Galektiini-3 potilailla, joilla on endometrioosi

Endometrioosi on hyvänlaatuinen gynekologinen sairaus, jolla on pahanlaatuisia biologisia ominaisuuksia ja joka määritellään kohdun limakalvon rauhasten ja strooman esiintymisenä kohdunontelon ulkopuolella. Ektooppiset endometriumin solut voivat levitä lantion elimiin, kuten peräsuoleen, virtsarakkoon ja munasarjoihin. Endometrioosin patofysiologia on todennäköisesti monitekijäinen ja siihen liittyy useiden tekijöiden välinen vuorovaikutus. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

Endometriumin kierto ja implantaatio ovat monimutkaisia ​​prosesseja. Muutoksia joidenkin solun pinnalla olevien säätelymolekyylien tasoissa tapahtuu tiukasti kontrolloidun proliferaation ja erilaistumisen aikana. Suurin osa näistä säätelymolekyyleistä ja -mekanismeista ei ole vielä tutkittu. Galektiinit, lektiinien alaryhmä, on kuitenkin rajattu säätelemään elintärkeitä solutoimintoja. (Leffler H. et ai. Johdanto galektiineihin. Glycoconj j, 2004) On osoitettu, että Gal-3 ilmentyy monissa solutyypeissä, mukaan lukien endometriumin solut ja trofoblastisolut (Riss D, Naude S 2003). Aiemmat tutkimukset ovat raportoineet, että Gal-3 ekspressoituu spesifisesti kohdun limakalvon soluissa eritysvaiheessa, istukan kudoksessa raskauden alkuvaiheessa ja implantaatiokohtaa ympäröivässä deciduassa. Toinen tutkimus vahvisti, että Gal-3:lla on tärkeä rooli alkion implantaatioprosessissa (Liu YK, Hum Reprod.2009). Solunsisäinen Gal-3 edisti proliferaatiota ja adheesiota kohdun limakalvon soluissa (Yang H, TaylorHS, 2011).

Naisen lisääntymisjärjestelmä on herkkä reaktiivisten happilajien (ROS) haitallisille vaikutuksille, jotka vahingoittavat proteiineja, lipidejä ja DNA:n rakennetta. Oksidatiivinen stressi on avaintekijä endometrioosin etenemisessä. Tähän mennessä on kehitetty monia teorioita endometrioosin patogeneesin selvittämiseksi, ja oksidatiivinen stressi, joka on seurausta lisääntyneestä vapaiden radikaalien tuotannosta tai kehon endogeenisen antioksidanttipuolustuksen heikkenemisestä, on liitetty sen patogeneesiin.

Tutkimuksemme on tapauskontrollitutkimus, joka tehdään naissairaalassa ja lääketieteellisen biokemian osastolla -assiut-yliopistossa. Arvioimme galektiini-3:n kudostason endometriumissa sekä terveillä että endometrioosia sairastavilla naisilla ja havaitsemme, johtaako galektiini-3 endometrioosiin tai suojaako sitä siltä. Lisäksi mittaamme oksidatiivisen stressin markkerien tasoa endometriumissa sekä terveillä että endometrioosinaisilla ja tutkimme korrelaatiota heidän ja galektiinia sairastavien endometrioosinaisten välillä.

Otoskoon laskee Epi Info 2000 -tietokoneohjelma. Perustuen odotettuun Galectin-3-puutoksen osuuteen kontrollien joukossa on 20 % ja sen tapausten lisääntyminen nelinkertaiseksi (Odd Ratio = 4) teholla 80 % ja luottamustasolla 95 %, laskettu näytekoko on 45 tapausta ja 45 kontrollia. (yhteensä 90 naista).

Kerätyt tiedot sisältävät iän, pariteetin, kuukautiskierron, nykyisen historian (mukaan lukien kivun, verenvuodon ja hedelmättömyyden oireet), lääkehistorian, aiempien sairauksien historian ja mahdolliset tehdyt tutkimukset. Tutkimuksen tavoite selitetään jokaiselle osallistujalle ennen opintolomakkeen täyttämistä. Tutkimukseen tervetulleilta hankitaan kirjallinen suostumus, jonka jälkeen naiset jaetaan kahteen ryhmään.

Ryhmä 1:

45 naista, joilla todettiin kirurgisesti ja histolopatologisesti vahvistettu endometrioosi. Endometriumnäytteet (1-2 grammaa) otetaan laparoskopialla, joka on kultainen standardi endometrioosin lopullisessa diagnoosissa.

Ryhmä 2:

45 naista vapaana endometrioosista. Näillä naisilla oli normaali kuukautiskierto, eivätkä he olleet saaneet hormonihoitoa 3 kuukauden aikana ennen näytteenottoa. Endometriumnäytteet (1-2 grammaa) otetaan niistä Punch-biopsialla IUD:n asettamisen jälkeen.

Galectin-3 arvioidaan ELISA-sarjan avulla. Endometriumnäytteet (1-2 grammaa) erotetaan jokaisesta naisesta proliferatiivisen vaiheen aikana (päivät 5-15) ja pestään useita kertoja 0,9-prosenttisella steriilillä suolaliuoksella veren poistamiseksi kudoksista. Kudosnäytteet homogenoidaan kudoshomogenisaattorilla nopeudella 40 000 rpm. Supernatanttiuutteet kerätään Ependorf-putkiin ja jäädytetään -80 °C:ssa ELISA-analyysiin asti.

NO:n ja TBARS:n (hapetusstressimarkkerit) kudostasot määritettiin kemiallisilla menetelmillä Van Bezooijen et ai. (1998) ja Buegen ja Austin (1978) kuvaamien menetelmien mukaisesti. Myös katalaasin (CAT), glutationin (GSH) ja superoksididismutaasin (SOD) aktiivisuuden (antioksidantit) kudostasot määritettiin kemiallisilla menetelmillä Clairbornen (1985), Beutlerin et ai. kuvaamien menetelmien mukaisesti. (1963) ja Marklund (1985).