Galectin-3 hos patienter med endometrios

Endometrios är en benign gynekologisk störning med maligna biologiska egenskaper och definieras av närvaron av endometriekörtlar och stroma utanför livmoderhålan. Ektopiska endometrieceller kan spridas till bäckenorgan som ändtarm, urinblåsa och äggstockar. Patofysiologin för endometrios är sannolikt multifaktoriell och involverar ett samspel mellan flera faktorer. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

Endometriecykeln och implantation är komplexa processer. Förändringar i nivåer av vissa regulatoriska molekyler på cellytan inträffar under cykeln hårt kontrollerad proliferation och differentiering. De flesta av dessa reglerande molekyler och mekanismer har ännu inte undersökts, men Galectins, en underfamilj av lektiner, är avgränsade för att reglera vitala cellfunktioner. (Leffler H. et al. Introduktion till galectiner. Glycoconj j,2004) Det har visats att Gal-3 uttrycks i många celltyper, inklusive endometrieceller och trofoblastceller (Riss D, Naude S 2003). Tidigare studier har rapporterat att Gal-3 uttrycks specifikt i endometrieceller i den sekretoriska fasen, i placentavävnad under tidig graviditet och i decidua som omger implantationsstället. En annan studie verifierade att Gal-3 spelar en viktig roll i processen för embryonal implantation (Liu YK, Hum Reprod.2009). Intracellulär Gal-3 främjade proliferation och vidhäftning i endometrieceller (Yang H, TaylorHS, 2011).

Kvinnors reproduktionssystem är sårbart för de skadliga effekterna av reaktiva syrearter (ROS) som skadar proteiner, lipider och DNA-struktur. Oxidativ stress är en nyckelfaktor för progression av endometrios. Många teorier har utarbetats hittills för att klargöra endometriospatogenes och oxidativ stress, ett resultat av ökad produktion av fria radikaler eller utarmning av kroppens endogena antioxidantförsvar, har varit inblandad i dess patogenes.

Vår studie är en fallkontrollstudie som kommer att göras på sjukhus och medicinsk biokemiavdelning -assiut universitet. Vi kommer att uppskatta vävnadsnivån av galectin-3 i endometrium hos både friska kvinnor och endometrios kvinnor och upptäcka om galectin-3 leder till eller skyddar mot endometrios. Vi kommer också att mäta nivån av oxidativ stressmarkörer i endometrium hos både friska kvinnor och endometrioskvinnor och undersöka korrelationen mellan dem och galectin-i endometrioskvinnor.

Provstorleken beräknas med hjälp av programvaran Epi Info 2000. Baserat på den förväntade andelen Galectin-3-brist bland kontroller kommer att vara 20 % och dess ökning i fall fyra gånger (udda förhållande = 4) med 80 % effekt och en konfidensnivå på 95 %, är den beräknade provstorleken 45 fall och 45 kontroller (totalt 90 kvinnor).

Data som samlas in kommer att inkludera ålder, paritet, menstruationshistoria, nuvarande historia (inklusive symtom på smärta, blödning och infertilitet), läkemedelshistoria, historia av tidigare sjukdomar och eventuella undersökningar som har gjorts. Syftet med studien kommer att förklaras för varje deltagare innan studiebladet fylls i. Ett skriftligt medgivande kommer att erhållas från de som välkomnar att delta i studien, därefter delas kvinnor in i 2 grupper.

Grupp 1:

45kvinnor som visade sig ha kirurgiskt och histolopatologiskt bekräftad endometrios. Endometrieprover (1-2 gram) kommer att tas med laparoskopi som är guldstandarden för definitiv diagnos av endometrios.

Grupp 2:

45 kvinnor fria från endometrios. Dessa kvinnor hade normala menstruationscykler och hade inte fått hormonbehandling inom 3 månader före provtagning. Endometrieprover (1-2 gram) kommer att tas från dem genom Punch-biopsi efter införande av spiral.

Galectin-3 kommer att uppskattas med ELISA-kit. Endometrieprover (1-2 gram) kommer att separeras från varje kvinna under proliferativ fas (dag 5-15) och tvättas flera gånger med 0,9 % steril koksaltlösning för att avlägsna eventuellt blod från vävnaderna. Vävnadsproverna kommer att homogeniseras med vävnadshomogenisator vid 40 000 rpm. Supernatantextrakten kommer att samlas upp i Ependorf-rör och frysas vid -80°C till analys med ELISA.

Vävnadsnivåerna av NO och TBARS (oxidativ stressmarkörer) bestämdes med kemiska metoder enligt metoderna som beskrivs av Van Bezooijen et al, (1998), respektive Buege och Aust (1978). Även vävnadsnivåerna av katalas (CAT), glutation (GSH) och superoxiddismutas (SOD) aktivitet (antioxidanter) bestämdes med kemiska metoder enligt metoderna beskrivna av Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) och Marklund (1985).