Ácidos grasos omega-3 más suplementos diarios de dosis bajas de aspirina en la terapia quirúrgica para tratar la periodontitis agresiva

El estudio está diseñado como un ensayo clínico prospectivo, intervencionista, paralelo, ciego, aleatorizado, controlado, clínico de superioridad, con un seguimiento de 6 meses. La metodología del presente estudio seguirá los estándares de CONSORT-STATEMENT 2010 (Moher et al., 2010) y SPIRIT 2013 (Chan et al., 2013) para ensayos clínicos aleatorizados.

Fuente de datos La población estará compuesta por pacientes con diagnóstico de periodontitis agresiva generalizada (GAgP) reclutados en el Instituto de Ciencia y Tecnología - Unesp, en São José dos Campos / SP, que ya pasaron por tratamiento periodontal no quirúrgico y todavía tienen bolsas con profundidad de sondaje ≥5 mm y sangrado en la sonda.

Tamaño de la muestra El cálculo del tamaño de la muestra se realizó con el software Sealed EnvelopeTM. Para este estudio se incluirá una población de 34 pacientes. Considerando α = 5% y β = 5% (poder del 95%) para detectar un cambio de al menos 1 mm en el nivel de inserción clínica entre grupos, a una desviación estándar de 0,8 mm, se requerirán 17 pacientes en cada grupo

Parámetros clínicos Todos los parámetros clínicos serán evaluados por un solo examinador cegado, capacitado y calibrado (CFA) antes de la terapia quirúrgica (línea de base) ya los 3 y 6 meses después de usar una sonda manual. Las mediciones se realizarán en seis sitios por diente (mesiovestibular, bucal, distovestibular, distolingual, lingual y mesiolingual) en todos los dientes, excepto los terceros molares.

Se evaluarán los siguientes parámetros clínicos: 1) índice de placa (PI) en toda la boca; 2) Sangrado al sondaje (BoP); 3) Profundidad de sondaje (PD): distancia desde el fondo del surco/bolsa hasta el margen gingival; 4) Recesión gingival (GR): distancia desde el margen gingival libre hasta la unión cemento-esmalte (CEJ); 5) Nivel de inserción clínica (CAL): distancia desde la parte inferior del surco/bolsa hasta la LAC. El CEJ se identificará mediante un sondeo cuidadoso en el área cervical.

Calibración y Aleatorización Inicialmente, se seleccionarán diez pacientes con GAgP. El examinador designado (CFA) medirá CAL y PD en todos los pacientes dos veces en 24 horas, con un intervalo de ≥ 1 hora entre exámenes. Luego, las medidas serán sometidas a la prueba de correlación intraclase y el examinador será juzgado calibrado si alcanza el 90% de concordancia.

Los pacientes serán asignados en dos grupos de acuerdo con una lista generada por computadora. La asignación será implementada por un investigador (NC) que no estuvo directamente involucrado en los procedimientos de examen o tratamiento.

Selección de sitios con bolsas residuales

Después de la reevaluación, una bolsa periodontal residual con profundidad de sondaje ≥5 mm y sangrado al sondaje se seleccionará de un sitio no ubicado en la región de furca, por casualidad, para recibir uno de los siguientes tratamientos:

• Grupo control (GC): acceso quirúrgico para raspado y alisado radicular + pastillas placebo (n = 17);
• Grupo de prueba (GT): acceso quirúrgico para raspado y alisado radicular asociado a la suplementación diaria de 3 g de omega-3 y 100 mg de ácido acetilsalicílico durante 180 días (n = 17).

Tratamiento

Una hora antes de la terapia quirúrgica, los pacientes recibirán una dosis única de dexametasona de 4 mg. Los empaques de los productos serán entregados de acuerdo a la terapia indicada en la aleatorización. La administración comenzará inmediatamente antes del tratamiento quirúrgico, que será realizado por un solo operador (CA), siguiendo la secuencia:

