Galectin-3 hos pasienter med endometriose

Endometriose er en godartet gynekologisk lidelse med ondartede biologiske egenskaper og er definert av tilstedeværelsen av endometriekjertler og stroma utenfor livmorhulen. Ektopiske endometrieceller kan spre seg til bekkenorganer som endetarm, blære og eggstokker. Patofysiologien til endometriose er sannsynligvis multifaktoriell og involverer et samspill mellom flere faktorer. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

Endometriesyklusen og implantasjonen er komplekse prosesser. Endringer i nivåer av noen regulatoriske molekyler på celleoverflaten skjer under syklusen tett kontrollert spredning og differensiering. De fleste av disse regulatoriske molekylene og mekanismene er ennå ikke undersøkt, men Galectins, en underfamilie av lektiner, er avgrenset for å regulere vitale cellefunksjoner. (Leffler H. et al. Introduksjon til galectiner. Glycoconj j,2004) Det er vist at Gal-3 kommer til uttrykk i mange celletyper, inkludert endometrieceller og trofoblastceller (Riss D, Naude S 2003). Tidligere studier har rapportert at Gal-3 er spesifikt uttrykt i endometrieceller i sekretorisk fase, i placentavev under tidlig graviditet og i decidua rundt implantasjonsstedet. En annen studie bekreftet at Gal-3 spiller en viktig rolle i prosessen med embryonal implantasjon (Liu YK, Hum Reprod.2009). Intracellulær Gal-3 fremmet spredning og adhesjon i endometrieceller (Yang H, TaylorHS, 2011).

Kvinners reproduksjonssystem er sårbart for de skadelige effektene av reaktive oksygenarter (ROS) som skader proteiner, lipider og DNA-struktur. Oksidativt stress er en nøkkelfaktor for progresjon av endometriose. Mange teorier har blitt utarbeidet så langt for å klargjøre endometriose-patogenesen og oksidativt stress, et resultat av økt produksjon av frie radikaler eller uttømming av kroppens endogene antioksidantforsvar, har vært involvert i patogenesen.

Vår studie er en case-control studie som vil bli gjort i kvinnehelsesykehus og medisinsk biokjemiavdeling -assiut universitet. Vi vil estimere vevsnivået av galectin-3 i endometrium hos både friske kvinner og endometriose kvinner og oppdage om galectin-3 fører til eller beskytter mot endometriose. Vi vil også måle nivået av oksidative stressmarkører i endometrium hos både friske kvinner og endometriose kvinner og undersøke korrelasjonen mellom dem og galectin-in endometriose kvinner.

Prøvestørrelsen beregnes av Epi Info 2000-programvaren. Basert på den forventede andelen Galectin-3-mangel blant kontrollene vil være 20 % og økningen i tilfeller med fire ganger (Odd Ratio = 4) med 80 % kraft og et konfidensnivå på 95 %, er den beregnede prøvestørrelsen 45 tilfeller og 45 kontroller (totalt 90 kvinner).

Dataene som samles inn vil inkludere alder, paritet, menstruasjonshistorie, nåværende historie (inkludert symptomer på smerte, blødning og infertilitet), medikamenthistorie, historie med tidligere sykdommer og eventuelle undersøkelser som ble gjort. Målet med studien vil bli forklart for hver deltaker før utfylling av studieark. Det vil innhentes skriftlig samtykke fra de som ønsker å delta i studien, deretter deles kvinner inn i 2 grupper.

Gruppe 1:

45 kvinner som ble funnet å ha kirurgisk og histolopatologisk bekreftet endometriose. Endometrieprøver (1-2 gram) vil bli tatt ved laparoskopi som er gullstandarden for definitiv diagnose av endometriose.

Gruppe 2:

45 kvinner fri for endometriose. Disse kvinnene hadde normale menstruasjonssykluser og hadde ikke mottatt hormonbehandling innen 3 måneder før prøvetaking. Endometrieprøver (1-2 gram) vil bli tatt fra dem gjennom Punch-biopsi etter innsetting av spiral.

Galectin-3 vil bli estimert ved hjelp av ELISA-sett. Endometrieprøver (1-2 gram) vil bli separert fra hver kvinne under proliferativ fase (dager 5-15) og vasket flere ganger med 0,9 % steril saltløsning for å fjerne eventuelt blod fra vevet. Vevsprøvene vil homogeniseres med vevshomogenisator ved 40 000 rpm. Supernatantekstraktene vil bli samlet i Ependorf-rør og frosset ved -80°C til analyse med ELISA.

Vevsnivåene av NO og TBARS (oksidative stressmarkører) ble bestemt ved kjemiske metoder i henhold til metodene beskrevet av henholdsvis Van Bezooijen et al, (1998), og Buege og Aust (1978). Også vevsnivåene av katalase (CAT), glutation (GSH) og superoksiddismutase (SOD) aktivitet (antioksidanter) ble bestemt ved kjemiske metoder i henhold til metodene beskrevet av Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) og Marklund (1985).