Галектин-3 у пациентов с эндометриозом

Эндометриоз — доброкачественное гинекологическое заболевание со злокачественными биологическими характеристиками, определяемое наличием эндометриальных желез и стромы вне полости матки. Эктопические клетки эндометрия могут распространяться на органы малого таза, такие как прямая кишка, мочевой пузырь и яичники. Патофизиология эндометриоза, вероятно, является многофакторной и включает взаимодействие между несколькими факторами. (Фаузер Б.С., Дидрих К., Бушар П., Домингес Ф., Мацук М., 2011)

Эндометриальный цикл и имплантация — сложные процессы. Изменения уровней некоторых регуляторных молекул на клеточной поверхности происходят во время жестко контролируемого цикла пролиферации и дифференцировки. Большинство этих регуляторных молекул и механизмов еще не исследованы. Однако галектины, подсемейство лектинов, предназначены для регулирования жизненно важных функций клеток. (Leffler H. et al. Введение в галектины. Glycoconj j, 2004) Было показано, что Gal-3 экспрессируется во многих типах клеток, включая клетки эндометрия и клетки трофобласта (Riss D, Naude S 2003). Предыдущие исследования показали, что Gal-3 специфически экспрессируется в клетках эндометрия в секреторной фазе, в ткани плаценты на ранних сроках беременности и в децидуальной оболочке, окружающей место имплантации. Другое исследование подтвердило, что Gal-3 играет важную роль в процессе эмбриональной имплантации (Liu YK, Hum Reprod.2009). Внутриклеточный Gal-3 способствует пролиферации и адгезии в клетках эндометрия (Yang H, TaylorHS, 2011).

Женская репродуктивная система уязвима для вредного воздействия активных форм кислорода (АФК), которые повреждают белки, липиды и структуру ДНК. Окислительный стресс является ключевым фактором прогрессирования эндометриоза. До сих пор было разработано много теорий, чтобы прояснить патогенез эндометриоза, и окислительный стресс, являющийся результатом повышенного образования свободных радикалов или истощения эндогенной антиоксидантной защиты организма, вовлечен в его патогенез.

Наше исследование представляет собой исследование случай-контроль, которое будет проведено в больнице женского здоровья и на кафедре медицинской биохимии при университете. Мы оценим тканевой уровень галектина-3 в эндометрии как здоровых женщин, так и женщин с эндометриозом, и обнаружим, приводит ли галектин-3 к эндометриозу или защищает от него. Кроме того, мы измерим уровень маркеров окислительного стресса в эндометрии как здоровых женщин, так и женщин с эндометриозом и исследуем корреляцию между ними и галектином у женщин с эндометриозом.

Размер выборки рассчитывается с помощью компьютерной программы Epi Info 2000. Исходя из ожидаемой доли дефицита галектина-3 среди контролей, которая составит 20%, и ее увеличения в случаях в четыре раза (отношение нечетных = 4) с мощностью 80% и уровнем достоверности 95%, расчетный размер выборки составляет 45 случаев и 45 контролей. (всего 90 женщин).

Собранные данные будут включать возраст, паритет, менструальный анамнез, настоящий анамнез (включая симптомы боли, кровотечения и бесплодия), историю приема лекарств, историю предыдущих заболеваний и любые проведенные исследования. Цель исследования будет объяснена каждому участнику перед заполнением листа исследования. У желающих принять участие в исследовании будет получено письменное согласие, после чего женщины будут разделены на 2 группы.

Группа 1:

45 женщин, у которых хирургически и гистопатологически подтвержден эндометриоз. Образцы эндометрия (1-2 грамма) будут взяты с помощью лапароскопии, которая является золотым стандартом для окончательной диагностики эндометриоза.

Группа2:

45 женщин свободны от эндометриоза. Эти женщины имели нормальные менструальные циклы и не получали гормональную терапию в течение 3 месяцев до взятия пробы. Образцы эндометрия (1-2 грамма) будут взяты у них с помощью биопсии Punch после введения ВМС.

Галектин-3 будет оцениваться с помощью набора ELISA. Образцы эндометрия (1-2 грамма) будут отделены от каждой женщины во время пролиферативной фазы (дни 5-15) и несколько раз промыты 0,9% стерильным физиологическим раствором для удаления крови из тканей. Образцы тканей будут гомогенизированы гомогенизатором тканей со скоростью 40 000 об/мин. Экстракты надосадочной жидкости собирают в пробирки Эпендорфа и замораживают при температуре -80°C до анализа с помощью ELISA.

Тканевые уровни NO и TBARS (маркеры окислительного стресса) определяли химическими методами в соответствии с методами, описанными Van Bezooijen et al. (1998) и Buege и Aust (1978) соответственно. Также тканевые уровни активности каталазы (CAT), глутатиона (GSH) и супероксиддисмутазы (SOD) (антиоксидантов) определяли химическими методами по методикам, описанным Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) и Марклунд (1985).