1. Se proporcionarán 10 mL de solución de digluconato de clorhexidina al 0,1% (Periogard®, Colgate Palmolive Ltda - Osasco - SP) para ser masticados por el paciente durante 1 minuto para desinfección intraoral;
2. Antisepsia de la región perioral con gasa estéril empapada en solución de digluconato de clorhexidina al 0,2%;
3. El paciente recibirá anestesia local inyectable con mepivacaína al 2% con epinefrina 1: 100.000 (Mepivacaína®, DFL - Rio de Janeiro / RJ) a través de una técnica infiltrativa;
4. El acceso quirúrgico se realizará mediante la técnica quirúrgica modificada de Kirkland (Kirland, 1931). Con una hoja de 15c, se realizarán incisiones intrasulculares hasta el fondo de la bolsa/surco en las superficies bucal, lingual e interproximal. Las incisiones se extenderán en las direcciones mesial y distal del diente afectado. El tejido gingival se separará del hueso para permitir la exposición de la superficie de la raíz, que se raspará y alisará cuidadosamente con curetas periodontales después de eliminar todo el tejido de granulación. Después de abundante irrigación con solución salina, el colgajo será reposicionado y mantenido mediante suturas interproximales con sutura de seda Ethicon ® 4-0 (Ethicon Johnsons do Brasil SA, São José dos Campos - SP).

Postoperatorio Los pacientes recibirán las siguientes recomendaciones postoperatorias: no ingerir bebidas alcohólicas; no toque la herida quirúrgica; No se cepille ni use hilo dental en el área durante 7 días; Ingerir únicamente líquido frío (helado, yogur, jugos y gelatina) en las primeras 24 horas; Enjuague bucal con digluconato de clorhexidina al 0,12% (Periogard®) cada 12 horas durante 14 días. Se prescribirá dipirona sódica 500 mg cada 4 horas en caso de dolor. Las suturas se retirarán a los 7 días de la cirugía.

Evaluación microbiológica Se recolectarán muestras microbiológicas subgingivales al inicio, 3 y 6 meses después de la terapia. El sitio se aislará con un rodillo de algodón estéril y el biofilm supragingival se eliminará cuidadosamente con curetas periodontales y se insertará un papel estéril en la bolsa periodontal durante 30 s (Hartoth et al., 1999). La muestra se almacenará en microtubos estériles. Luego, las muestras se liofilizarán y se enviarán al Departamento de Periodoncia de la Universidad de Florida, donde se analizarán las muestras.

Evaluación de citoquinas Para el análisis de cambios inmunológicos, se recolectará fluido gingival crevicular (CGF) al inicio, 3 y 6 meses después del tratamiento. Cada sitio se aislará con un rodillo de algodón estéril y se eliminará la biopelícula supragingival. Posteriormente, se recolectará el CGF con tiras de Periopaper (Periopaper, Oraflow, Plainview, NY, EE. UU.), insertadas en el bolsillo durante 15 segundos. Se medirá el volumen de líquido recogido (Periotron 8000, Oraflow). Las tiras de Periopaper se almacenarán en un tubo estéril que contiene 300 μl de solución salina de fosfato (PBS) con Tween-20 al 5% y se almacenarán en un congelador a -20 ° C hasta la prueba multiplex. Se medirá el nivel de las siguientes citoquinas en el CGF: interferón (IFN) -γ, interleucinas (IL) -10, -1β, -4, -6, -8, factor de necrosis tumoral (TNF) -α, macrófago inflamatorio proteína 1α (MIP1α), proteína quimiotáctica de monocitos 1α (MCP-1α). El kit de alta sensibilidad de 10 plex (Millipore Corporation, Billerica, MA, EE. UU.) se utilizará de acuerdo con las instrucciones del fabricante y se analizará utilizando la plataforma MAGpixTM (MiraiBio, Alameda, CA, EE. UU.). Las muestras se analizarán individualmente (cada bolsillo por separado) y las concentraciones se calcularán utilizando una curva estándar de 5 parámetros en el programa Xponet (Millipore Corporation). La concentración de cada marcador se dará en pg/ml. Todos los análisis de las concentraciones de citocinas se realizarán por duplicado.

Análisis estadístico Se realizarán dos análisis: Por protocolo e Intención de tratar (Moher, 2010; Gupta, 2011; Day, 2008). Para cada uno de ellos se calculará la media y la desviación estándar en cada uno de los parámetros. PI, GI, PD, CAL y GR de boca completa se someterán a la prueba de Shapiro-Wilk para evaluar la distribución de estos datos y luego se someterán a la prueba de varianza para la comparación intra e intragrupo. Además, el número de bolsas ≥ 5 mm, la frecuencia de cierre de estas bolsas, la reducción media de PS y la ganancia de CAL de estas bolsas se evaluarán antes y después de la terapia mediante la realización de análisis intra e intergrupo.

La concentración de cada citocina se analizará mediante prueba de varianza para comparación intra e intergrupo.