-3-Fettsäuren plus niedrig dosiertem Aspirin in der chirurgischen Therapie zur Behandlung von aggressiver Parodontitis

Die Studie ist als prospektive, interventionelle, parallele, verblindete, randomisierte, kontrollierte klinische Überlegenheitsstudie mit einer 6-monatigen Nachbeobachtung konzipiert. Die Methodik der vorliegenden Studie folgt den Standards von CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher et al., 2010) und SPIRIT 2013 (Chan et al., 2013) für randomisierte klinische Studien.

Datenquelle Die Population besteht aus Patienten mit diagnostizierter generalisierter aggressiver Parodontitis (GAgP), die am Institute of Science and Technology - Unesp in São José dos Campos / SP rekrutiert wurden, die sich bereits einer nicht-chirurgischen Parodontalbehandlung unterzogen haben und noch Taschen mit haben Sondierungstiefe ≥5 mm und Blutung an der Sonde.

Probengröße Die Berechnung der Probengröße wurde mit der Software Sealed EnvelopeTM durchgeführt. Für diese Studie wird eine Population von 34 Patienten eingeschlossen. Unter Berücksichtigung von α = 5 % und β = 5 % (Potenz von 95 %) zum Nachweis einer Änderung des klinischen Attachmentniveaus von mindestens 1 mm zwischen den Gruppen bis zu einer Standardabweichung von 0,8 mm sind 17 Patienten in jeder Gruppe erforderlich

Klinische Parameter Alle klinischen Parameter werden von einem einzigen verblindeten, geschulten und kalibrierten Untersucher (CFA) vor der chirurgischen Therapie (Baseline) sowie 3 und 6 Monate nach Verwendung einer manuellen Sonde beurteilt. Die Messungen werden an sechs Stellen pro Zahn (mesiobukkale, bukkale, disto-bukkale, distolinguale, linguale und mesiolinguale) bei allen Zähnen außer dritten Molaren durchgeführt.

Die folgenden klinischen Parameter werden bewertet: 1) Full-Mouth-Plaque-Index (PI); 2) Bluten beim Sondieren (BoP); 3) Sondierungstiefe (PD): Abstand vom Boden des Sulcus/der Tasche bis zum Gingivarand; 4) Gingivarezession (GR): Abstand vom freien Zahnfleischsaum bis zur Schmelz-Zement-Grenze (CEJ); 5) Clinical Attachment Level (CAL): Abstand vom Boden des Sulcus/der Tasche zum CEJ. Die CEJ wird durch eine sorgfältige Sonde im zervikalen Bereich identifiziert.

Kalibrierung und Randomisierung Zunächst werden zehn Patienten mit GAgP ausgewählt. Der designierte Untersucher (CFA) misst CAL und PD bei allen Patienten zweimal innerhalb von 24 Stunden, mit einem Intervall von ≥ 1 Stunde zwischen den Untersuchungen. Dann werden die Messungen einem klasseninternen Korrelationstest unterzogen und der Prüfer wird als kalibriert beurteilt, wenn eine Übereinstimmung von 90 % erreicht wird.

Die Patienten werden gemäß einer computergenerierten Liste in zwei Gruppen eingeteilt. Die Zuordnung erfolgt durch einen Prüfarzt (NC), der nicht direkt am Untersuchungs- oder Behandlungsverfahren beteiligt war.

Auswahl von Stellen mit Resttaschen

Nach der Neubewertung wird eine restliche Parodontaltasche mit Sondierungstiefe ≥5 mm und Blutung an der Sonde zufällig an einer Stelle ausgewählt, die sich nicht in der Furkationsregion befindet, um eine der folgenden Behandlungen zu erhalten:

• Kontrollgruppe (CG): chirurgischer Zugang für Scaling und Wurzelglättung + Placebo-Pillen (n = 17);
• Testgruppe (TG): Operativer Zugang zum Scaling und Root Planing verbunden mit täglicher Supplementierung von 3 g Omega-3 und 100 mg Acetylsalicylsäure über 180 Tage (n = 17).

Behandlung

Eine Stunde vor der chirurgischen Therapie erhalten die Patienten eine Einzeldosis Dexamethason 4 mg. Die Verpackung der Produkte wird gemäß der in der Randomisierung angegebenen Therapie geliefert. Die Verabreichung beginnt unmittelbar vor der chirurgischen Behandlung, die von einem einzigen Bediener (CA) durchgeführt wird, und folgt der Reihenfolge:

