Galectina-3 en pacientes con endometriosis

La endometriosis es un trastorno ginecológico benigno con características biológicas malignas y se define por la presencia de glándulas endometriales y estroma fuera de la cavidad uterina. Las células endometriales ectópicas pueden diseminarse a órganos pélvicos como el recto, la vejiga y los ovarios. Es probable que la fisiopatología de la endometriosis sea multifactorial e implique una interacción entre varios factores. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

El ciclo endometrial y la implantación son procesos complejos. Las alteraciones en los niveles de algunas moléculas reguladoras en la superficie celular ocurren durante el ciclo de proliferación y diferenciación estrechamente controlado. La mayoría de estas moléculas y mecanismos reguladores aún no se han investigado. Sin embargo, las galectinas, una subfamilia de lectinas, están delineadas para regular funciones celulares vitales. (Leffler H. et al. Introducción a las galectinas. Glycoconj j, 2004) Se ha demostrado que Gal-3 se expresa en muchos tipos de células, incluidas las células endometriales y las células trofoblásticas (Riss D, Naude S 2003). Estudios previos informaron que Gal-3 se expresa específicamente en las células endometriales en la fase secretora, en el tejido placentario durante el embarazo temprano y en la decidua que rodea el sitio de implantación. Otro estudio verificó que Gal-3 juega un papel importante en el proceso de implantación embrionaria (Liu YK, Hum Reprod.2009). Gal-3 intracelular promovió la proliferación y adhesión en células endometriales (Yang H, TaylorHS, 2011).

El sistema reproductor femenino es vulnerable a los efectos nocivos de las especies reactivas de oxígeno (ROS) que dañan las proteínas, los lípidos y la estructura del ADN. El estrés oxidativo es un factor clave para la progresión de la endometriosis. Se han elaborado muchas teorías hasta ahora para aclarar la patogenia de la endometriosis y el estrés oxidativo, resultado del aumento de la producción de radicales libres o del agotamiento de las defensas antioxidantes endógenas del cuerpo, se ha implicado en su patogenia.

Nuestro estudio es un estudio de casos y controles que se realizará en el hospital de salud de la mujer y en el departamento de bioquímica médica de la universidad de assiut. Estimaremos el nivel tisular de galectina-3 en el endometrio de mujeres sanas y con endometriosis y detectaremos si la galectina-3 conduce o protege contra la endometriosis. Además, mediremos el nivel de marcadores de estrés oxidativo en el endometrio de mujeres sanas y con endometriosis e investigaremos la correlación entre ellos y la galectina en mujeres con endometriosis.

El tamaño de la muestra se calcula mediante el programa informático Epi Info 2000 software. Con base en la proporción esperada de deficiencia de galectina-3 entre los controles será del 20 % y su aumento en los casos en cuatro veces (Odd Ratio = 4) con una potencia del 80 % y un nivel de confianza del 95 %, el tamaño de muestra calculado es de 45 casos y 45 controles (totalmente 90 mujeres).

Los datos recopilados incluirán edad, paridad, historial menstrual, historial actual (incluidos síntomas de dolor, sangrado e infertilidad), historial de medicamentos, historial de enfermedades previas y cualquier investigación que se haya realizado. El objetivo del estudio se explicará a cada participante antes de llenar la hoja de estudio. Se obtendrá un consentimiento por escrito de quienes den la bienvenida a participar en el estudio, luego las mujeres se dividirán en 2 grupos.

Grupo 1:

45mujeres a las que se les encontró endometriosis confirmada quirúrgica e histopatológicamente. Se tomarán muestras endometriales (1-2 gramos) por laparoscopia, que es el estándar de oro para el diagnóstico definitivo de endometriosis.

Grupo 2:

45 mujeres libres de endometriosis. Estas mujeres tenían ciclos menstruales normales y no habían recibido terapia hormonal en los 3 meses anteriores a la toma de muestras. Se les tomarán muestras endometriales (1-2 gramos) a través de una biopsia con sacabocados después de la inserción del DIU.

La galectina-3 se estimará mediante el kit ELISA. Las muestras de endometrio (1-2 gramos) se separarán de cada mujer durante la fase proliferativa (días 5-15) y se lavarán varias veces con solución salina estéril al 0,9 % para eliminar la sangre de los tejidos. Las muestras de tejido se homogeneizarán mediante un homogeneizador de tejidos a 40.000 rpm. Los extractos sobrenadantes se recogerán en tubos Ependorf y se congelarán a -80°C hasta su análisis por ELISA.

Los niveles tisulares de NO y TBARS (marcadores de estrés oxidativo) se determinaron por métodos químicos según los métodos descritos por Van Bezooijen et al, (1998), y Buege y Aust (1978) respectivamente. También se determinaron los niveles tisulares de actividad de catalasa (CAT), glutatión (GSH) y superóxido dismutasa (SOD) (antioxidantes) por métodos químicos según los métodos descritos por Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) y Marklund (1985).