Omega-3 zsírsavak plusz alacsony dózisú aszpirin napi kiegészítés a sebészeti terápiában az agresszív parodontitis kezelésére

A vizsgálatot prospektív, intervenciós, párhuzamos, vak, randomizált, kontrollált klinikai felsőbbrendűségi klinikai vizsgálatként tervezték, 6 hónapos követéssel. Jelen tanulmány módszertana a CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher et al., 2010) és a SPIRIT 2013 (Chan és mtsai, 2013) standardjait követi a randomizált klinikai vizsgálatokra vonatkozóan.

Az adatok forrása A populációt az Unesp-i Tudományos és Technológiai Intézetben (São José dos Campos / SP) toborzott, generalizált agresszív parodontitiszben (GAgP) diagnosztizált betegek alkotják, akik már átestek nem sebészeti periodontális kezelésen, és még mindig vannak szondázási mélység ≥5 mm és vérzés a szondán.

Mintaméret A mintaméret kiszámítása Sealed EnvelopeTM szoftverrel történt. Ebben a vizsgálatban egy 34 betegből álló populációt vonnak be. Figyelembe véve α = 5% és β = 5% (95%-os teljesítmény) a klinikai kötődési szint legalább 1 mm-es változásának kimutatásához a csoportok között, 0,8 mm-es szórással, minden csoportban 17 betegre lesz szükség.

Klinikai paraméterek Minden klinikai paramétert egyetlen vak, képzett és kalibrált vizsgáló (CFA) értékel a sebészeti terápia előtt (alapvonal), valamint 3 és 6 hónappal a kézi szonda használata után. A méréseket fogonként hat helyen (mesiobukkális, bukkális, disto-bukkális, disztolingvális, lingvális és mesiolinguális) végezzük minden fogban, kivéve a harmadik őrlőfogakat.

A következő klinikai paramétereket értékeljük: 1) Teljes száj plakk index (PI); 2) Vérzés szondázáskor (BoP); 3) szondázási mélység (PD): távolság a barázda/zseb aljától a fogíny széléig; 4) Gingiva recesszió (GR): távolság a szabad fogíny szélétől a cement-zománc csomópontig (CEJ); 5) Klinikai tapadási szint (CAL): távolság a barázda/zseb aljától a CEJ-ig. A CEJ-t a méhnyak területén végzett gondos szondával azonosítják.

Kalibrálás és véletlenszerűsítés Kezdetben tíz GAgP-s beteg kerül kiválasztásra. A kijelölt vizsgáló (CFA) minden betegnél kétszer méri a CAL-t és a PD-t 24 órán belül, a vizsgálatok közötti intervallum ≥ 1 óra. Ezután a méréseket osztályon belüli korrelációs tesztnek vetik alá, és a vizsgáztatót kalibráltnak ítélik, ha 90%-os egyezést ér el.

A betegeket két csoportba osztják a számítógéppel készített lista alapján. Az elosztást olyan vizsgáló (NC) hajtja végre, aki nem vett részt közvetlenül a vizsgálatban vagy a kezelési eljárásokban.

Helyek kiválasztása maradék zsebekkel

Az újraértékelés után véletlenül nem a furkációs régióban található helyről választanak ki egy 5 mm-nél nagyobb szondázási mélységű és szondán vérző maradék periodontális zsebet, hogy az alábbi kezelések egyikét kapják:

• Kontroll csoport (CG): sebészeti hozzáférés a méretezéshez és a gyökérgyaluláshoz + placebo tabletták (n = 17);
• Tesztcsoport (TG): sebészeti hozzáférés pikkelysömörhöz és gyökérgyaluláshoz, 3 g omega-3 és 100 mg acetilszalicilsav napi kiegészítésével 180 napon keresztül (n = 17).

Kezelés

Egy órával a műtéti kezelés előtt a betegek egyszeri 4 mg-os dexametazon adagot kapnak. A termékek csomagolása a randomizációnál megjelölt terápia szerint kerül kiszállításra. A beadás közvetlenül a sebészeti kezelés előtt kezdődik, amelyet egyetlen operátor (CA) végez, a következő sorrendben:

