Galectin-3 bei Patienten mit Endometriose

Endometriose ist eine gutartige gynäkologische Erkrankung mit bösartigen biologischen Merkmalen und wird durch das Vorhandensein von Endometriumdrüsen und Stroma außerhalb der Gebärmutterhöhle definiert. Ektopische Endometriumzellen können sich auf Beckenorgane wie Rektum, Blase und Eierstöcke ausbreiten. Die Pathophysiologie der Endometriose ist wahrscheinlich multifaktoriell und umfasst ein Zusammenspiel mehrerer Faktoren. (Fauser BC, Diedrich K., Bouchard P., Domínguez F., Matzuk M., 2011)

Der Endometriumzyklus und die Implantation sind komplexe Prozesse. Veränderungen in den Spiegeln einiger regulatorischer Moleküle auf der Zelloberfläche treten während des Zyklus der streng kontrollierten Proliferation und Differenzierung auf. Die meisten dieser regulatorischen Moleküle und Mechanismen wurden noch nicht untersucht, Galectine, eine Unterfamilie von Lektinen, werden jedoch beschrieben, um lebenswichtige Zellfunktionen zu regulieren. (Leffler H. et al. Einführung in Galectine. Glycoconj j, 2004) Es wurde gezeigt, dass Gal-3 in vielen Zelltypen exprimiert wird, einschließlich Endometriumzellen und Trophoblastzellen (Riss D, Naude S 2003). Frühere Studien haben berichtet, dass Gal-3 spezifisch in Endometriumzellen in der sekretorischen Phase, in Plazentagewebe während der frühen Schwangerschaft und in der Decidua um die Implantationsstelle herum exprimiert wird. Eine andere Studie bestätigte, dass Gal-3 eine wichtige Rolle im Prozess der embryonalen Einnistung spielt (Liu YK, Hum Reprod.2009). Intrazelluläres Gal-3 förderte die Proliferation und Adhäsion in Endometriumzellen (Yang H, TaylorHS, 2011).

Das weibliche Fortpflanzungssystem ist anfällig für die schädlichen Auswirkungen reaktiver Sauerstoffspezies (ROS), die Proteine, Lipide und die DNA-Struktur schädigen. Oxidativer Stress ist ein Schlüsselfaktor für das Fortschreiten der Endometriose. Bisher wurden viele Theorien ausgearbeitet, um die Pathogenese der Endometriose zu klären, und oxidativer Stress, ein Ergebnis der erhöhten Produktion freier Radikale oder der Erschöpfung der körpereigenen antioxidativen Abwehr, wurde mit ihrer Pathogenese in Verbindung gebracht.

Unsere Studie ist eine Fall-Kontroll-Studie, die in einem Frauengesundheitskrankenhaus und einer Abteilung für medizinische Biochemie der Universität durchgeführt wird. Wir werden den Gewebespiegel von Galectin-3 im Endometrium sowohl von gesunden als auch von Frauen mit Endometriose abschätzen und feststellen, ob Galectin-3 zu Endometriose führt oder vor Endometriose schützt. Außerdem werden wir den Gehalt an Markern für oxidativen Stress im Endometrium sowohl bei gesunden Frauen als auch bei Endometriose-Frauen messen und die Korrelation zwischen ihnen und Galectin-in-Endometriose-Frauen untersuchen.

Die Probengröße wird durch das Software-Computerprogramm Epi Info 2000 berechnet. Basierend auf dem erwarteten Anteil des Galectin-3-Mangels unter den Kontrollen von 20 % und seiner Zunahme der Fälle um das Vierfache (Odd Ratio = 4) mit 80 % Power und einem Konfidenzniveau von 95 % beträgt die berechnete Stichprobengröße 45 Fälle und 45 Kontrollen (insgesamt 90 Frauen).

Die gesammelten Daten umfassen Alter, Parität, Menstruationsgeschichte, gegenwärtige Geschichte (einschließlich Schmerzsymptome, Blutungen und Unfruchtbarkeit), Arzneimittelgeschichte, Geschichte früherer Krankheiten und alle Untersuchungen, die durchgeführt wurden. Das Ziel der Studie wird jedem Teilnehmer vor dem Ausfüllen des Studienbogens erklärt. Von denjenigen, die an der Studie teilnehmen möchten, wird eine schriftliche Zustimmung eingeholt, dann werden die Frauen in 2 Gruppen eingeteilt.

Gruppe 1:

45 Frauen, bei denen eine chirurgisch und histolopathologisch bestätigte Endometriose festgestellt wurde. Endometriumproben (1-2 Gramm) werden durch Laparoskopie entnommen, die der Goldstandard für die definitive Diagnose von Endometriose ist.

Gruppe2:

45 Frauen frei von Endometriose. Diese Frauen hatten normale Menstruationszyklen und hatten innerhalb von 3 Monaten vor der Probenahme keine Hormontherapie erhalten. Endometriumproben (1-2 Gramm) werden ihnen durch Stanzbiopsie nach dem Einsetzen des IUP entnommen.

Galectin-3 wird mit einem ELISA-Kit bestimmt. Endometriumproben (1-2 Gramm) werden während der Proliferationsphase (Tage 5-15) von jeder Frau getrennt und mehrmals mit 0,9% steriler Kochsalzlösung gewaschen, um jegliches Blut aus den Geweben zu entfernen. Die Gewebeproben werden mit einem Gewebehomogenisator bei 40.000 U/min homogenisiert. Die Überstandsextrakte werden in Ependorf-Röhrchen gesammelt und bis zur Analyse durch ELISA bei –80°C eingefroren.

Die Gewebespiegel von NO und TBARS (Marker für oxidativen Stress) wurden durch chemische Verfahren gemäß den von Van Bezooijen et al. (1998) bzw. Buege und Aust (1978) beschriebenen Verfahren bestimmt. Auch die Gewebespiegel der Aktivität von Katalase (CAT), Glutathion (GSH) und Superoxiddismutase (SOD) (Antioxidantien) wurden durch chemische Verfahren gemäß den von Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) und Marklund (1985).