Kwasy tłuszczowe omega-3 plus codzienna suplementacja małej dawki aspiryny w terapii chirurgicznej w leczeniu agresywnego zapalenia przyzębia

Badanie zostało zaprojektowane jako prospektywne, interwencyjne, równoległe, zaślepione, randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne o wyższości klinicznej, z 6-miesięczną obserwacją. Metodologia niniejszego badania będzie zgodna ze standardami CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher i in., 2010) oraz SPIRIT 2013 (Chan i in., 2013) dla randomizowanych badań klinicznych.

Źródło danych Populacja będzie się składać z pacjentów ze zdiagnozowanym uogólnionym agresywnym zapaleniem przyzębia (GAgP) rekrutowanych w Instytucie Nauki i Technologii - Unesp w São José dos Campos / SP, którzy przeszli już niechirurgiczne leczenie przyzębia i nadal mają kieszonki z głębokość sondowania ≥5 mm i krwawienie na sondzie.

Wielkość próbki Obliczenie wielkości próbki przeprowadzono przy użyciu oprogramowania Sealed EnvelopeTM. Do tego badania zostanie włączona populacja 34 pacjentów. Biorąc pod uwagę, że α = 5% i β = 5% (moc 95%) do wykrycia zmiany klinicznego poziomu przyczepu o co najmniej 1 mm między grupami, do odchylenia standardowego 0,8 mm, w każdej grupie będzie wymaganych 17 pacjentów

Parametry kliniczne Wszystkie parametry kliniczne będą oceniane przez pojedynczego zaślepionego, przeszkolonego i skalibrowanego egzaminatora (CFA) przed rozpoczęciem leczenia chirurgicznego (linia wyjściowa) oraz po 3 i 6 miesiącach od użycia sondy ręcznej. Pomiary zostaną wykonane w sześciu miejscach na ząb (mezja policzkowa, policzkowa, dystalno-policzkowa, dystalna, językowa i mezjalno-językowa) we wszystkich zębach, z wyjątkiem trzecich zębów trzonowych.

Oceniane będą następujące parametry kliniczne: 1) Wskaźnik płytki nazębnej (PI); 2) Krwawienie podczas sondowania (BoP); 3) Głębokość sondowania (PD): odległość od dna bruzdy/kieszonki do brzegu dziąsła; 4) Recesja dziąsła (GR): odległość od wolnego brzegu dziąsła do połączenia cement-szkliwo (CEJ); 5) Kliniczny poziom przyczepu (CAL): odległość od dna bruzdy/kieszonki do CEJ. CEJ zostanie zidentyfikowany za pomocą dokładnej sondy w okolicy szyjki macicy.

Kalibracja i randomizacja Początkowo zostanie wybranych dziesięciu pacjentów z GAgP. Wyznaczony egzaminator (CFA) dokona pomiaru CAL i PD u wszystkich pacjentów dwukrotnie w ciągu 24 godzin, z przerwą ≥ 1 godziny między badaniami. Następnie miary zostaną poddane testowi korelacji wewnątrzklasowej, a egzaminator zostanie uznany za wykalibrowanego, jeśli osiągnie 90% zgodności.

Pacjenci zostaną przydzieleni do dwóch grup zgodnie z listą wygenerowaną komputerowo. Alokacja zostanie wdrożona przez badacza (NC), który nie był bezpośrednio zaangażowany w procedury badania lub leczenia.

Wybór miejsc z kieszonkami resztkowymi

Po ponownej ocenie z miejsca, które nie znajduje się w okolicy furkacji, przypadkowo zostanie wybrana pozostała kieszonka przyzębna o głębokości zgłębnika ≥5 mm i krwawieniu na sondzie do jednego z następujących zabiegów:

• Grupa kontrolna (CG): dostęp chirurgiczny w celu skalingu i wygładzenia korzeni + tabletki placebo (n = 17);
• Grupa badana (TG): dostęp chirurgiczny do skalingu i wygładzania korzeni związany z codzienną suplementacją 3 g kwasów omega-3 i 100 mg kwasu acetylosalicylowego przez 180 dni (n = 17).

Leczenie

Na godzinę przed zabiegiem chirurgicznym pacjenci otrzymają pojedynczą dawkę 4 mg deksametazonu. Opakowania produktów zostaną dostarczone zgodnie z terapią wskazaną w randomizacji. Podawanie rozpocznie się bezpośrednio przed zabiegiem chirurgicznym, który będzie wykonywany przez jednego operatora (CA), zgodnie z kolejnością:

