Galectine-3 chez les patientes atteintes d'endométriose

L'endométriose est une affection gynécologique bénigne aux caractéristiques biologiques malignes et se définit par la présence de glandes endométriales et de stroma en dehors de la cavité utérine. Les cellules endométriales ectopiques peuvent se propager aux organes pelviens tels que le rectum, la vessie et les ovaires. La physiopathologie de l'endométriose est susceptible d'être multifactorielle et d'impliquer une interaction entre plusieurs facteurs. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

Le cycle endométrial et l'implantation sont des processus complexes. Des altérations des niveaux de certaines molécules régulatrices à la surface cellulaire se produisent au cours du cycle de prolifération et de différenciation étroitement contrôlées. La plupart de ces molécules et mécanismes régulateurs n'ont pas encore été étudiés. Cependant, les galectines, une sous-famille de lectines, sont définies pour réguler les fonctions vitales des cellules. (Leffler H. et al Introduction aux galectines. Glycoconj j,2004) Il a été démontré que Gal-3 est exprimé dans de nombreux types de cellules, y compris les cellules endométriales et les cellules trophoblastiques (Riss D, Naude S 2003) . Des études antérieures ont rapporté que Gal-3 est spécifiquement exprimé dans les cellules de l'endomètre dans la phase de sécrétion, dans le tissu placentaire au début de la grossesse et dans la caduque entourant le site d'implantation. Une autre étude a vérifié que Gal-3 joue un rôle important dans le processus d'implantation embryonnaire (Liu YK, Hum Reprod.2009). Le Gal-3 intracellulaire a favorisé la prolifération et l'adhésion dans les cellules endométriales (Yang H, TaylorHS, 2011).

Le système reproducteur féminin est vulnérable aux effets nocifs des espèces réactives de l'oxygène (ROS) qui endommagent les protéines, les lipides et la structure de l'ADN. Le stress oxydatif est un facteur clé de la progression de l'endométriose. De nombreuses théories ont été élaborées jusqu'à présent pour clarifier la pathogenèse de l'endométriose et le stress oxydatif, résultat d'une production accrue de radicaux libres ou de l'épuisement de la défense antioxydante endogène de l'organisme, a été impliqué dans sa pathogenèse.

Notre étude est une étude cas-témoin qui sera réalisée dans un hôpital de santé de la femme et un département de biochimie médicale de l'université d'assiut. Nous allons estimer le niveau tissulaire de galectine-3 dans l'endomètre des femmes en bonne santé et atteintes d'endométriose et détecter si la galectine-3 entraîne ou protège contre l'endométriose. En outre, nous mesurerons le niveau de marqueurs de stress oxydatif dans l'endomètre des femmes en bonne santé et atteintes d'endométriose et étudierons la corrélation entre eux et la galectine chez les femmes atteintes d'endométriose.

La taille de l'échantillon est calculée par le programme informatique Epi Info 2000. Sur la base de la proportion attendue de déficit en galectine-3 parmi les témoins sera de 20 % et son augmentation des cas par quatre (rapport de cotes = 4) avec une puissance de 80 % et un niveau de confiance de 95 %, la taille de l'échantillon calculé est de 45 cas et 45 contrôles (au total 90 femmes).

Les données recueillies comprendront l'âge, la parité, l'historique menstruel, l'historique actuel (y compris les symptômes de douleur, de saignement et d'infertilité), l'historique des médicaments, l'historique des maladies antérieures et toute enquête effectuée. Le but de l'étude sera expliqué à chaque participant avant de remplir la fiche d'étude. Un consentement écrit sera obtenu de ceux qui souhaitent participer à l'étude, puis les femmes seront divisées en 2 groupes.

Groupe 1:

45femmes chez lesquelles on a découvert une endométriose confirmée chirurgicalement et histolopathologiquement. Des échantillons d'endomètre (1-2 grammes) seront prélevés par laparoscopie, qui est l'étalon-or pour le diagnostic définitif de l'endométriose.

Groupe2 :

45 femmes sans endométriose. Ces femmes avaient des cycles menstruels normaux et n'avaient pas reçu d'hormonothérapie dans les 3 mois précédant l'échantillonnage. Des échantillons d'endomètre (1 à 2 grammes) seront prélevés par biopsie au poinçon après l'insertion du DIU.

La galectine-3 sera estimée par le kit ELISA. Des échantillons d'endomètre (1-2 grammes) seront séparés de chaque femme pendant la phase proliférative (jours 5-15) et lavés plusieurs fois avec une solution saline stérile à 0,9 % pour éliminer tout sang des tissus. Les échantillons de tissus seront homogénéisés par un homogénéisateur de tissus à 40 000 tr/min. Les extraits surnageants seront collectés dans des tubes Ependorf et congelés à -80°C jusqu'à analyse par ELISA.

Les niveaux tissulaires de NO et de TBARS (marqueurs de stress oxydatif) ont été déterminés par des méthodes chimiques selon les méthodes décrites par Van Bezooijen et al, (1998), et Buege et Aust (1978) respectivement. De plus, les niveaux tissulaires d'activité de la catalase (CAT), du glutathion (GSH) et de la superoxyde dismutase (SOD) (anti-oxydants) ont été déterminés par des méthodes chimiques selon les méthodes décrites par Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) et Marklund (1985).