Rôle prédictif des nouveaux biomarqueurs pour les patientes hypersensibles à la radiation du cancer du sein (Biorise) (BIORISE)

Les mécanismes moléculaires impliqués dans les réponses induits par les radiations sont complexes et les approches protéomiques peuvent être utilisées pour mieux comprendre le processus de réaction global de radiation ionisante et pour identifier les marqueurs prédictifs radio-sensibles potentiels. Jusqu'à présent, peu de publications ont abordé la détermination des patients radiosensibles.

Sur la base de nos résultats précédents et afin d'améliorer la valeur prédictive positive du test d'effet tardif induit par le rayonnement, nous avons développé une approche protéomique quantitative pour identifier les marqueurs radiobiologiques prédictifs chez les patients souffrant de toxicité sévère. Premièrement, quatre patients ont été sélectionnés avec une faible valeur RILA parmi les études prospectives mentionnées ci-dessus. Deux patients n'avaient pas de toxicité au moins quatre ans après la fin du traitement, tandis que deux autres patients ont développé une toxicité sévère supérieure à la grade 2. Les lymphocytes T ont été isolés du sang total et la moitié d'entre eux ont été irradiés in vitro. Il a ensuite effectué un flux de travail de protéomique quantitatif en utilisant un marquage ITRAQ 8-PLEX et après plusieurs fractionnations pour optimiser la résolution de l'analyse (fractionnement hors gel suivi d'une chromatographie nanoliquante), les protéines ont été identifiées par spectrométrie de masse en tandem (4800 plus MALDI TOF / TOF). Plus de 1300 protéines totales ont été identifiées avec une grande confiance (95%, un peptide unique). À 0 Gy, 135 protéines ont été exprimées différentiellement entre les patients avec ou sans toxicité radio-induite sévère. Dans les lymphocytes T irradiés (8 Gy), 107 protéines ont été exprimées différentiellement entre les patients atteints de toxicité radio-induite ou sans grave. Parmi eux, cinq protéines (AK2, adénylate kinase 2; IDH2, isocitrate déshydrogénase 2 (NADP +); ANX1, annexine 1; Apex1, ADN- (site apurinique ou apyrimidinique) Lyase et HSC70, choc thermique cognate 71 kDA) avec le rato de la protéine (> 1,5) et le rato de la différence avec le rato de la pertine Les contrôles ont été sélectionnés pour la validation consécutive. Ces protéines sont impliquées dans plusieurs mécanismes, notamment le métabolisme et la production d'énergie, l'apoptose, la protéine de liaison au calcium et la réparation des dommages à l'ADN. Ces cinq protéines font actuellement l'objet d'une demande de brevet.

Ensuite, 10 autres patientes seront recrutées (5 patientes avec une fibrose mammaire de grade ≥ 2 et 5 patientes sans toxicité) qui ont présenté une faible valeur RILA pour valider l'expression des protéines par Western Blotting. Les résultats ont montré que toutes les protéines ont été surexprimées chez les patients lymphocytes T irradiés par une toxicité sévère par rapport aux patients sans toxicité.

Cependant, pour confirmer le niveau d'expression des protéines chez les patients à effets tardifs induits par les radiations et pour déterminer la valeur de performance, en particulier la valeur prédictive positive, d'un test sanguin basé sur le dosage d'un panel de cinq protéines, il est nécessaire de valider ces résultats préliminaires par une étude prospective sur une grande cohorte de patients