1. Pacjent otrzyma 10 ml 0,1% roztworu diglukonianu chlorheksydyny (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda - Osasco - SP) do żucia przez 1 minutę w celu dezynfekcji wewnątrzustnej;
2. Antyseptyka okolic ust sterylną gazą nasączoną 0,2% roztworem diglukonianu chlorheksydyny;
3. Pacjent otrzyma znieczulenie miejscowe za pomocą iniekcji mepiwakainą 2% z epinefryną 1:100 000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) techniką infiltracyjną;
4. Dostęp chirurgiczny zostanie wykonany techniką chirurgiczną zmodyfikowaną przez Kirklanda (Kirland, 1931). Za pomocą ostrza 15c wykonuje się nacięcia śródmiąższowe na dnie kieszonki / bruzdy na powierzchni policzkowej, językowej i międzyzębowej. Nacięcia rozciągają się do mezjalnego i dystalnego kierunku dotkniętego zęba. Tkanka dziąsła zostanie oddzielona od kości, aby umożliwić odsłonięcie powierzchni korzenia, która zostanie dokładnie oczyszczona i wygładzona za pomocą kiret periodontologicznych po usunięciu całej tkanki ziarninowej. Po obfitym przepłukaniu roztworem soli, płatek zostanie przeniesiony i utrzymany za pomocą szwów międzyzębowych jedwabnym szwem Ethicon ® 4-0 (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos – SP).

Pacjenci pooperacyjni otrzymają następujące zalecenia pooperacyjne: nie pić napojów alkoholowych; nie dotykać rany chirurgicznej; Nie szczotkuj i nie nitkuj ​​okolicy przez 7 dni; Spożywaj tylko zimne płyny (lody, jogurt, soki i żelatynę) w ciągu pierwszych 24 godzin; Płukanie ust 0,12% diglukonianem chlorheksydyny (Periogard®) co 12 godzin przez 14 dni. Dipyron sodowy w dawce 500 mg co 4 godziny będzie przepisywany w przypadku bólu. Szwy zostaną zdjęte po 7 dniach od zabiegu.

Ocena mikrobiologiczna Próbki mikrobiologiczne poddziąsłowe zostaną pobrane na początku badania, 3 i 6 miesięcy po zakończeniu terapii. Miejsce zostanie odizolowane sterylnym bawełnianym wałkiem, a biofilm naddziąsłowy zostanie ostrożnie usunięty za pomocą kiret periodontologicznych, a sterylna bibułka zostanie umieszczona w kieszonce przyzębnej na 30 sekund (Hartoth i in., 1999). Próbka będzie przechowywana w sterylnych mikroprobówkach. Próbki zostaną następnie liofilizowane i wysłane do Wydziału Periodontologii na Uniwersytecie Florydy, gdzie próbki zostaną przeanalizowane.

Ocena cytokin W celu analizy zmian immunologicznych płyn dziąsłowy dziąseł (CGF) zostanie pobrany na początku badania, 3 i 6 miesięcy po leczeniu. Każde miejsce zostanie odizolowane sterylnym wacikiem i usunięty biofilm naddziąsłowy. Następnie CGF zostanie pobrany za pomocą pasków Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA), włożonych do kieszonki na 15 sekund. Zostanie zmierzona objętość zebranego płynu (Periotron 8000, Oraflow). Paski papieru Perio będą przechowywane w sterylnej probówce zawierającej 300 μl soli fizjologicznej (PBS) z 5% Tween-20 i będą przechowywane w zamrażarce w temperaturze -20°C do czasu testu multipleksowego. W CGF zostanie zmierzony poziom następujących cytokin: interferon (IFN) -γ, interleukiny (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, czynnik martwicy nowotworów (TNF) -α, czynnik zapalny makrofagów białko 1α (MIP1α), białko chemotaktyczne monocytów 1α (MCP-1α). Zestaw 10-plex o wysokiej czułości (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) będzie używany zgodnie z instrukcjami producenta i analizowany przy użyciu platformy MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, USA). Próbki będą analizowane indywidualnie (każda kieszonka z osobna) a stężenia zostaną obliczone przy użyciu standardowej 5-parametrowej krzywej w programie Xponet (Millipore Corporation). Stężenie każdego markera zostanie podane w pg/ml. Wszystkie analizy stężeń cytokin zostaną wykonane w dwóch powtórzeniach.

Analiza statystyczna Przeprowadzone zostaną dwie analizy: zgodnie z protokołem i zgodnie z zamiarem leczenia (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Dla każdego z nich w każdym z parametrów zostanie obliczona średnia i odchylenie standardowe. PI, GI, PD, CAL i GR dla całej jamy ustnej zostaną poddane testowi Shapiro-Wilka w celu oceny rozkładu tych danych, a następnie poddane testowi wariancji w celu porównania wewnątrz- i wewnątrzgrupowego. Ponadto przed i po terapii zostanie oceniona liczba kieszonek ≥ 5mm, częstość zamykania tych kieszonek, średnia redukcja PS i przyrost CAL poprzez wykonanie analiz wewnątrz- i międzygrupowych.

Stężenie każdej cytokiny będzie analizowane za pomocą testu wariancji dla porównania wewnątrz i międzygrupowego.