1. 10 ml 0,1%-os klórhexidin-diglükonát oldatot (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda – Osasco – SP) biztosítunk, amelyet a páciens 1 percig rághat az intraorális fertőtlenítéshez;
2. A periorális régió antiszepszise 0,2%-os klórhexidin-diglükonát oldattal átitatott steril gézzel;
3. A páciens helyi injektálható érzéstelenítést kap 2%-os mepivakain és epinefrin 1:100 000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) alkalmazásával infiltrációs technikával;
4. A sebészeti hozzáférést Kirkland módosított sebészeti technikával végzik (Kirland, 1931). A 15c-es pengével intrasulcularis bemetszések készülnek a zseb / barázda alján a bukkális, nyelvi és interproximális felületeken. A bemetszések kiterjednek az érintett fog mesiális és disztális irányába. A fogínyszövetet leválasztják a csontról, hogy láthatóvá váljon a gyökérfelszín, amelyet az összes granulációs szövet eltávolítása után gondosan méreteznek és periodontális küretekkel simítanak. Sóoldattal végzett bőséges öntözés után a fület áthelyezik, és Ethicon ® 4-0 selyemvarrattal (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos – SP) interproximális varratokkal tartják fenn.

A műtét utáni betegek a következő posztoperatív ajánlásokat kapják: ne igyon alkoholos italokat; ne érintse meg a műtéti sebet; 7 napig ne keféljen és ne használjon fogselymet; Az első 24 órában csak hideg folyadékot (fagylaltot, joghurtot, gyümölcsleveket és zselatint) nyeljen le; Szájöblítés 0,12%-os klórhexidin-diglükonáttal (Periogard®) 12 óránként 14 napon keresztül. Fájdalom esetén 500 mg dipiron-nátriumot írnak fel 4 óránként. A varratokat 7 nappal a műtét után eltávolítják.

Mikrobiológiai értékelés A szubgingivális mikrobiológiai mintákat az alapvonalon, a terápia után 3 és 6 hónappal kell gyűjteni. A helyet steril pamuthengerrel izoláljuk, és a szupragingivális biofilmet periodontális küretekkel óvatosan eltávolítjuk, és steril papírt helyezünk a periodontális zsebbe 30 másodpercre (Hartoth és mtsai, 1999). A mintát steril mikrocsövekben tárolják. A mintákat ezután liofilizálják, és a Floridai Egyetem Parodontológiai Tanszékére küldik, ahol a mintákat elemzik.

A citokinek értékelése Az immunológiai elváltozások elemzéséhez a kezelés kezdetén, 3 és 6 hónappal a kezelés után crevicularis gingival folyadékot (CGF) kell gyűjteni. Mindegyik helyet steril pamuthengerrel izoláljuk, és eltávolítjuk a supragingivális biofilmet. Ezt követően a CGF-et a zsebbe helyezett Periopaper csíkokkal (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, USA) gyűjtik össze 15 másodpercre. A rendszer megméri az összegyűjtött folyadék térfogatát (Periotron 8000, Oraflow). A Periopaper csíkokat 300 μl foszfát sóoldatot (PBS) és 5% Tween-20-at tartalmazó steril csőben tároljuk, és a multiplex tesztig -20 °C-on fagyasztóban tároljuk. A következő citokinek szintjét mérik a CGF-ben: interferon (IFN) -γ, interleukinok (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, tumor nekrózis faktor (TNF) -α, gyulladásos makrofág protein 1α (MIP1α), 1α monocita kemotaktikus fehérje (MCP-1α). A 10-plex nagy érzékenységű készletet (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) a gyártó utasításai szerint használjuk, és a MAGpixTM platformon (MiraiBio, Alameda, CA, USA) elemzik. A mintákat egyenként elemezzük (mindegyik zseb külön), és a koncentrációkat az Xponet program (Millipore Corporation) szabványos 5 paraméteres görbéje alapján számítjuk ki. Az egyes markerek koncentrációját pg/ml-ben adjuk meg. A citokinkoncentrációk minden elemzését két párhuzamosban kell elvégezni.

Statisztikai elemzés Két elemzést kell végezni: Protokollonként és Kezelési szándék (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Mindegyik paraméternél kiszámítják az átlagot és a szórást. A teljes szájú PI-t, GI-t, PD-t, CAL-t és GR-t a Shapiro-Wilk tesztnek vetik alá ezen adatok eloszlásának értékelésére, majd varianciatesztnek vetik alá mind a csoporton belüli, mind a csoporton belüli összehasonlításhoz. Ezen túlmenően a terápia előtt és után csoporton belüli és csoporton belüli elemzések elvégzésével értékelni kell a ≥ 5 mm-es zsebek számát, e zsebek bezárásának gyakoriságát, a PS átlagos csökkenését és a CAL növekedését.

Az egyes citokinek koncentrációját varianciateszttel elemezzük a csoporton belüli és a csoportok közötti összehasonlításhoz.