Galectina-3 em pacientes com endometriose

A endometriose é uma desordem ginecológica benigna com características biológicas malignas e é definida pela presença de glândulas endometriais e estroma fora da cavidade uterina. As células endometriais ectópicas podem se espalhar para os órgãos pélvicos, como reto, bexiga e ovários. A fisiopatologia da endometriose provavelmente é multifatorial e envolve uma interação entre vários fatores. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

O ciclo endometrial e a implantação são processos complexos. Alterações nos níveis de algumas moléculas reguladoras na superfície celular ocorrem durante o ciclo de proliferação e diferenciação rigidamente controlados. A maioria dessas moléculas e mecanismos reguladores ainda não foi investigada. No entanto, as galectinas, uma subfamília de lectinas, são delineadas para regular as funções celulares vitais. (Leffler H. et al Introdução às galectinas. Glycoconj j,2004) Foi demonstrado que Gal-3 é expresso em muitos tipos de células, incluindo células endometriais e células trofoblásticas (Riss D, Naude S 2003). Estudos anteriores relataram que Gal-3 é expresso especificamente em células endometriais na fase secretora, no tecido placentário durante o início da gravidez e na decídua ao redor do local de implantação. Outro estudo verificou que Gal-3 desempenha um papel importante no processo de implantação embrionária (Liu YK, Hum Reprod.2009). Gal-3 intracelular promoveu proliferação e adesão em células endometriais (Yang H, TaylorHS, 2011).

O sistema reprodutor feminino é vulnerável aos efeitos nocivos das espécies reativas de oxigênio (ROS) que danificam proteínas, lipídios e a estrutura do DNA. O estresse oxidativo é um fator chave para a progressão da endometriose. Muitas teorias foram elaboradas até agora para esclarecer a patogênese da endometriose e o estresse oxidativo, resultado do aumento da produção de radicais livres ou esgotamento da defesa antioxidante endógena do corpo, tem sido implicado em sua patogênese.

Nosso estudo é um estudo de caso-controle que será feito no hospital de saúde da mulher e no departamento de bioquímica médica da universidade de assistência. Vamos estimar o nível tecidual de galectina-3 no endométrio de mulheres saudáveis ​​e com endometriose e detectar se a galectina-3 causa ou protege contra a endometriose. Além disso, mediremos o nível de marcadores de estresse oxidativo no endométrio de mulheres saudáveis ​​e com endometriose e investigaremos a correlação entre eles e mulheres com endometriose com galectina.

O tamanho da amostra é calculado pelo programa de computador Epi Info 2000. Com base na proporção esperada de deficiência de Galectina-3 entre os controles será de 20% e seu aumento nos casos em quatro vezes (Odd Ratio = 4) com poder de 80% e nível de confiança de 95%, o tamanho da amostra calculada é de 45 casos e 45 controles (totalmente 90 mulheres).

Os dados coletados incluirão idade, paridade, histórico menstrual, histórico atual (incluindo sintomas de dor, sangramento e infertilidade), histórico de uso de drogas, histórico de doenças anteriores e quaisquer investigações feitas. O objetivo do estudo será explicado a cada participante antes de preencher a folha de estudo. Um consentimento por escrito será obtido daqueles que aceitam participar do estudo, então as mulheres serão divididas em 2 grupos.

Grupo 1:

45 mulheres que tiveram endometriose confirmada cirurgicamente e histologicamente. Amostras endometriais (1-2 gramas) serão coletadas por laparoscopia, que é o padrão-ouro para o diagnóstico definitivo de endometriose.

Grupo 2:

45 mulheres livres de endometriose. Essas mulheres tinham ciclos menstruais normais e não receberam terapia hormonal nos 3 meses anteriores à amostragem. Amostras endometriais (1-2 gramas) serão retiradas através de biópsia por Punch após a inserção do DIU.

A galectina-3 será estimada por kit ELISA. Amostras endometriais (1-2 gramas) serão separadas de cada mulher durante a fase proliferativa (dias 5-15) e lavadas várias vezes com solução salina estéril a 0,9% para remover qualquer sangue dos tecidos. As amostras de tecido serão homogeneizadas por homogeneizador de tecido a 40.000rpm. Os extratos sobrenadantes serão coletados em tubos Ependorf e congelados a -80°C até análise por ELISA.

Os níveis teciduais de NO e TBARS (marcadores de estresse oxidativo) foram determinados por métodos químicos de acordo com os métodos descritos por Van Bezooijen et al, (1998) e Buege e Aust (1978) respectivamente. Também os níveis teciduais de atividade da catalase (CAT), glutationa (GSH) e superóxido dismutase (SOD) (anti-oxidantes) foram determinados por métodos químicos de acordo com os métodos descritos por Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) e Marklund (1985).