Galectina-3 in pazienti con endometriosi

L'endometriosi è una malattia ginecologica benigna con caratteristiche biologiche maligne ed è definita dalla presenza di ghiandole endometriali e stroma al di fuori della cavità uterina. Le cellule endometriali ectopiche possono diffondersi agli organi pelvici come il retto, la vescica e le ovaie. È probabile che la fisiopatologia dell'endometriosi sia multifattoriale e comporti un'interazione tra diversi fattori. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

Il ciclo endometriale e l'impianto sono processi complessi. Le alterazioni dei livelli di alcune molecole regolatrici sulla superficie cellulare si verificano durante il ciclo di proliferazione e differenziazione strettamente controllate. La maggior parte di queste molecole e meccanismi regolatori non è stata ancora studiata, tuttavia, le galectine, una sottofamiglia di lectine, sono delineate per regolare le funzioni vitali delle cellule. (Leffler H. et al Introduzione alle galectine. Glycoconj j,2004) È stato dimostrato che Gal-3 è espresso in molti tipi di cellule, comprese le cellule endometriali e le cellule del trofoblasto (Riss D, Naude S 2003). Precedenti studi hanno riportato che Gal-3 è specificamente espresso nelle cellule endometriali nella fase secretoria, nel tessuto placentare durante l'inizio della gravidanza e nella decidua che circonda il sito di impianto. Un altro studio ha verificato che Gal-3 svolge un ruolo importante nel processo di impianto embrionale (Liu YK, Hum Reprod.2009). Gal-3 intracellulare ha promosso la proliferazione e l'adesione nelle cellule endometriali (Yang H, TaylorHS, 2011).

Il sistema riproduttivo femminile è vulnerabile agli effetti dannosi delle specie reattive dell'ossigeno (ROS) che danneggiano le proteine, i lipidi e la struttura del DNA. Lo stress ossidativo è un fattore chiave per la progressione dell'endometriosi. Molte teorie sono state elaborate finora per chiarire la patogenesi dell'endometriosi e lo stress ossidativo, risultato dell'aumento della produzione di radicali liberi o dell'esaurimento della difesa antiossidante endogena del corpo, è stato implicato nella sua patogenesi.

Il nostro studio è uno studio caso-controllo che sarà condotto nell'ospedale per la salute della donna e nel dipartimento di biochimica medica dell'università assiut. Stimeremo il livello tissutale di galectina-3 nell'endometrio sia di donne sane che di donne con endometriosi e rileveremo se la galectina-3 causi o protegga dall'endometriosi. Inoltre, misureremo il livello dei marcatori di stress ossidativo nell'endometrio sia di donne sane che di donne con endometriosi e studieremo la correlazione tra questi e le donne con endometriosi galectina.

La dimensione del campione è calcolata dal programma informatico Epi Info 2000. Sulla base della proporzione prevista di carenza di galectina-3 tra i controlli sarà del 20% e il suo aumento nei casi di quattro volte (rapporto dispari = 4) con una potenza dell'80% e un livello di confidenza del 95%, la dimensione del campione calcolata è di 45 casi e 45 controlli (totalmente 90 donne).

I dati raccolti includeranno l'età, la parità, la storia mestruale, la storia attuale (compresi i sintomi di dolore, sanguinamento e infertilità), la storia della droga, la storia delle malattie precedenti e le eventuali indagini effettuate. Lo scopo dello studio sarà spiegato a ciascun partecipante prima di compilare il foglio di studio. Verrà ottenuto un consenso scritto da coloro che accetteranno di partecipare allo studio, quindi le donne saranno divise in 2 gruppi.

Gruppo 1:

45donne con endometriosi confermata chirurgicamente e istolopatologicamente. I campioni endometriali (1-2 grammi) saranno prelevati mediante laparoscopia che è il gold standard per la diagnosi definitiva dell'endometriosi.

Gruppo 2:

45 donne senza endometriosi. Queste donne avevano cicli mestruali normali e non avevano ricevuto terapia ormonale nei 3 mesi precedenti il ​​prelievo. I campioni endometriali (1-2 grammi) verranno prelevati da loro attraverso la biopsia Punch dopo l'inserimento dello IUD.

La galectina-3 sarà stimata mediante kit ELISA. I campioni endometriali (1-2 grammi) saranno separati da ciascuna donna durante la fase proliferativa (giorni 5-15) e lavati più volte con soluzione salina sterile allo 0,9% per rimuovere il sangue dai tessuti. I campioni di tessuto saranno omogeneizzati dall'omogeneizzatore di tessuti a 40.000 giri/min. Gli estratti supernatanti saranno raccolti in provette Ependorf e congelati a -80°C fino all'analisi mediante ELISA.

I livelli tissutali di NO e TBARS (marcatori dello stress ossidativo) sono stati determinati mediante metodi chimici secondo i metodi descritti rispettivamente da Van Bezooijen et al, (1998) e Buege e Aust (1978). Anche i livelli tissutali di catalasi (CAT), glutatione (GSH) e attività superossido dismutasi (SOD) (antiossidanti) sono stati determinati con metodi chimici secondo i metodi descritti da Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) e Marklund (1985).