1. 10 ml 0,1 % Chlorhexidindigluconat-Lösung (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda – Osasco – SP) werden bereitgestellt, damit sie vom Patienten 1 Minute lang zur intraoralen Desinfektion gekaut werden;
2. Antisepsis der Perioralregion mit steriler Gaze, getränkt in Chlorhexidindigluconat-Lösung 0,2 %;
3. Der Patient erhält eine lokale injizierbare Anästhesie mit Mepivacain 2% mit Epinephrin 1: 100.000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) durch eine infiltrative Technik;
4. Der chirurgische Zugang wird mit der von Kirkland modifizierten Operationstechnik (Kirland, 1931) durchgeführt. Mit einer 15c-Klinge werden intrasulkuläre Inzisionen bis zum Boden der Tasche / des Sulcus auf bukkalen, lingualen und interproximalen Oberflächen vorgenommen. Die Schnitte erstrecken sich in die mesiale und distale Richtung des betroffenen Zahns. Das Zahnfleischgewebe wird vom Knochen gelöst, um die Wurzeloberfläche freizulegen, die nach Entfernung des gesamten Granulationsgewebes sorgfältig mit Parodontalküretten geschuppt und geebnet wird. Nach ausgiebiger Spülung mit Kochsalzlösung wird der Lappen reponiert und durch Interproximalnähte mit Ethicon ® 4-0 Seidennaht (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos - SP) gehalten.

Postoperativ Patienten erhalten die folgenden postoperativen Empfehlungen: Trinken Sie keine alkoholischen Getränke; berühren Sie nicht die Operationswunde; Bürsten Sie den Bereich 7 Tage lang nicht und verwenden Sie keine Zahnseide. Nehmen Sie in den ersten 24 Stunden nur kalte Flüssigkeit (Eiscreme, Joghurt, Säfte und Gelatine) zu sich; Mundwasser mit 0,12 % Chlorhexidindigluconat (Periogard®) alle 12 Stunden für 14 Tage. Bei Schmerzen wird Dipyron-Natrium 500 mg alle 4 Stunden verschrieben. Die Nähte werden nach 7 Tagen der Operation entfernt.

Mikrobiologische Bewertung Subgingivale mikrobiologische Proben werden zu Studienbeginn sowie 3 und 6 Monate nach der Therapie entnommen. Die Stelle wird mit einer sterilen Watterolle isoliert und der supragingivale Biofilm wird vorsichtig mit Parodontalküretten entfernt und ein steriles Papier wird für 30 Sekunden in die Parodontaltasche eingeführt (Hartoth et al., 1999). Die Probe wird in sterilen Mikroröhrchen gelagert. Die Proben werden dann lyophilisiert und an die Abteilung für Parodontologie der Universität von Florida geschickt, wo die Proben analysiert werden.

Bewertung von Zytokinen Zur Analyse von immunologischen Veränderungen wird Zahnfleischflüssigkeit aus der Zahnfleischfalte (CGF) zu Studienbeginn sowie 3 und 6 Monate nach der Behandlung entnommen. Jede Stelle wird mit einer sterilen Watterolle isoliert und der supragingivale Biofilm wird entfernt. Danach wird der CGF mit Periopaper-Streifen (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA) gesammelt, die 15 Sekunden lang in die Tasche eingeführt werden. Das Volumen der gesammelten Flüssigkeit wird gemessen (Periotron 8000, Oraflow). Die Periopaper-Streifen werden in einem sterilen Röhrchen mit 300 μl Phosphat-Kochsalzlösung (PBS) mit 5 % Tween-20 gelagert und bis zum Multiplex-Test in einem Gefrierschrank bei -20 °C gelagert. Der Spiegel der folgenden Zytokine wird im CGF gemessen: Interferon (IFN) -γ, Interleukine (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, Tumornekrosefaktor (TNF) -α, entzündliche Makrophagen Protein 1α (MIP1α), 1α Monozyten-chemotaktisches Protein (MCP-1α). Das 10-Plex-High-Sensitivity-Kit (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) wird gemäß den Anweisungen des Herstellers verwendet und unter Verwendung der MAGpixTM-Plattform (MiraiBio, Alameda, CA, USA) analysiert. Die Proben werden einzeln analysiert (jede Tasche separat) und die Konzentrationen werden unter Verwendung einer Standard-5-Parameter-Kurve im Xponet-Programm (Millipore Corporation) berechnet. Die Konzentration jedes Markers wird in pg/ml angegeben. Alle Analysen der Zytokinkonzentrationen werden doppelt durchgeführt.

Statistische Analyse Es werden zwei Analysen durchgeführt: Per Protocol und Intention-to-treat (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Für jeden von ihnen werden Mittelwert und Standardabweichung in jedem der Parameter berechnet. Vollmundige PI, GI, PD, CAL und GR werden dem Shapiro-Wilk-Test unterzogen, um die Verteilung dieser Daten zu bewerten, und dann dem Varianztest sowohl für den Intra- als auch den Intragruppenvergleich unterzogen. Darüber hinaus werden die Anzahl der Taschen ≥ 5 mm, die Häufigkeit des Verschlusses dieser Taschen, die mittlere Reduktion des PS und der Gewinn an CAL dieser Taschen vor und nach der Therapie durch Intra- und Intergruppenanalysen bewertet.

Die Konzentration jedes Zytokins wird durch einen Varianztest für einen Intra- und Intergruppenvergleich analysiert.